"NCI-H526 Cells人小细胞肺癌细胞低代次保种|STR图谱
【培养观察】
定期观察NCI-H526 Cells人小细胞肺癌细胞低代次保种|STR图谱生长状态,注意培养基的pH值变化和细胞密度,及时换液和传代。
【细胞复苏】
复苏细胞时,应快速将冻存管从液氮中取出并置于37℃水浴中解冻,然后转移到含新鲜培养基的无菌管中并吹打混匀。整个复苏过程应尽可能在5-10分钟内完成,以确保细胞的高存活率。
【细胞传代】
传代时,应使用适量的胰蛋白酶溶液进行消化,并在显微镜下观察细胞消化情况。消化下来的细胞容易成团,需要吹打吹散。传代后,应确保细胞均匀分布在培养瓶或培养皿中。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。一般使用冻存液进行冻存,并置于液氮中储存。
【NCI-H526 Cells人小细胞肺癌细胞低代次保种|STR图谱英文别名】
H526; H-526; NCIH526
【细胞培养经验分享】启蒙老师的重要性:一般进实验室都有师兄师姐带着做,他们就是你做细胞的启蒙老师。他们的操作手法、细节、理论讲解就成了你操作的准则,如营养液、细胞瓶的摆放位置、灭菌处理程序、开盖手法、细胞吹打手法等等。要学会他们的正确操作,在第一次的时候就要重视。像养孩子一样养细胞,细胞有时真的很脆弱,最好每天都去看看它,以防止出现培养箱缺水、缺二氧化碳、停电、温度不够等异常现象,也好及时解决这些意外,避免重复实验带来的更大痛苦。好细胞要及时保种:细胞要分批传代,这样即使有一批出了问题,还有一批备用的。像后者一般人可能不容易做到。
公司细胞系主要引进ATCC、DSMZ、JCRB、KCLB、RIKEN、ECACC等细胞库,细胞系体外培养,它们会成长为单层细胞,附着或紧贴在培养瓶上,或悬浮在体外的溶液中,细胞系复苏周期短,公司细胞系状态良好,饱满,有光泽等优点。EDTA的作用:许多人不用胰酶,只用EDTA,或者用胰酶/EDTA联合作用。这里要明白,胰酶切割细胞外基质的一些负责粘连和附着的蛋白,而EDTA通过螯合Ca离子,作用于整联蛋白的活性,所以EDTA的作用更加温和。有的人在胰酶里添加一些EDTA,或者对付特别难消化的细胞,添加多一些EDTA,就是这个道理。一般不要试图延长消化时间(如果5min还消化不下来的话),而应该想其它办法。
【背景信息】
NCI-H526 Cells人小细胞肺癌细胞低代次保种|STR图谱详见相关文献介绍
【传代比例】
1:2-1:4(NCI-H526 Cells人小细胞肺癌细胞低代次保种|STR图谱首次传代建议1:2)
【来源说明】
NCI-H526 Cells人小细胞肺癌细胞低代次保种|STR图谱主要来源ATCC、ECACC、DSMZ、RCB等细胞库
【生长特性】
NCI-H526 Cells人小细胞肺癌细胞低代次保种|STR图谱贴壁生长
【形态特性】
NCI-H526 Cells人小细胞肺癌细胞低代次保种|STR图谱上皮细胞样
【换液周期】
NCI-H526 Cells人小细胞肺癌细胞低代次保种|STR图谱每周2-3次
【产品包装】
复苏发货:NCI-H526 Cells人小细胞肺癌细胞低代次保种|STR图谱T25培养瓶(一瓶)或冻存发货:1ml冻存管(两支)
细胞消化注意事项(二):细胞状态:在消化前,应确保细胞处于适宜的状态,如生长密度、形态和活力等。后续操作:消化后的细胞应立即进行后续操作,如传代、分离或计数等,以避免细胞在体外过长时间暴露而导致损伤或死亡。细胞消化是细胞培养中的一个关键步骤,需要严格遵循操作规程和注意事项,以确保细胞的良好分离和后续实验的顺利进行。
绝大部分细胞消化只要用胰酶润洗一遍即可:吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37℃消化。什么算是消化好了呢?不需要把细胞全部消化成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙状移动,其实已经是可以了。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。
【物种来源】
NCI-H526 Cells人小细胞肺癌细胞低代次保种|STR图谱来源于人源、鼠源等其它物种来源
【培养条件】
37°C、5%CO₂、饱和湿度环境,使用含10%-20%FBS的基础培养基。
【消化传代】
使用0.25%胰酶-EDTA溶液,37°C孵育1-2分钟,轻拍培养瓶促进细胞脱落。(悬浮细胞可省略这步操作)
【污染防控】
严格无菌操作,定期检测支原体污染,必要时使用双抗预防细菌污染。
【细胞状态】
传代和消化过程中,应密切关注细胞状态,避免过度消化或机械损伤导致细胞活性下降。
【污染检测】
支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。
【细胞接收流程】
收到细胞后,应首先观察细胞状态,然后进行75%酒精消毒处理。将细胞置于37℃培养箱中放置2-4小时以稳定NCI-H526 Cells人小细胞肺癌细胞低代次保种|STR图谱状态。当细胞密度达到80%-90%时,即可进行首次传代培养。
【操作规范】
在细胞培养和处理过程中,需严格遵守无菌操作规范,以避免细胞污染和交叉污染。
【消化条件】
室温下用胰酶消化1-3分钟。
【生物安全等级】
1级。
