"HT-29 Cells人结肠癌细胞低代次复苏|STR图谱
背景信息:HT-29 Cells人结肠癌细胞低代次复苏|STR图谱该细胞是1964年由FoghJ用移植培养方法和含15%FBS的F12培养从原发性肿瘤分离的。近来,已建株的培养细胞用含血清的McCoy's5a培养基培养。该细胞系在裸鼠中成瘤,也能在类固醇处理的地鼠中成瘤。该细胞可合成IgA、A、TGFβ结合蛋白和黏素;表达尿激酶受体,但没有检测到血浆酶原活性;不表达CD4,但细胞表面表达半乳糖神经酰胺(HIV的可能替代受体)。该细胞系癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、Myb、sis、fos阳性;p53基因过表达,并且在273位密码子处发
HT-29 Cells人结肠癌细胞低代次复苏|STR图谱英文别名::HT 29; HT29
传代比例:1:2-1:4(HT-29 Cells人结肠癌细胞低代次复苏|STR图谱首次传代建议1:2)
来源说明:HT-29 Cells人结肠癌细胞低代次复苏|STR图谱主要来源ATCC、ECACC、DSMZ、RCB等细胞库
细胞对低温的耐受性较强。在温度不低于0℃的情况下,细胞代谢虽然减缓,但通常不会受到永久性伤害。例如,将细胞置于25-35℃的环境中,细胞仍能生存和生长,只是增殖速度明显减慢。若将细胞短暂放置于4℃数小时后再恢复到37℃,细胞仍能继续生长。这一特性使得低温保存成为细胞存储的重要手段。
消化过程的核心在于蛋白酶对细胞外基质的适度解离。胰蛋白酶作为最常用的消化酶,其作用原理是通过切割细胞表面蛋白中的精氨酸和赖氨酸残基,破坏细胞与培养皿之间的连接蛋白。然而,这个看似简单的过程却需要精确控制多个关键参数。首先是酶浓度,过高浓度会导致细胞膜蛋白过度消化,损伤细胞完整性;过低浓度则延长消化时间,增加细胞应激。研究表明,0.05%-0.25%的胰酶浓度适用于大多数贴壁细胞系,但具体浓度需根据细胞类型进行优化。
生长特性:HT-29 Cells人结肠癌细胞低代次复苏|STR图谱贴壁生长
形态特性:HT-29 Cells人结肠癌细胞低代次复苏|STR图谱上皮细胞样
换液周期:HT-29 Cells人结肠癌细胞低代次复苏|STR图谱每周2-3次
产品包装:复苏发货:HT-29 Cells人结肠癌细胞低代次复苏|STR图谱T25培养瓶(一瓶)或冻存发货:1ml冻存管(两支)
物种来源:HT-29 Cells人结肠癌细胞低代次复苏|STR图谱来源于人源、鼠源等其它物种来源
培养条件:37°C、5%CO₂、饱和湿度环境,使用含10%-20%FBS的基础培养基。
消化传代:使用0.25%胰酶-EDTA溶液,37°C孵育1-2分钟,轻拍培养瓶促进细胞脱落。(悬浮细胞可省略这步操作)
污染防控:严格无菌操作,定期检测支原体污染,必要时使用双抗预防细菌污染。
细胞状态:传代和消化过程中,应密切关注细胞状态,避免过度消化或机械损伤导致细胞活性下降。
培养观察:定期观察HT-29 Cells人结肠癌细胞低代次复苏|STR图谱生长状态,注意培养基的pH值变化和细胞密度,及时换液和传代。细胞复苏:复苏细胞时,应快速将冻存管从液氮中取出并置于37℃水浴中解冻,然后转移到含新鲜培养基的无菌管中并吹打混匀。整个复苏过程应尽可能在5-10分钟内完成,以确保细胞的高存活率。
细胞代谢随温度降低而逐渐减慢。当温度降至冰点以下时,细胞内的游离水会形成冰晶,导致细胞膜和细胞器结构的机械损伤,最终引发细胞死亡。然而,通过添加冷冻保护剂(如二甲亚砜或甘油),可以显著提高细胞在深低温环境下的存活率。这些保护剂能够降低冰晶的形成概率,并减少低温对细胞结构的破坏。
营养供给是细胞的生命基石。就像新生儿需要母乳或配方奶粉提供全面营养,初代细胞或刚刚复苏的冻存细胞对营养环境有着近乎苛刻的要求。科研人员会为这些""细胞婴儿""精心配制含有10-15%胎牛血清的基础培养基,这相当于为细胞准备的高级""配方奶粉""。血清中富含的生长因子、激素和附着因子,就像母乳中的免疫球蛋白和益生菌,能为细胞提供最贴心的保护。而对于某些娇贵的干细胞或免疫细胞,还需要额外添加EGF、bFGF等""营养强化剂"",这些细胞因子相当于婴幼儿的DHA和维生素补充剂,能显著提高细胞的贴壁率和增殖活性。实验室数据表明,在复苏后24小时内添加适量血清的细胞,其存活率可比常规培养提高30%以上。
细胞传代:传代时,应使用适量的胰蛋白酶溶液进行消化,并在显微镜下观察细胞消化情况。消化下来的细胞容易成团,需要吹打吹散。传代后,应确保细胞均匀分布在培养瓶或培养皿中。
细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。一般使用冻存液进行冻存,并置于液氮中储存。
污染检测:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。
细胞接收流程:收到细胞后,应首先观察细胞状态,然后进行75%酒精消毒处理。将细胞置于37℃培养箱中放置2-4小时以稳定HT-29 Cells人结肠癌细胞低代次复苏|STR图谱状态。当细胞密度达到80%-90%时,即可进行首次传代培养。操作规范:在细胞培养和处理过程中,需严格遵守无菌操作规范,以避免细胞污染和交叉污染。
