"DMS 114 Cells人肺癌细胞低代次保种|STR图谱
【培养观察】
定期观察DMS 114 Cells人肺癌细胞低代次保种|STR图谱生长状态，注意培养基的pH值变化和细胞密度，及时换液和传代。
【细胞复苏】
复苏细胞时，应快速将冻存管从液氮中取出并置于37℃水浴中解冻，然后转移到含新鲜培养基的无菌管中并吹打混匀。整个复苏过程应尽可能在5-10分钟内完成，以确保细胞的高存活率。
【细胞传代】
传代时，应使用适量的胰蛋白酶溶液进行消化，并在显微镜下观察细胞消化情况。消化下来的细胞容易成团，需要吹打吹散。传代后，应确保细胞均匀分布在培养瓶或培养皿中。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。一般使用冻存液进行冻存，并置于液氮中储存。
【DMS 114 Cells人肺癌细胞低代次保种|STR图谱英文别名】
DMS-114; DMS114; Darmouth Medical School 114
传代细胞培养是细胞生物学研究中的基础技术，其成功与否直接影响实验结果的可靠性。在操作过程中，细胞的消化时间和浓度控制尤为关键。消化时间过短会导致细胞难以从培养瓶壁脱落，影响后续传代效率；而消化时间过长则可能造成细胞膜损伤甚至死亡。研究表明，细胞的最佳消化时间通常控制在1-3分钟，具体需根据细胞状态和培养条件进行调整。消化浓度方面，当使用较高浓度（0.25%胰酶-EDTA）时，消化时间应缩短至1-2分钟；若使用较低浓度（0.05%），则需延长至3-5分钟。建议在显微镜下密切观察细胞形态变化，当细胞间隙增大、边缘回缩时立即终止消化。
细胞代谢随温度降低而逐渐减慢。当温度降至冰点以下时，细胞内的游离水会形成冰晶，导致细胞膜和细胞器结构的机械损伤，最终引发细胞死亡。然而，通过添加冷冻保护剂（如二甲亚砜或甘油），可以显著提高细胞在深低温环境下的存活率。这些保护剂能够降低冰晶的形成概率，并减少低温对细胞结构的破坏。
【背景信息】
DMS 114 Cells人肺癌细胞低代次保种|STR图谱详见相关文献介绍
【传代比例】
1:2-1:4(DMS 114 Cells人肺癌细胞低代次保种|STR图谱首次传代建议1:2)
【来源说明】
DMS 114 Cells人肺癌细胞低代次保种|STR图谱主要来源ATCC、ECACC、DSMZ、RCB等细胞库
【生长特性】
DMS 114 Cells人肺癌细胞低代次保种|STR图谱贴壁生长
【形态特性】
DMS 114 Cells人肺癌细胞低代次保种|STR图谱上皮细胞样
【换液周期】
DMS 114 Cells人肺癌细胞低代次保种|STR图谱每周2-3次
【产品包装】
复苏发货：DMS 114 Cells人肺癌细胞低代次保种|STR图谱T25培养瓶(一瓶)或冻存发货：1ml冻存管(两支)
消化完成后，需对细胞进行吹打分散，以确保细胞单层均匀分布。具体步骤如下：用吸管或细胞吹打管反复吹打细胞悬液，使细胞团块分散成单个细胞。吹打时动作要轻柔，避免产生过多气泡或机械损伤细胞。根据传代比例将细胞悬液分装至新的小方瓶中。通常传代比例为1:2至1:4，具体比例需根据细胞生长速度和实验需求调整。分装后补加适量培养液至所需体积（通常为10ml/瓶），然后加塞，置于37±1℃、5% CO₂孵箱中培养。
细胞系在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，你可以尝试，准备100%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液。细胞只要能从基质上脱离下来，即使是成片的(比如Calu-3细胞)，吹打不超过20次(一般10次即可)，成小规模聚集(10个细胞左右)是正常的，不要再去延长消化时间，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞：润洗方法5min还不能消化，以结肠癌细胞为例，比如：HCT15、LS411和KM12细胞，胰酶消化，一般10 cm培养皿，一次加入300ul-500ul就足够了。即使这样难消化的细胞，一般不超过5min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。
【物种来源】
DMS 114 Cells人肺癌细胞低代次保种|STR图谱来源于人源、鼠源等其它物种来源
【培养条件】
37°C、5%CO₂、饱和湿度环境，使用含10%-20%FBS的基础培养基。
【消化传代】
使用0.25%胰酶-EDTA溶液，37°C孵育1-2分钟，轻拍培养瓶促进细胞脱落。（悬浮细胞可省略这步操作）
【污染防控】
严格无菌操作，定期检测支原体污染，必要时使用双抗预防细菌污染。
【细胞状态】
传代和消化过程中，应密切关注细胞状态，避免过度消化或机械损伤导致细胞活性下降。
【污染检测】
支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。
【细胞接收流程】
收到细胞后，应首先观察细胞状态，然后进行75%酒精消毒处理。将细胞置于37℃培养箱中放置2-4小时以稳定DMS 114 Cells人肺癌细胞低代次保种|STR图谱状态。当细胞密度达到80%-90%时，即可进行首次传代培养。