【空泡现象】
在密集培养时,细胞中可见巨大的空泡,这是细胞的正常特性,无需担心。
【血清比例】
使用10%-20%的血清浓度有助于优化NCI-H526 Cells人小细胞肺癌细胞低代次保种|STR图谱实验条件,提高实验的重复性和稳定性。这一浓度范围经过多年实验和实践的验证,被认为是较为适宜的选择。
细胞消化准备工作:预热试剂:在开始细胞消化之前,确保胰蛋白酶溶液和完全培养基已经预热至37℃,以减少对细胞的温度冲击。准备无菌器材:包括无菌吸管、移液枪、离心管、培养皿、胰蛋白酶溶液、PBS(磷酸盐缓冲液)和完全培养基等。检查细胞状态:在显微镜下观察细胞的生长密度和形态,确保细胞处于适宜消化的状态,通常是在细胞达到约80%-90%的融合度时。
虽然1×10^6 cells/mL是通用推荐值,但特定细胞可能需要调整:原代细胞:如肝细胞或神经元,通常需要更高密度(2-5×10^6 cells/mL)以维持功能完整性;悬浮细胞:如淋巴细胞,对密度耐受性较强,但低于5×10^5 cells/mL仍会导致活性显著降低;干细胞:间充质干细胞(MSCs)在1.5×10^6 cells/mL时表现出最佳分化潜能保留。值得注意的是,密度过高(如>5×10^6 cells/mL)可能引起冻存液渗透压失衡,反而降低复苏效率。因此,优化需结合具体细胞特性。
PK15 Cells;背景说明:PK-15细胞建系于1955(Stice,E)。是PK-1a细胞的克隆系。该细胞系可用于多种病毒的增值及特性研究。另外,电镜观察发现,PK-15细胞内有C-型病毒颗粒存在,是研究C-型病毒的材料。;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:WM 2664细胞、HEC151细胞、Mel RM细胞
NIH 3T3 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:AR42J细胞、KYSE-150细胞、RPMI-2650细胞
H-711 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:GM03570细胞、SNK1细胞、NIT-1细胞
N-87 Cells;背景说明:NCI-N87细胞表达表面糖蛋白癌胚抗原(CEA)和TAG72,并且没有左旋多巴胺脱羧酶(DDC)活性。它们的血管活性的肠肽(VIP)受体活性极低并缺乏胃泌激素受体。它们表达蕈毒碱胆碱受体。没有证据表明存在N-myc,L-myc,myb和EGF受体基因的重组。这个细胞株表达的c-myc和c-erb-B2RNA水平与其它细胞株相当。以下基因不表达:N-myc,L-myc,c-cis,IGF-2,或胃泌激素释放肽。报道NCI-N87细胞的植板率为4.3%。;传代方法:消化15-20分钟。1:2。4-5天长满。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:108CC15细胞、Hs 895 T细胞、KYSE 520细胞
Ramos 2G6.4C10 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法: 维持细胞浓度在2×105/ml-1×106/ml;根据细胞浓度每2-3天补液1次。;生长特性:悬浮生长 ;形态特性:淋巴母细胞样;相关产品有:NSI/1-Ag4-1细胞、Hx147细胞、no.11细胞
GM13671 Cells(提供STR鉴定图谱)
HAP1 FURIN (-) 1 Cells(提供STR鉴定图谱)
H2405 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:5-1:8传代;生长特性:混合生长;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:BALL-1细胞、C3H/10T1/2 CL8细胞、P3 NS1 Ag4细胞
JB6Cl30 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:MLO-Y4细胞、H661细胞、DHL4细胞
CII Cells;背景说明:慢性淋巴细胞白血病;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:MLFC细胞、bEnd3细胞、HEL92.1.7细胞
SKO-007 Cells;背景说明:骨髓瘤;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:HCC1833细胞、NBL-5细胞、HKBML细胞
OVCAR-3 Cells;背景说明:该细胞1982年由T.C. Hamilton等建系,源自一位60卵巢腺癌的腹水,是卵巢癌抗药性研究的模型。;传代方法:1:2—1:4传代,每周换液2—3次;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:TE10细胞、SW1417细胞、LN-382细胞
LNCaP subline C4-2 Cells;背景说明:前列腺癌;左锁骨上淋巴结转移;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Swiss3T3细胞、SK_HEP1细胞、CHO/dhFr-细胞
