大鼠 白细胞介素1Β(IL-1Β)ELISA试剂盒 用途与合成方法
双抗体夹心法
白细胞介素1β(IL-1β)是一种在各种细胞中产生的促炎症细胞因子,包括单核细胞、组织巨噬细胞、角质细胞和其他上皮细胞。IL-1α和IL-1β都与相同的受体结合,并具有类似甚至相同的生物学特性。这些细胞因子具有广泛的活性,包括通过诱导IL-2的释放刺激胸腺细胞的增殖,B细胞的成熟和增殖,有丝分裂的FGF样活性和刺激滑膜细胞释放前列腺素和胶原酶的能力。然而,IL-1β是一种分泌型的细胞因子,而IL-1α主要是一种细胞相关的细胞因子。
兔 大鼠 白细胞介素1Β(IL-1Β)ELISA试剂盒采用双抗体夹心法ELISA技术:将捕获抗体包被于酶标板上,捕获样品及标准品中的待测物IL-1β,清洗后,再加入生物素标记的检测抗体进行孵育后清洗,形成“捕获抗体-抗原-检测抗体”免疫复合物,随后加入链霉亲和素偶联的辣根过氧化物酶进行孵育,待孵育结束后清洗,接着加入TMB显色后,若样本中有待测物则显蓝色,加入终止液停止反应。检测过程中游离的成分均被洗去,用酶标仪在450 nm处测OD值,颜色的深浅和样品中的待测物的含量呈正比,通过绘制标准曲线计算出样本中IL-1β的浓度。 可检测样本中猪的IL-1β,且与其类似物无明显交叉反应。混合蛋白质溶液时,应始终避免起泡。为了避免交叉污染,在添加每个标准品、样品和试剂时应更换移液器枪头。此外,每种试剂应单独使用容器。
酶标孵育:每孔加入100μL 1×SA-HRP工作液,盖上封板胶纸,37℃避光反应30分钟,清洗4次,拍干。
底物显色:每孔首先加入50μL显色液A,随后加入50μL显色液B,轻轻混匀,盖上封板胶纸,37℃避光反应15分钟。
终止反应:待显色反应结束后,每孔加入50μL终止液,轻轻混匀,5分钟内用预热完成的酶标仪在450nm处测吸光值。
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