"A-427 Cells人肺癌细胞低代次保种|STR图谱
【培养观察】
定期观察A-427 Cells人肺癌细胞低代次保种|STR图谱生长状态,注意培养基的pH值变化和细胞密度,及时换液和传代。
【细胞复苏】
复苏细胞时,应快速将冻存管从液氮中取出并置于37℃水浴中解冻,然后转移到含新鲜培养基的无菌管中并吹打混匀。整个复苏过程应尽可能在5-10分钟内完成,以确保细胞的高存活率。
【细胞传代】
传代时,应使用适量的胰蛋白酶溶液进行消化,并在显微镜下观察细胞消化情况。消化下来的细胞容易成团,需要吹打吹散。传代后,应确保细胞均匀分布在培养瓶或培养皿中。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。一般使用冻存液进行冻存,并置于液氮中储存。
【A-427 Cells人肺癌细胞低代次保种|STR图谱英文别名】
A427; A427N
烘箱(干燥箱)的干热灭菌功能对玻璃器皿至关重要。鼓风式设计确保160℃高温下热量均匀分布,但操作中存在三个技术要点:一是必须同步启动鼓风与加热功能,避免局部过热;二是100℃以下才能开启箱门,防止玻璃器皿因骤冷破裂;三是需使用耐高温牛皮纸包裹器械,普通棉质材料在高温下碳化产生的微粒可能影响细胞贴壁。有新研发的真空烘箱将灭菌时间缩短30%,同时降低能源消耗。
细胞培养瓶破裂或渗漏是实验室最紧急的情况之一。当发现容器破损时,应立即执行三级处理流程:首先将破损培养瓶放入生物安全柜,用消毒剂浸泡的纱布覆盖裂口;随后将培养物转移至备用培养瓶,转移过程需严格保证无菌操作;最后对工作台面进行彻底消毒。值得注意的是,聚乙烯材质的培养瓶在反复冻融后更易产生微裂纹,建议使用前进行透光检查。对于珍贵细胞系,可预先分装冻存备份,并建立定期镜检制度,每周至少两次检查培养容器完整性。
【背景信息】
A-427 Cells人肺癌细胞低代次保种|STR图谱是一种人肺癌细胞系,最初是从一名患有非小细胞肺癌(Non-Small Cell Lung Cancer, NSCLC)的患者的胸腔积液中分离并培养的。是由Giard·D·J建立,源自一位52岁的肺癌男性白人患者。
【传代比例】
1:2-1:4(A-427 Cells人肺癌细胞低代次保种|STR图谱首次传代建议1:2)
【来源说明】
A-427 Cells人肺癌细胞低代次保种|STR图谱主要来源ATCC、ECACC、DSMZ、RCB等细胞库
【生长特性】
A-427 Cells人肺癌细胞低代次保种|STR图谱贴壁生长
【形态特性】
A-427 Cells人肺癌细胞低代次保种|STR图谱上皮细胞样
【换液周期】
A-427 Cells人肺癌细胞低代次保种|STR图谱每周2-3次
【产品包装】
复苏发货:A-427 Cells人肺癌细胞低代次保种|STR图谱T25培养瓶(一瓶)或冻存发货:1ml冻存管(两支)
在生命科学研究的微观世界里,细胞培养技术犹如搭建了一座精密运转的舞台,而细胞消化过程则是这台大戏中至关重要的场景转换环节。当科研人员需要为细胞进行传代培养、开展单细胞分离或执行精确计数时,胰蛋白酶便化身成为舞台幕后的魔法师,用其精妙的生物化学机制完成这场细胞集体的""温柔离散""。
细胞系在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液。细胞只要能从基质上脱离下来,即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右)是正常的,不要再去延长消化时间,等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞:润洗方法5min还不能消化,以结肠癌细胞为例,比如:HCT15、LS411和KM12细胞,胰酶消化,一般10 cm培养皿,一次加入300ul-500ul就足够了。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。
【物种来源】
A-427 Cells人肺癌细胞低代次保种|STR图谱来源于人源、鼠源等其它物种来源
【培养条件】
37°C、5%CO₂、饱和湿度环境,使用含10%-20%FBS的基础培养基。
【消化传代】
使用0.25%胰酶-EDTA溶液,37°C孵育1-2分钟,轻拍培养瓶促进细胞脱落。(悬浮细胞可省略这步操作)
【污染防控】
严格无菌操作,定期检测支原体污染,必要时使用双抗预防细菌污染。
【细胞状态】
传代和消化过程中,应密切关注细胞状态,避免过度消化或机械损伤导致细胞活性下降。
【污染检测】
支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。
【细胞接收流程】
收到细胞后,应首先观察细胞状态,然后进行75%酒精消毒处理。将细胞置于37℃培养箱中放置2-4小时以稳定A-427 Cells人肺癌细胞低代次保种|STR图谱状态。当细胞密度达到80%-90%时,即可进行首次传代培养。
【操作规范】
在细胞培养和处理过程中,需严格遵守无菌操作规范,以避免细胞污染和交叉污染。
【消化条件】
室温下用胰酶消化1-3分钟。
【生物安全等级】
1级。
【空泡现象】
在密集培养时,细胞中可见巨大的空泡,这是细胞的正常特性,无需担心。
【血清比例】
使用10%-20%的血清浓度有助于优化A-427 Cells人肺癌细胞低代次保种|STR图谱实验条件,提高实验的重复性和稳定性。这一浓度范围经过多年实验和实践的验证,被认为是较为适宜的选择。
