"MeWo Cells人恶性黑色素瘤细胞低代次保种|STR图谱
【培养观察】
定期观察MeWo Cells人恶性黑色素瘤细胞低代次保种|STR图谱生长状态,注意培养基的pH值变化和细胞密度,及时换液和传代。
【细胞复苏】
复苏细胞时,应快速将冻存管从液氮中取出并置于37℃水浴中解冻,然后转移到含新鲜培养基的无菌管中并吹打混匀。整个复苏过程应尽可能在5-10分钟内完成,以确保细胞的高存活率。
【细胞传代】
传代时,应使用适量的胰蛋白酶溶液进行消化,并在显微镜下观察细胞消化情况。消化下来的细胞容易成团,需要吹打吹散。传代后,应确保细胞均匀分布在培养瓶或培养皿中。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。一般使用冻存液进行冻存,并置于液氮中储存。
【MeWo Cells人恶性黑色素瘤细胞低代次保种|STR图谱英文别名】
MEWO; Mewo; Me Wo; Me-Wo; Mevo; SK-MEL-MeWo; Mel-MeWo; BI-Mel; EST50
传代细胞培养是细胞生物学研究中的基础技术,其成功与否直接影响实验结果的可靠性。在操作过程中,细胞的消化时间和浓度控制尤为关键。消化时间过短会导致细胞难以从培养瓶壁脱落,影响后续传代效率;而消化时间过长则可能造成细胞膜损伤甚至死亡。研究表明,细胞的最佳消化时间通常控制在1-3分钟,具体需根据细胞状态和培养条件进行调整。消化浓度方面,当使用较高浓度(0.25%胰酶-EDTA)时,消化时间应缩短至1-2分钟;若使用较低浓度(0.05%),则需延长至3-5分钟。建议在显微镜下密切观察细胞形态变化,当细胞间隙增大、边缘回缩时立即终止消化。
在-80℃或-196℃(液氮温度)的条件下,细胞的代谢活动几乎完全停滞,进入“休眠”状态。这种超低温保存技术使得细胞能够长期存储,并在需要时通过复苏恢复活性。例如,在生物医学研究中,许多实验室会利用液氮罐保存珍贵的细胞系,以便后续实验使用。
【背景信息】
MeWo Cells人恶性黑色素瘤细胞低代次保种|STR图谱详见相关文献介绍
【传代比例】
1:2-1:4(MeWo Cells人恶性黑色素瘤细胞低代次保种|STR图谱首次传代建议1:2)
【来源说明】
MeWo Cells人恶性黑色素瘤细胞低代次保种|STR图谱主要来源ATCC、ECACC、DSMZ、RCB等细胞库
【生长特性】
MeWo Cells人恶性黑色素瘤细胞低代次保种|STR图谱贴壁生长
【形态特性】
MeWo Cells人恶性黑色素瘤细胞低代次保种|STR图谱上皮细胞样
【换液周期】
MeWo Cells人恶性黑色素瘤细胞低代次保种|STR图谱每周2-3次
【产品包装】
复苏发货:MeWo Cells人恶性黑色素瘤细胞低代次保种|STR图谱T25培养瓶(一瓶)或冻存发货:1ml冻存管(两支)
在生命科学研究的微观世界里,细胞培养技术犹如搭建了一座精密运转的舞台,而细胞消化过程则是这台大戏中至关重要的场景转换环节。当科研人员需要为细胞进行传代培养、开展单细胞分离或执行精确计数时,胰蛋白酶便化身成为舞台幕后的魔法师,用其精妙的生物化学机制完成这场细胞集体的""温柔离散""。
细胞系在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液。细胞只要能从基质上脱离下来,即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右)是正常的,不要再去延长消化时间,等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞:润洗方法5min还不能消化,以结肠癌细胞为例,比如:HCT15、LS411和KM12细胞,胰酶消化,一般10 cm培养皿,一次加入300ul-500ul就足够了。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。
