死细胞干扰数据？Elabscience STYX™ 近红外可固定活力染料检测试剂盒，精准“圈出”活细胞

内容概要

在流式细胞术中，准确区分活细胞与死细胞是获取可靠数据的前提。Elabscience STYX™ 近红外可固定活力染料检测试剂盒，利用氨基反应性荧光染料，通过检测细胞膜完整性来精准评估细胞活力。其信号可耐受固定、破膜及冻存处理，为多色流式实验设计提供了便利。

背景介绍

在流式细胞分析中，死细胞会通过非特异性结合、释放DNA等物质干扰检测结果，并可能产生自身荧光，导致假阳性或数据解读困难。因此，在样本制备环节去除或标记死细胞至关重要。传统的核酸染料（如PI、7-AAD）存在无法固定或光谱与常用荧光染料重叠等局限。新一代的氨基反应性活死染料，通过与细胞表面及胞内游离氨基共价结合，实现了稳定、持久的染色效果。

产品介绍

Elabscience STYX™ Near-IR Fixable Viability Kit ，中文名称：STYX™ 近红外可固定活力染料检测试剂盒(货号: E-CK-A168) 是一种膜不可渗透的、氨基反应性的荧光染料。其核心特性如下：

• 作用机制：对活细胞，仅染色细胞膜表面；对膜破损的死细胞，染料可进入胞内，与大量游离氨基结合，产生显著更强的荧光信号。

• 固定兼容性：染色后，经过固定、破膜甚至冻存处理，荧光信号依然保持稳定。

• 光谱特性：激发/发射波长在近红外区域，与其他常用荧光染料（如FITC, PE, APC等）光谱重叠小，易于在多色方案中组合。

• 规格与保存：提供50、100、200 Tests 三种规格，-20°C干燥避光保存，有效期12个月（冰袋运输）。

检测原理

Elabscience STYX™ 近红外可固定活力染料检测试剂盒的核心原理基于细胞膜完整性差异和氨基共价结合：

1. 活细胞：细胞膜完整，染料无法进入细胞内部，仅能标记膜表面的有限游离氨基，产生弱荧光。

2. 死细胞：细胞膜破损，染料自由进入细胞，与细胞内部大量的游离氨基（如蛋白质、肽段上的胺基）发生不可逆的共价结合，产生强荧光。

3. 结果：通过流式细胞仪检测，根据荧光强度差异，即可清晰地将活细胞（阴性/弱阳性）与死细胞（强阳性）群体分开。信号在固定、破膜后保持稳定，如图所示（C57BL/6小鼠脾细胞活死1:1混合样本，固定前后分析结果一致）。

应用场景

STYX™ 近红外可固定活力染料是一种非膜渗透性胺反应性荧光染料，可与细胞表面和细胞内部的游离胺不可逆地结合。在活细胞中，染色仅限于表面。当细胞膜受损时，染料进入并结合细胞内胺，导致死细胞发出明显更强的荧光。这可以清楚地区分活细胞和死细胞。固定、透化和冷冻保存后染色保持稳定。

产品优势

• 信号稳定，兼容后续处理：染色后能耐受固定、破膜及冻存，便于进行胞内或核内抗原检测，且实验结果不受样本处理时间限制。

• 光谱选择灵活：近红外发射波长，可有效避免与FITC、PE、APC等常见荧光染料的光谱重叠，简化多色实验设计。

• 操作流程简便：染色步骤可整合至表面染色流程之前（Fc封闭前进行），无需额外复杂步骤。

• 结果清晰可靠：活细胞与死细胞群体间荧光反差大，区分界限明显，数据分析客观。

总结

Elabscience STYX™ 近红外可固定活力染料检测试剂盒为流式细胞术中的细胞活力评估提供了一个稳定、兼容且灵活的解决方案。其基于氨基共价结合的机制确保了信号的持久性，使实验设计不再受限于后续固定破膜步骤；近红外光谱特性则让它能轻松融入复杂多色方案。对于追求高质量流式数据的科研工作者而言，这是一款值得关注的可靠工具。