细胞传代如同为生命搭建一座崭新的舞台,是细胞培养艺术中的关键一笔。这项精妙的操作犹如园丁移栽幼苗,将蓬勃生长的细胞从拥挤的旧培养瓶温柔地迁入宽敞的新居,让这些微小的生命之花得以继续绽放。在显微镜下,细胞们如同训练有素的舞者,遵循着精密的生命韵律,在新的培养环境中舒展身姿,延续着它们与生俱来的生命密码。这不仅是一次简单的空间转移,更是一场精心编排的生命接力,确保每一代细胞都能完美传承其独特的生物学禀赋。
直接倒掉上清液能够提高操作效率,节省时间。但这种方式存在一定风险,直接倾倒时较难控制力度和角度,如果操作不慎,容易使细胞沉淀随着上清液一起流出,导致细胞损失,而且可能会因液体快速流下冲击细胞沉淀造成细胞的物理性损伤。在实际的细胞传代操作中,应根据细胞的特性、实验的要求以及个人的操作熟练程度来选择合适的上清液处理方式。对于新手或者处理珍贵细胞系时,建议优先采用移液枪吸走的方式,以保障细胞的活性和传代的成功率。而在积累了丰富经验且对实验条件有充分把握的情况下,可以根据具体情况灵活运用直接倒掉上清液的方法,在保证实验质量的同时提高工作效率。
HuLEC-5a Cells;背景说明:肺微血管;内皮细胞;SV40转化;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:AG06814-M细胞、OCI-AML-5细胞、NBLAN5T细胞
Okayama University Medical School-23 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:OC-316细胞、H-2108细胞、ELD-1细胞
NCI-SNU-1040 Cells;背景说明:结肠癌;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:DHL-2细胞、NIE 115细胞、H-1417细胞
NCI-SNU-1040 Cells;背景说明:结肠癌;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:DHL-2细胞、NIE 115细胞、H-1417细胞
Madin-Darby Canine Kidney Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长 ;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:U-251细胞、CCC-HEL-1细胞、RERF-LC-MS细胞
GM20845 Cells(提供STR鉴定图谱)
HAP1 KDM4E (-) 4 Cells(提供STR鉴定图谱)
SKG3A Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:2x10^4 cells/ml;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:IOSE29细胞、B-3细胞、SW-48细胞
R.K.13 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:MDA-MB-134-VI细胞、Microbiological Associates-104细胞、OCI AML5细胞
HFL-1 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。;生长特性:贴壁生长;形态特性:成纤维细胞样;相关产品有:CCRF-SB细胞、RCC10RGB细胞、H196细胞
L-6 Cells;背景说明:该细胞是Yaffe在甲基胆蒽存在的情况下从大鼠大腿肌原代培养的最初两代细胞中分离得到的;在培养基中融合形成多核的肌管和横纹肌纤维,细胞融合的程度随着代数的增加而下降,因此细胞应低代次冷冻并周期性地重新克隆以选择融合能力强的细胞。鼠痘病毒阴性。该细胞应在达汇合状态前传代,以延缓细胞分化能力的丧失。;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:成肌细胞样;相关产品有:L02细胞、ATN-1细胞、HOS-143B细胞
Tu 177 Cells;背景说明:喉鳞癌;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:KP-4细胞、NCI-SNU-1细胞、H-82细胞
H2286 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:4传代;每周换液2次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:椭圆形;相关产品有:KU-812F细胞、MUVEC细胞、SuDHL 8细胞
MOPC Cells;背景说明:少突胶质前体 Cells;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:半贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:HS-294细胞、GM3570细胞、C57 Mouse Tumor 64细胞
HuH-1 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:NIH:OVCAR-8细胞、DHL10细胞、NCI-H2291细胞
HPS2485 Cells(提供STR鉴定图谱)
Jurkat HLA-A*01:01 Cells(提供STR鉴定图谱)
MDCK-II Rab7AB-KO Cells(提供STR鉴定图谱)
NEIi001-A Cells(提供STR鉴定图谱)
Pten-/- P1 Cells(提供STR鉴定图谱)
TRDSi002-A-1 Cells(提供STR鉴定图谱)
