CB-839

CB-839 是一种有效的，选择性的，口服生物可利用的 glutaminase 抑制剂，对重组人GAC的 IC50 为 24 nM。Phase 1。 CB-839 exhibits time-dependent and slowly reversible kinetics. IC50 values for glutaminase inhibition by CB-839 following preincubation with rHu-GAC for-1 hour are < 50 nmol/L, at least 13-fold lower than with BPTES. CB-839 has antiproliferative activity in a triple-negative breast cancer (TNBC) cell line, HCC-1806, while no antiproliferative activity is observed in an estrogen receptor–positive cell line, T47D. In the mouse TNBC model, single agent CB-839 (200 mg/kg, p.o.) suppresses tumor growth by 61% relative to vehicle control. In the mouse JIMT-1 xenograft model, CB-839 alone (200 mg/kg, p.o.) results in 54% tumor growth inhibition (TGI) relative to vehicle control, combination of CB-839 (200 mg/kg, p.o.) with paclitaxel (10 mg/kg, p.o.) largely suppresses the regrowth of the tumors resulting in a TGI relative to vehicle control of 100%. CB-839 (Telaglenastat) 是一种有效的，选择性的，口服生物可利用的 glutaminase 抑制剂，对重组人GAC的 IC50 为 24 nM。CB-839(Telaglenastat)可诱导自噬并具有抗肿瘤活性。Phase 1。

Target	Value
Glutaminase (Cell-free assay)	24 nM

CB-839表现出时间依赖性和缓慢可逆的动力学特性。与rHu-GAC预培养1小时后，CB-839抑制谷氨酰胺酶的IC50值<50 nmol/L，至少比BPTES低13倍。CB-839对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞系，HCC-1806，具有抗增殖活性，而对雌激素受体阳性细胞系，T47D，没有抗增殖活性。

在小鼠TNBC模型中，单剂CB-839 (200 mg/kg, p.o.)抑制相对于载体对照61%的肿瘤生长。在小鼠JIMT-1异种移植模型中，CB-839单独用药(200 mg/kg, p.o.)导致相对载体对照54%的肿瘤生长抑制(TGI)，CB-839 (200 mg/kg, p.o.)和paclitaxel (10 mg/kg, p.o.)联合用药很大程度上抑制肿瘤的再生长，相对于载体对照，引起100%的肿瘤生长抑制(TGI)。

在250mL三颈圆底烧瓶中，将N-[6-[4-(5-氨基-1,3,4-噻二唑-2-基)丁基]-3-哒嗪基]-3-(三氟甲氧基)苯乙酰胺（5.5g，12.3mmol，1.0当量）溶解于N，N-二甲基乙酰胺（44mL，8.0体积比）。加入吡啶-2-乙酸（2.56g，14.8mmol，1.2当量）。通过加料漏斗以5mL/min的速率滴加丙基膦酸酐（50%乙酸乙酯溶液，11.0g，17.3mmol，1.41当量）。滴加过程中，反应液内部温度从20.1°C升至26.1°C。反应通常在4小时后完成（通过LC/MS监测）。反应完成后，将反应液冷却至0℃，并用甲基乙基酮（50mL）稀释。加入水（50mL），用2.5N氢氧化钠水溶液（28mL）调节pH至6。通过抽滤收集黄色沉淀，并用异丙醇和水（1:1，50mL）洗涤。将固体转移至100mL圆底烧瓶中，在异丙醇和水（9:1，50mL）中浆化。将浆液加热至65.1℃保持8小时，随后在16小时内冷却至室温。通过抽滤收集灰白色沉淀，并用异丙醇（10mL）洗涤。将产物在高真空下干燥至恒重，得到2-(吡啶-2-基)-N-(5-(4-(6-(2-(3-(三氟甲氧基)苯基)乙酰胺)哒嗪-3-基)丁基)-1,3,4-噻二唑-2-基)乙酰胺（CB-839），产量5.27g（76%）。1H NMR（300MHz，DMSO-d6）δ12.67（s，1H），11.32（s，1H），8.53-8.49（m，1H），8.22-8.19（d，J=9.12Hz，1H），7.78-7.76（t，1H），7.58-7.26（m，7H），4.01（s，2H），3.87（s，2H），3.01（bs，2H），2.90（bs，2H），1.73（bs，4H）。CB-839游离碱的XRD图谱（形式B）如图2所示，其特征峰位于2θ值为3.64; 7.32; 7.92; 8.53; 9.30; 9.38; 11.02; 11.98; 14.70; 15.54; 15.87; 16.50; 16.59; 18.06; 18.39; 19.10; 20.06; 20.12; 20.61; 21.37; 21.89; 22.41; 22.74; 23.72; 24.10; 24.65; 25.14; 25.78; 26.49; 27.32; 27.55; 28.26; 29.88; 31.20; 31.80; 31.52; 32.80; 34.30; 35.20; 36.41; 38.53; 40.08; 40.94;和43.86。

参考文献：

[1] Patent: WO2016/22969, 2016, A1. Location in patent: Page/Page column 41; 42