消化条件:室温下用胰酶消化1-3分钟。
生物安全等级:1级。
空泡现象:在密集培养时,细胞中可见巨大的空泡,这是细胞的正常特性,无需担心。
血清比例:使用10%-20%的血清浓度有助于优化HT-29 Cells人结肠癌细胞低代次复苏|STR图谱实验条件,提高实验的重复性和稳定性。这一浓度范围经过多年实验和实践的验证,被认为是较为适宜的选择。
瓶装500ml血清推荐采用三步解冻法:首先从-70℃转移至4℃冰箱静置24小时,此时约60%的冰晶完成相变;随后移至室温(22±2℃)直至完全液化,此阶段需每30分钟轻柔摇晃瓶身(倾斜45度旋转5圈),此举可使脂蛋白分布均匀度提升40%;最后分装前需肉眼观察有无分层现象。要特别警惕两种错误操作:①直接-20℃→37℃水浴解冻会导致28%的蛋白质发生不可逆聚集;②37℃环境停留超过2小时会使IGF-1生长因子活性丧失65%。
直接倒掉上清液能够提高操作效率,节省时间。但这种方式存在一定风险,直接倾倒时较难控制力度和角度,如果操作不慎,容易使细胞沉淀随着上清液一起流出,导致细胞损失,而且可能会因液体快速流下冲击细胞沉淀造成细胞的物理性损伤。在实际的细胞传代操作中,应根据细胞的特性、实验的要求以及个人的操作熟练程度来选择合适的上清液处理方式。对于新手或者处理珍贵细胞系时,建议优先采用移液枪吸走的方式,以保障细胞的活性和传代的成功率。而在积累了丰富经验且对实验条件有充分把握的情况下,可以根据具体情况灵活运用直接倒掉上清液的方法,在保证实验质量的同时提高工作效率。
GT1-1 Cells小鼠垂体瘤细胞复苏中心|有STR图谱
ZR-75-1+luc Cells人乳腺癌细胞复苏中心|有STR图谱
NCI-H69 Cells人小细胞肺癌细胞复苏中心|有STR图谱
MM1.S Cells人多发性骨髓瘤细胞复苏中心|有STR图谱
HT-29 Cells人结肠癌细胞低代次复苏|STR图谱
E14 Cells小鼠胚胎干细胞复苏中心|有STR图谱
SKOV3-GFP Cells人卵巢癌细胞复苏中心|有STR图谱
13F3 Cells(提供STR鉴定图谱)
H-1734 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:4-1:6传代。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:JM-1细胞、3T3NIH细胞、HBL-100细胞
D283MED Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:每周换液2-3次。;生长特性:悬浮细胞的多细胞聚集体,和一些贴壁 Cells;形态特性:上皮细胞;相关产品有:Lu99A细胞、HEK293S细胞、DoTc2细胞
NCIH2066 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:每周换液2-3次;生长特性:悬浮生长;形态特性:聚团悬浮;相关产品有:CAL-62细胞、hTERT-HME-1细胞、SUDHL10细胞
Intestinal Epithelioid Cell line No. 18 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:Hx-147细胞、H510A细胞、NIH:OVCAR3细胞
Panc 10.05 Cells人胰腺癌细胞复苏中心|有STR图谱
CF-1 MEF Cells小鼠胚胎成纤维细胞复苏中心|有STR图谱
HL-60 Cells人早幼粒急性白血病细胞复苏中心|有STR图谱
CFSC-8B Cells大鼠肝星形细胞复苏中心|有STR图谱
MDA-MB-468 Cells人乳腺癌细胞复苏中心|有STR图谱
SK-N-AS Cells人神经母细胞瘤细胞复苏中心|有STR图谱
Reuber H35 Cells;背景说明:在糖皮质激素、胰岛素或cAMP衍生物的诱导下可以产生酪酸基转移酶;可被逆转录病毒感染;可产生白蛋白、转铁蛋白、凝血酶原;在AxC大鼠中可以成瘤。;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:TC-1[JHU-1]细胞、M-1 myeloid leukemia细胞、JM细胞
NCI-H3255 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长 ;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:CATH-a细胞、C8166-CD4细胞、H-196细胞
BNL-CL.2 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长 ;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:NW-MEL-38细胞、HSF细胞、P31-FUJ细胞
PL-5 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:CCRF-CEM细胞、UACC-893细胞、NTera2 cl.D1细胞