UKF-NB-2rTOPO10 Cells(提供STR鉴定图谱)
HEP G2ins/g Cells(提供STR鉴定图谱)
HEL-1 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:SCC 4细胞、Adeno-293细胞、H2052细胞
SCC154 Cells;背景说明:舌鳞癌;男性;HPV6转化;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Plaepi 34细胞、VM-CUB1细胞、BHT101细胞
U266S Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:3传代,2-3天传一代;生长特性:悬浮生长 ;形态特性:淋巴母细胞样;相关产品有:MC3T3-E1细胞、NCI-H2198细胞、SNU-449细胞
ASH3 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:University of Michigan-Renal Carcinoma-2细胞、MM1细胞、NCTC-929细胞
Hs.27 Cells;背景说明:包皮;成纤维细胞;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:H-526细胞、Hs 578Bst细胞、Nb 2细胞
Hs.27 Cells;背景说明:包皮;成纤维细胞;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:H-526细胞、Hs 578Bst细胞、Nb 2细胞
MDA-330 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:SPC-A-1细胞、H87细胞、10RGB细胞
H283 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:每周换液2-3次。;生长特性:悬浮细胞的多细胞聚集体,和一些贴壁 Cells;形态特性:上皮细胞;相关产品有:U266 Bl细胞、beta TC6细胞、Gerner 7666细胞
SUM-149 Cells;背景说明:乳腺癌;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:RAMOS2G64C10细胞、HMEC-1细胞、KYSE-150细胞
NG10815 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:P30-OHK细胞、B78细胞、IOSE-80细胞
Hs 737.T Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2—1:3传代;每周换液2-3次;生长特性:贴壁生长;形态特性:成纤维细胞;相关产品有:293 F细胞、BT细胞、Merwin Plasma Cell tumor-11细胞
Hs-27 Cells;背景说明:包皮;成纤维细胞;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:SKNBE2细胞、NTERA2-D1细胞、SNU5细胞
D407 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长 ;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:NIH:OVCAR-3细胞、IB-RS-2细胞、Panc5.04细胞
Huh7.5 Cells;背景说明:肝癌;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Hs819.T细胞、L-WRN细胞、Mono Mac6细胞
HT22 Cells小鼠海马神经元细胞|有STR图谱
HCMEC Cells人心脏微血管内皮细胞|有STR图谱
FRhK-4 Cells猴胚肾细胞|有STR图谱
OCM1A-RFP Cells人眼脉络黑色素瘤细胞|有STR图谱
Capan-2 Cells人胰腺癌细胞|有STR图谱
293GP Cells人胚肾细胞|有STR图谱
BHK Cells仓鼠肾成纤维细胞|有STR图谱
TCCSUP Cells人膀胱癌细胞|有STR图谱
IPEC-J2 Cells猪小肠上皮细胞|有STR图谱
NCI-H1975 Cells人肺腺癌细胞|有STR图谱
NTERA-2 Cells人恶性多发性畸胎瘤细胞|有STR图谱
HCC1187 Cells人乳腺癌细胞|有STR图谱
OCUT-2C Cells人甲状腺癌细胞|有STR图谱
MLO-Y4 Cells小鼠骨样细胞|有STR图谱
NCI-H1568 Cells人非小细胞肺癌细胞|有STR图谱
HT-29 Cells人结肠癌细胞|有STR图谱
SK-OV-3 Cells人卵巢腺癌细胞|有STR图谱
IHH-4 Cells人甲状腺乳头状癌细胞|有STR图谱
Namalwa Cells人Burkitt's淋巴瘤细胞|有STR图谱
AN3-CA Cells人子宫内膜腺癌细胞|有STR图谱
Colo-16 Cells人皮肤鳞状细胞癌细胞|有STR图谱
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Jurkat,CloneE6-1-LUC Cells人急性T淋巴细胞白血病细胞|有STR图谱
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