武汉艾美捷科技有限公司

一、产品概述

由艾美捷代理Bethyl Laboratories推出的山羊抗小鼠IgG1重链-HRP偶联多克隆抗体（货号：A90-105P）为辣根过氧化物酶（HRP）直接偶联的山羊抗小鼠IgG1重链特异性多克隆抗体，经固相吸附处理和亲和纯化，确保对小鼠IgG1亚型的高选择性识别。该抗体适用于酶联免疫吸附测定（ELISA）、免疫细胞化学（ICC）、免疫组织化学（IHC）和蛋白质印迹（WB）等多种检测平台。HRP的直接偶联省去了二抗孵育步骤，可显著简化实验流程并降低非特异性背景。产品浓度为1 mg/ml，HRP与抗体的摩尔比为4:1，提供高灵敏度的信号放大能力。

二、关键规格

参数 | 详细信息

靶标 | 小鼠IgG1重链

反应性 | 小鼠

应用 | ELISA, ICC, IHC, WB

宿主 | 山羊

克隆性 | 多克隆

形式 | 完整IgG

同型 | 山羊IgG

偶联物 | HRP（辣根过氧化物酶）

纯度 | 抗原亲和纯化

抗原种属 | 小鼠

浓度 | 1 mg/ml

保存条件 | 2 – 8 °C

有效期 | 收货后1年

缓冲液 | 磷酸盐缓冲液（PBS），含0.2% BSA和0.05% Pro-Clean 400

三、分子生物学背景

小鼠免疫球蛋白G1（IgG1）是小鼠血清中含量最高的IgG亚型之一。IgG1具有以下重要特性：

胎盘转运：能够通过胎盘屏障，为胎儿提供被动免疫。

Fc受体结合：与Fc受体结合能力强，介导调理吞噬和抗体依赖性细胞介导的细胞毒性（ADCC）。

补体激活：有效激活补体经典途径，参与病原体清除。

在实验应用中，小鼠IgG1是单克隆抗体最常用的亚型之一。本抗体特异性识别小鼠IgG1的重链，适用于检测小鼠来源的IgG1型一抗，或对小鼠IgG1亚型进行定量和定性分析。

四、产品特性与质量控制

亚型特异性

本抗体经固相吸附（solid phase adsorbed）处理，并通过亲和层析纯化，确保对小鼠IgG1的高度选择性。经免疫电泳和ELISA验证：

特异性反应：与小鼠IgG1重链特异性结合。

交叉反应性：与小鼠IgA、IgM、IgG2a、IgG2b、IgG2c、IgG3及IgE的交叉反应率低于1%。

异常情况提示：部分杂交瘤克隆可能表达异常的免疫球蛋白相关肽段，可能导致与本抗体的非预期识别，建议在使用前验证特定克隆的反应性。

HRP偶联特性

偶联方法：抗体经亲和纯化后，与辣根过氧化物酶（HRP）通过化学交联偶联。

摩尔比：HRP与抗体的摩尔比为4:1，确保每个抗体分子携带多个酶分子，提供较强的信号放大能力。

浓度测定：偶联前采用比尔定律测定免疫球蛋白浓度（1 mg/ml IgG在A280处吸光度为1.4）。

稳定剂与防腐剂

缓冲液为磷酸盐缓冲液（PBS），含：

0.2% BSA：牛血清白蛋白作为稳定剂，防止抗体在低浓度下非特异性吸附，并增强储存稳定性。

0.05% Pro-Clean 400：一种广谱防腐剂，替代叠氮化钠，因其不抑制HRP活性，适用于酶偶联抗体。

五、储存与稳定性

保存条件：2–8°C，严禁冷冻。冷冻会导致蛋白变性和HRP活性丧失。

有效期：自收货之日起1年，在未受污染且正确储存条件下。

注意事项：本抗体含HRP，避免接触强氧化剂或金属离子。Pro-Clean 400作为防腐剂，在推荐浓度下对细胞培养实验可能有影响，但用于固定样本的ICC/IHC无影响。

六、应用与推荐稀释度

重要提示：制造商未对所列全部应用进行逐一验证，以下稀释度为基于同类抗体的推荐起始范围，用户需根据具体实验体系进行优化。

酶联免疫吸附测定（ELISA）

推荐稀释范围：1:10,000 – 1:100,000

操作说明：用于检测包被或捕获的小鼠IgG1型抗体。建议使用封闭液（如1% BSA-PBS或5%脱脂牛奶-PBS）稀释抗体。加入TMB或ABTS等HRP底物显色。

优化建议：从1:20,000起始，根据信号强度调整。高灵敏度需求时可使用1:10,000；若背景偏高，可提高至1:50,000以上。

免疫组织化学（IHC）

推荐稀释范围：1:200 – 1:2,000

样本类型：福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）组织切片或冰冻切片。

操作说明：适用于检测组织切片中小鼠IgG1型一抗的结合。需注意内源性过氧化物酶的封闭（如3% H2O2处理10–15分钟）。

优化建议：起始稀释度1:500。孵育时间室温1–2小时或4°C过夜。DAB或AEC显色。

免疫细胞化学（ICC）

推荐稀释范围：1:200 – 1:2,000

样本类型：培养细胞（固定和透化处理后）。

操作说明：与IHC类似，需封闭内源性过氧化物酶。适用于检测细胞爬片或培养板中一抗的结合。

优化建议：起始稀释度1:500。若信号弱，可降至1:200；若背景高，升至1:2,000。

蛋白质印迹（WB）

推荐稀释范围：1:2,000 – 1:20,000

操作说明：用于检测膜上小鼠IgG1型一抗识别的目标蛋白。本抗体识别一抗的重链（约55 kDa），因此在非还原或还原条件下均可使用。

注意事项：当检测免疫沉淀产物或细胞裂解液中的一抗时，目标蛋白可能位于IgG重链附近。由于本抗体为HRP直接偶联，无需二抗孵育，可显著缩短实验时间。

优化建议：起始稀释度1:5,000。使用化学发光底物（如ECL）检测。注意：本抗体识别的是小鼠IgG1重链，而非轻链，因此不会产生约25 kDa的轻链信号。

七、相关产品推荐

抗小鼠IgG（全分子）-HRP（用于检测所有小鼠IgG亚型）

抗小鼠IgG轻链特异性-HRP（用于IP-WB，避免重链干扰）

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本抗体以其高亚型特异性、HRP直接标记和多平台兼容性，是小鼠IgG1相关免疫检测的理想选择。