H256 C6 CHMP2B IVS5AS GG-GC Cells(提供STR鉴定图谱)
RTE Cells大鼠气管上皮细胞复苏中心|有STR图谱
HUVEC-C Cells人脐静脉内皮细胞复苏中心|有STR图谱
NPC/HK-1 Cells人鼻咽癌细胞复苏中心|有STR图谱
OVCAR-8+luc Cells人卵巢癌腺癌细胞复苏中心|有STR图谱
MV-4-11-LUC Cells人急性单核细胞白细胞复苏中心|有STR图谱
HAP1 QSOX1 (-) 2 Cells(提供STR鉴定图谱)
PLA801-95D Cells;背景说明:这是一株高转移肺癌。;传代方法:消化3-5分钟,1:2,3天内可长满;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:SJSA细胞、Panc05.04细胞、MPC 11细胞
NE-1 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:159 PT细胞、MGC803细胞、HSC-6细胞
RERF-LC-MS Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:每周换液2次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:NH6细胞、H-211细胞、RBL-I细胞
HGMC Cells;背景说明:肾小球系膜;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:MFE 296细胞、DSL-6A/C1细胞、OVCAR-8细胞
HT-29 Cells人结肠癌细胞低代次复苏|STR图谱
HCC827 Cells人非小细胞肺癌细胞复苏中心|有STR图谱
SK-BR-3 Cells人乳腺腺癌细胞复苏中心|有STR图谱
BT Cells牛鼻甲骨细胞复苏中心|有STR图谱
BT474-LUC Cells人乳腺导管癌细胞复苏中心|有STR图谱
TPC-1 Cells人甲状腺癌细胞复苏中心|有STR图谱
NCI-H520 Cells人肺鳞癌细胞复苏中心|有STR图谱
G292 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Nb 2细胞、HS940细胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate细胞
RPE-1 Cells;背景说明:视网膜色素上皮;hTERT永生;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Human Hepatocyte Line 5细胞、H-1793细胞、HFLS细胞
BEAS2B Cells;背景说明:从一位非癌个体的正常人支气管上皮病理切片分离出上皮细胞。这些细胞用腺病毒12-SV40病毒杂交病毒感染并克隆。DEAS-2B细胞保留了对血清反应进行鳞关分化的能力,并有用于筛选诱导或影响分化及致癌的化学或生物制剂。细胞角蛋白及SV40抗原染色阳性。;传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:JOSK-M细胞、MCA 38细胞、WM-239-A细胞
HCC-1187 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代,每周换液2—3次;生长特性:混合生长;形态特性:上皮样;相关产品有:High 5细胞、Wistar Institute-38细胞、OCI-Ly8细胞
HuH7-SLC2A14-KO-c4 Cells(提供STR鉴定图谱)
L2 Cells(提供STR鉴定图谱)
SW1990 Cells人胰腺癌细胞复苏中心|有STR图谱
NCI-BL2009 Cells人淋巴母细胞复苏中心|有STR图谱
HT29-MTX-E12 Cells人结肠癌细胞复苏中心|有STR图谱
Hi-five(BTI-TN-5B1-4) Cells昆虫细胞复苏中心|有STR图谱
OS-RC-2 Cells人肾癌细胞复苏中心|有STR图谱
SK-LU-1 Cells人低分化肺腺癌细胞复苏中心|有STR图谱
HPAC Cells人胰腺腺泡上皮癌细胞复苏中心|有STR图谱
MT-7 Cells(提供STR鉴定图谱)
OLHNI-2 Cells(提供STR鉴定图谱)
Royan C8 Cells(提供STR鉴定图谱)
UCLA 144 Cells(提供STR鉴定图谱)
ZM90630 Cells(提供STR鉴定图谱)
WERI-Rb-1 Cells人视网膜神经胶质瘤细胞复苏中心|有STR图谱
BTI-Tn-5B1-4 Cells昆虫细胞复苏中心|有STR图谱
SNU601 Cells人胃癌细胞复苏中心|有STR图谱
ANA-1 [Mouse macrophage] Cells小鼠巨噬细胞复苏中心|有STR图谱
C166 Cells小鼠血管内皮细胞复苏中心|有STR图谱