【操作规范】
在细胞培养和处理过程中，需严格遵守无菌操作规范，以避免细胞污染和交叉污染。
【消化条件】
室温下用胰酶消化1-3分钟。
【生物安全等级】
1级。
【空泡现象】
在密集培养时，细胞中可见巨大的空泡，这是细胞的正常特性，无需担心。
【血清比例】
使用10%-20%的血清浓度有助于优化DMS 114 Cells人肺癌细胞低代次保种|STR图谱实验条件，提高实验的重复性和稳定性。这一浓度范围经过多年实验和实践的验证，被认为是较为适宜的选择。
传代消化是细胞培养的关键步骤，但许多新手因担心胰酶损伤细胞而过早终止消化。实际上，适度延长消化时间（如等待细胞完全变圆）反而能减少机械吹打对细胞的伤害。过早终止消化会导致细胞未完全脱离，用力吹打产生的气泡和剪切力对细胞的损伤远大于胰酶本身。常规操作中，建议在显微镜下监控消化过程，待80%-90%细胞变圆后轻柔晃动培养瓶，使细胞自然脱落。此外，吹打时应避免产生气泡，因为气泡破裂时的机械应力会直接损伤细胞膜。
瓶装500ml血清的解冻需要采用逐步升温的""阶梯式解冻法""，这是保证血清质量的关键步骤。具体操作流程如下：首先将血清从–20℃或–70℃转移至4℃冰箱，缓慢溶解24小时。这一低温过渡阶段可以让血清中的各种成分逐渐适应温度变化，避免突然的温度波动导致蛋白质变性。待血清完全溶解后，再将其移至室温环境使其完全解冻。在解冻过程中，需要每隔2-3小时轻轻摇晃瓶身，使血清各部分的温度和成分均匀分布，这一操作能显著减少沉淀物的形成。但需特别注意摇晃力度，避免产生气泡，因为气泡可能导致血清中的蛋白质变性。
NCI-H2009 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：每周换液２-３次。;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮细胞;相关产品有：CHP 212细胞、LS 174T细胞、WEHI3细胞
FLC7 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：GM00346B细胞、OVCAR8细胞、Nb2细胞
NCI-322 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：H-2171细胞、H226细胞、NCI-H460细胞
TE-6 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：消化３-５分钟。１：２。３天内可长满。;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：SK MEL 28细胞、MFC细胞、REC-1细胞
NCIH1963 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：每周换液２次。;生长特性：悬浮生长;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：C1498细胞、NR-8383细胞、ES2细胞
GUCASe002-A Cells(提供STR鉴定图谱)
HAP1 PRKCQ (-) Cells(提供STR鉴定图谱)
Granta-519 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：RMS13细胞、RPMI 8226/S细胞、SUM 102PT细胞
PLA801-95C Cells;背景说明：肺巨细胞癌;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：NCI-HUT-292细胞、SK Mel 1细胞、H841细胞
OVCAR-8/ADR Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：Psi2 DAP细胞、MDAMB134VI细胞、X63-Ag8-653细胞
LTEP-s Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：IEC6细胞、CCRF-CEM/S细胞、TR 146细胞
Roswell Park Memorial Institute 2650 Cells;背景说明：头颈鳞癌；胸腔积液转移；男性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：LPC-H12细胞、NCI-H1417细胞、Duke University 145细胞
IEC-6 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮细胞样;相关产品有：AdHek细胞、OCI-LY-7细胞、Hs 839.T细胞
Panc813 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：Vero-E6细胞、HPB-ALL细胞、SuDHL 2细胞
