小鼠前列腺癌细胞 用途与合成方法
小鼠前列腺癌细胞分离自小鼠源前列腺癌的上皮细胞样贴壁细胞,主要用于RM-1(RM1)小鼠前列腺癌细胞的体外研究。RM-1(RM1)小鼠前列腺癌细胞Chemicalbook支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。培养条件:DMEM+10%FBS,37℃,5%CO2,冻存条件:90%FBS+10%DMSO。 MyC-CaP 是一种上皮样细胞系,于2005年从一只16个月大患有前列腺癌的雄性小鼠的前列腺中分离出来。这只动物从未暴露于激素去势。尽管没有事先暴露于雄激素撤退,这些细胞仍然具有扩增的雄激素受体基因。这些细胞表达野生型雄激素受体(AR),保留雄激素依赖性转基因表达,并在软琼脂和小鼠中表现出雄激素依赖性生长
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养,补加培养基至6ml。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%,即可进行传代培养。
注:第一次传代推荐传代比例为1:2,以后传代比例可根据客户需要自己决定。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。
下面T25瓶为类;
1,细胞冻存时,取上清,可使用血球计数板计数。
2,4min,1000rpm离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和DMSO,轻轻混匀,DMSO终浓度为10%,细胞密度1-2xE6/ml,每支冻存管冻存1ml细胞悬液,注意冻存管做好标识。
3,将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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