AML12小鼠正常肝细胞

AML12（alpha mouse liver 12）细胞是从3个月大的转染人TGF-α基因的小鼠（CD1-MT42品系）小鼠的正常肝脏中分离的肝细胞。通过电子显微镜观察发现，AML12细胞表现出典型的肝细胞特征，如过氧化物酶体和胆管样结构。AML12细胞保持表达血清蛋白（白蛋白、α1抗胰蛋白酶和转铁蛋白）和缝隙连接蛋白（连接蛋白26和32）高水平mRNA的能力，并且仅含有乳酸脱氢酶同工酶5。AML12细胞表达高水平的人TGF-α和低水平的小鼠TGF-α。AML12细胞肝脏特异性蛋白的表达随着培养时间的推移而降低，但可以通过在无血清培养基中培养细胞而重新激活。AML12细胞可以用于3D细胞培养、高通量筛选、毒理学研究，也是一种合适的转染宿主。 上皮细胞样(多角形或梭形) 1.尽量吸干净T25瓶原培养基；2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS；3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层；4.将培养瓶放入37度培养箱消化；5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化；6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清；7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里；8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养； 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定） 肝；自发永生；CD-1 line MT42 transgenic；3月龄 贴壁细胞