CTX-TNA2 Cells大鼠脑I型星形胶质细胞复苏中心|有STR图谱
HG02345 Cells(提供STR鉴定图谱)
MBT-2 Cells;背景说明:膀胱移行细胞癌;C3H/He;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:HEY-A8细胞、HT-1376细胞、EC109细胞
hTERT-HPNE Cells;背景说明:胰腺导管;HGNC-TERT转化;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:OVCAR-8/ADR细胞、LUDLU1细胞、Lewis lung carcinoma细胞
HEK 293T/17 Cells;背景说明:胚肾;5型腺病毒及SV40转化;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:SKML-28细胞、FHs 74 Int细胞、BHT-101细胞
A375-RFP Cells人黑色素瘤细胞复苏中心|有STR图谱
NCI-H446-luc Cells人小细胞肺癌细胞复苏中心|有STR图谱
C6-Luc Cells大鼠脑胶质瘤细胞复苏中心|有STR图谱
OS-RC-2 Cells人肾癌细胞复苏中心|有STR图谱
UMUC-3 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:P388D1细胞、Psi-2 DAP细胞、MOLT 16细胞
H748 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:3-4天换液1次。;生长特性:悬浮生长 ;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:MJ细胞、H-2009细胞、CAL 27细胞
H748 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:3-4天换液1次。;生长特性:悬浮生长 ;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:MJ细胞、H-2009细胞、CAL 27细胞
CT26.CL25 Cells小鼠结肠癌细胞复苏中心|有STR图谱
GP2d Cells人结肠癌细胞复苏中心|有STR图谱
HT-29 Cells人结肠癌细胞低代次复苏|STR图谱
U-87MG-GFP Cells人恶性胶质瘤细胞复苏中心|有STR图谱
PC-12-GFP Cells大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞复苏中心|有STR图谱
KYSE-520 Cells人食管鳞癌细胞复苏中心|有STR图谱
H345 Cells;背景说明:小细胞肺癌;骨髓转移;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:NPC-TW039细胞、UMR106细胞、P3-X63-Ag8细胞
CAL120 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:IMR90细胞、OCILY-19细胞、RK-13细胞
NCI-H2170 Cells;背景说明:该细胞1989年建系,源自一位患有肺鳞状细胞癌的男性,该患者不吸烟;传代方法:1:3—1:6传代,3—5天换液1次;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞;相关产品有:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2细胞、BHT101细胞、COLO-824细胞
SUM190PT Cells;背景说明:乳腺癌;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:PLA-801C细胞、MLE 12细胞、NOMO1细胞
H-661 Cells;背景说明:该细胞1982年建系,源自一位患有大细胞肺癌的男性的胸腔积液。该细胞角蛋白、波形蛋白阳性。;传代方法:1:3—1:5传代,每周换液2—3次;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:PCI-4M细胞、MKN7细胞、HCC1359细胞
H747 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2—1:4传代,每周换液2次;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:SUD-4细胞、MDA MB 231细胞、SUM-52PE细胞
CAL 148 Cells;背景说明:乳腺癌;胸腔积液转移;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:TPC-1细胞、SNK-1细胞、HRA-19细胞
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