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发布人:武汉恩玑生命科技有限公司
发布日期:2026/3/10 10:12:11
血清、血浆酶来源参照表
ELISA实验的核心原理是抗原与抗体的特异性结合,而样本中的内源性酶会非特异性催化底物反应,或破坏抗原、抗体结构,导致实验信号异常,产生干扰。很多客户在开展ELISA实验时,常因未明确样本中各类酶的来源、未针对性加入酶抑制剂,出现检测结果偏差、假阳性或假阴性等问题。为帮助客户精准规避这一实验痛点,高效完成ELISA实验,EnkiLife整理了《血清、血浆酶来源参照表》,同时结合实验核心需求,科普血清、血浆酶的来源及与ELISA实验干扰的关联,助力大家通过明确酶来源、合理添加酶抑制剂,排除干扰、保障实验结果可靠。
抑制剂具体用量应根据厂家说明书使用
丝氨酸蛋白酶
凝血酶(Thrombin)、纤溶酶(Plasmin)、胰蛋白酶
(Trypsin)、弹性蛋白酶(Elastase)
• 血小板释放多种酶原
• 中性粒细胞是弹性蛋白酶的主要来源
• 肝细胞合成的凝血因子原(如纤维蛋白原)
• 血管内皮细胞分泌组织蛋白酶和激肽释放酶
血清:血小板在凝血过程中被激活,释放大量活性丝氨酸蛋白酶,活性显著升高。
血浆:因加入EDTA/柠檬酸等抗凝剂抑制凝血级联,酶活性相对较低。
Aprotinin
Leupeptin
PMSF(冰上配制)
AEBSF
α1抗胰蛋白酶(α1AT)
蛋白酶抑制剂混合液(Protease Inhibitor Cocktail)
半胱氨酸蛋白酶
Cathepsin B、
Cathepsin H 、Cathepsin L、Cathepsin S
• 巨噬细胞和单核细胞含有大量溶酶体
• 中性粒细胞
• 血小板
血清:溶酶体中富含Cathepsins,这些细胞在激活或凋亡时会释放酶原或活性酶进入血液。另外,血小板激活后可释放少量半胱氨酸蛋白酶。
血浆:抗凝剂防止细胞破裂,酶活性更低。
E-64
Leupeptin
蛋白酶抑制剂混合液(Protease Inhibitor Cocktail)
金属蛋白酶(MMP)
MMP2、MMP9、ADAMTS13
• 血小板
• 巨噬细胞/单核细胞/中性粒细胞
• 内皮细胞
血清:血小板激活后大量释放MMP-2/MMP9,活性显著升高。
血浆:EDTA等金属螯合剂抑制金属酶活性,浓度相对较低。
EDTA
EGTA(特异抑制Ca²⁺依赖金属酶)
1,10-Phenantroline
DTPA
天冬氨酸蛋白酶
胃蛋白酶(Pepsin)、肾素 (Renin)、Cathepsin D
• 肾脏 (肾小球旁细胞)
• 肝脏
• 巨噬细胞
血清:血液凝固会导致血小板破裂,可能会释放一些细胞内酶原。
血浆:由于使用了抗凝剂,血细胞保持完整状态,细胞内酶原的释放更少。
Pepstatin A
蛋白酶抑制剂混合液(Protease Inhibitor Cocktail)
氨肽酶
Aminopeptidase N (APN, CD13)、Leucine Aminopeptidase (LAP)、Aminopeptidase A (APA)
• 血小板(主要来源)
• 白细胞
• 红细胞
血清:凝血过程中,血小板会释放大量的酶原,在离心后激活为活性酶。
血浆:加入EDTA或肝素等抗凝剂可以有效抑制血小板聚集,显著减少血小板来源的氨肽酶释放。
Bestatin
Amastatin
4,7-Dimethyl-1,10-phenanthroline
EDTA
磷酸酶
酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(ALP)、蛋白酪氨酸磷酸酶(PTPs)
• 血小板
• 白细胞(尤其是嗜中性粒细胞)
因为血液凝固,血小板会被激活并释放其颗粒内容物。血小板中富含酸性磷酸酶,因此血清中的酸性磷酸酶活性通常比血浆高。
Na₃VO₄
NaF
激酶
酪氨酸激酶(Tyrosine Kinases)、丝氨酸/苏氨酸激酶(Ser/Thr Kinases)、复合激酶(Complex Kinases)
• 血小板
• 白细胞
• 血管内皮细胞
血清:血小板刺激后会释放一种特异性的cAMP依赖性蛋白激酶(PKA),能够磷酸化血清中的特定蛋白。
血浆:不含血小板的血浆(PPP)中通常不含有血小板释放的活性PKA,但可能含有低水平的其他激酶或酶原。
Staurosporine(广谱激酶抑制剂)
激酶抑制剂混合物(Protease and Phosphatase Inhibitor Cocktail)
脂肪酶 / 磷脂酶
胰脂肪酶 (Pancreatic Lipase)、脂蛋白脂肪酶 (LPL)、磷脂酶 A2 (PLA2)、磷脂酶C(PLC)
• 血小板(PLA₂主要来源)
• 血管内皮细胞
• 胰腺(胰脂肪酶主要来源)
血清:血小板激活后PLA₂大量释放,活性升高。
血浆:抗凝剂抑制血小板激活,活性相对较低。
Orlistat
Methyl indoxam
Varespladib
糖苷酶
β-半乳糖苷酶 (β-Galactosidase)
β-N-乙酰葡萄糖胺酶 (β-N-Acetylglucosaminidase)
α-甘露糖苷酶 (α-mannosidase)
• 血小板
• 白细胞
血清:在血液凝固过程中,血小板被激活后会释放β-葡萄糖苷酶。
血浆:血小板被抑制,β-葡萄糖苷酶的释放量显著减少。
Deoxynojirimycin
DNJ
PUGNAc
Castanospermine
最后需要提醒大家,血清、血浆酶的来源虽有明确的常规参考,但受个体差异、检测方法、样本处理方式等因素影响,酶活性的正常范围及来源解读需结合具体场景。
后续我们也将持续更新ELISA实验相关内容,为大家提供更全面、实用的参考资料,助力大家更好地开展科研实验相关工作。

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