DI TNC1 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:成纤维母细胞样;相关产品有:H-2172细胞、HREC细胞、ATDC5细胞
H1522 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Swiss 3T3细胞、AML193细胞、CTLA4Ig-24细胞
HmLu-1 Cells(提供STR鉴定图谱)
ISMMSi052-A Cells(提供STR鉴定图谱)
MCF-7aro Cells(提供STR鉴定图谱)
ND13654 Cells(提供STR鉴定图谱)
PPMI.I.1052.1 Cells(提供STR鉴定图谱)
TOMA 70 Cells(提供STR鉴定图谱)
UHOMi008-A Cells(提供STR鉴定图谱)
HepG2/CD81++ Cells(提供STR鉴定图谱)
Cates-1B Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:BHK 21细胞、AAV-293细胞、DC 2.4细胞
AA-Mel Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:3-1:6传代,2-3天换液1次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:星形的;相关产品有:SW1463细胞、L 929细胞、HT-1080细胞
MS751 Cells;背景说明:这株细胞是J. Sykes于1974年建立的(参考ATCC HTB-33)。有报告称MS751细胞含有人乳头状瘤病毒18 (HPV-18)序列。[22995] [23180]后来发现MS751细胞包含HPV-45基因组的一部分,而其中E6/E7区域表达呈poly(A)+RNA的形式。[49721];传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:INS1细胞、EJ 138细胞、HEK-293 c18细胞
Hs840T Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:4—1:8传代,每周换液2—3次;生长特性:贴壁生长;形态特性:成纤维细胞;相关产品有:BTI-Tn5B14细胞、NCI H548细胞、HT-55细胞
SUIT 2 Cells;背景说明:胰腺管癌;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:K562/ADR细胞、P-3J细胞、SUDHL5细胞
SUIT 2 Cells;背景说明:胰腺管癌;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:K562/ADR细胞、P-3J细胞、SUDHL5细胞
NCIH64 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Colo-201细胞、HL-1细胞、HOP62细胞
SJRH-30 Cells;背景说明:肺泡横纹肌肉瘤;骨髓转移;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:MC3T3-E1 Subclone 14细胞、746T细胞、SuDHL 4细胞
D-324MED Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:4-1:6传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:多边形;相关产品有:SF 539细胞、A-875细胞、OE-33细胞
XWLC-05 Cells;背景说明:肺癌;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:H1770细胞、V79-1细胞、Hela-mock细胞
SUIT 2 Cells;背景说明:胰腺管癌;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:K562/ADR细胞、P-3J细胞、SUDHL5细胞
SU-DHL2 Cells;背景说明:弥漫性大细胞淋巴瘤;胸腔积液转移;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:HCoEpiC细胞、Oka-C1细胞、TMD8细胞
NPA'87 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Lewis-Lung细胞、HBZY1细胞、87 MG细胞
NCI-H1373 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:3-1:4传代;2-3天换液1次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:HLMVEC细胞、Colon 38细胞、RIN Cl-5F细胞
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