3T3 L1 Cells;背景说明：３T３-L１是从３T３细胞（Swissalbino）中经克隆分离得到的连续传代的亚系。该细胞从快速分裂到汇合和接触性抑制状态经历了前脂肪细胞到脂肪样细胞的转变。该细胞鼠痘病毒阴性；可产生甘油三酯，高浓度血清可增强细胞内脂肪堆积。;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：成纤维细胞样;相关产品有：NL20SV细胞、IEC6细胞、NALM 6细胞
HUES 53 Cells(提供STR鉴定图谱)
L-1 [Human ovarian carcinoma] Cells(提供STR鉴定图谱)
Ms709 Cells(提供STR鉴定图谱)
OCUT-1F Cells(提供STR鉴定图谱)
RN33B.LV-AA2 Cells(提供STR鉴定图谱)
Ubigene HEK293 CACNA1C KO Cells(提供STR鉴定图谱)
WDC-1 Cells(提供STR鉴定图谱)
HG02976 Cells(提供STR鉴定图谱)
NPC-TW01 Cells;背景说明：鼻咽癌;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：Pfeiffer细胞、H1770细胞、C57/B6-L细胞
SK-MEL28 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：３-１：８传代，２-３天换液１次。;生长特性：贴壁生长;形态特性：星形的;相关产品有：Hs 606.T细胞、Hs863T细胞、FRTL-5 Cl 2细胞
H820 Cells;背景说明：乳头状肺腺癌；淋巴结转移；男性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：CHP-100细胞、PC 61细胞、IAR-20细胞
32D clone3 Cells;背景说明：骨髓淋巴瘤；C３H/HeJ;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：悬浮;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：A9细胞、4T1-A细胞、PANC-02-03细胞
Panc02.03 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：H2198细胞、U118MG细胞、UWB1-289细胞
Panc02.03 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：H2198细胞、U118MG细胞、UWB1-289细胞
BCAP37 Cells;背景说明：源自一位４８岁女性乳癌患者。;传代方法：消化３-５分钟，１：２,３天内可长满;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：HSCT6细胞、HSC-3细胞、GM00637细胞
NRK49F Cells;背景说明：肾；成纤维细胞；自发永生;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：SN4741细胞、GM04678细胞、3T3-L1 ad细胞
SK-N-BE(2C) Cells;背景说明：神经母细胞瘤；骨髓转移；男性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：MOLP8细胞、INS1E细胞、LM2-4175细胞
Onda 11 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：SK-N-BE(2)C细胞、GM02219D细胞、COLO206细胞
Panc02-H0 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长 ;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：PANC-08-13细胞、Y-1细胞、VA-ES-BJ细胞
PANC0403 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：L-540细胞、RGE细胞、A704细胞
IHH4 Cells;背景说明：甲状腺乳头状癌；男性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：NCTC929细胞、NCI-H1836细胞、VP267细胞
H-1770 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：随细胞的生长而换液;生长特性：悬浮生长;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：RSC 96细胞、Fetal Human Lens-124细胞、PLC/PRF/5细胞
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