【物种来源】
MeWo Cells人恶性黑色素瘤细胞低代次保种|STR图谱来源于人源、鼠源等其它物种来源
【培养条件】
37°C、5%CO₂、饱和湿度环境,使用含10%-20%FBS的基础培养基。
【消化传代】
使用0.25%胰酶-EDTA溶液,37°C孵育1-2分钟,轻拍培养瓶促进细胞脱落。(悬浮细胞可省略这步操作)
【污染防控】
严格无菌操作,定期检测支原体污染,必要时使用双抗预防细菌污染。
【细胞状态】
传代和消化过程中,应密切关注细胞状态,避免过度消化或机械损伤导致细胞活性下降。
【污染检测】
支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。
【细胞接收流程】
收到细胞后,应首先观察细胞状态,然后进行75%酒精消毒处理。将细胞置于37℃培养箱中放置2-4小时以稳定MeWo Cells人恶性黑色素瘤细胞低代次保种|STR图谱状态。当细胞密度达到80%-90%时,即可进行首次传代培养。
【操作规范】
在细胞培养和处理过程中,需严格遵守无菌操作规范,以避免细胞污染和交叉污染。
【消化条件】
室温下用胰酶消化1-3分钟。
【生物安全等级】
1级。
【空泡现象】
在密集培养时,细胞中可见巨大的空泡,这是细胞的正常特性,无需担心。
【血清比例】
使用10%-20%的血清浓度有助于优化MeWo Cells人恶性黑色素瘤细胞低代次保种|STR图谱实验条件,提高实验的重复性和稳定性。这一浓度范围经过多年实验和实践的验证,被认为是较为适宜的选择。
细胞传代如同为生命搭建一座崭新的舞台,是细胞培养艺术中的关键一笔。这项精妙的操作犹如园丁移栽幼苗,将蓬勃生长的细胞从拥挤的旧培养瓶温柔地迁入宽敞的新居,让这些微小的生命之花得以继续绽放。在显微镜下,细胞们如同训练有素的舞者,遵循着精密的生命韵律,在新的培养环境中舒展身姿,延续着它们与生俱来的生命密码。这不仅是一次简单的空间转移,更是一场精心编排的生命接力,确保每一代细胞都能完美传承其独特的生物学禀赋。
细胞冻存过程中,密度过低会导致细胞在复苏时因缺乏足够的细胞间接触和旁分泌信号而存活率下降。当冻存密度低于1×10^6 cells/mL时,细胞在解冻后可能面临以下问题:营养竞争不足:低密度下细胞分泌的促存活因子(如生长因子)浓度不足,无法有效支持细胞贴壁和增殖;物理损伤加剧:冻存时形成的冰晶会破坏细胞膜结构,而高密度细胞群可通过相互缓冲减轻机械损伤;氧化应激增加:单个细胞暴露在冻存液中的表面积更大,更容易受到自由基攻击。
WEHI-3 Cells;背景说明:白血病;BALB/c;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:BERH-2细胞、PC-12细胞、SKGT4细胞
KLN 205 Cells;背景说明:肺;鳞癌细胞;DBA;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:MDA-MB-175细胞、COLO357细胞、Hep3B细胞
HEC1B Cells;背景说明:该细胞是H.Kuramoto1968年分离的HEC-1-A细胞亚株。不同於HEC-A-1的是:该亚株在培养第135天到190天之间表现出稳定的生长周期,且重现扁平,与亲本细胞系相比更具铺路石式样。此外主要染色体组是亲本细胞的两倍。;传代方法:1:3传代,2-3天换液一次;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:PTK 2细胞、MIMVEC细胞、OE-21细胞
HEC1B Cells;背景说明:该细胞是H.Kuramoto1968年分离的HEC-1-A细胞亚株。不同於HEC-A-1的是:该亚株在培养第135天到190天之间表现出稳定的生长周期,且重现扁平,与亲本细胞系相比更具铺路石式样。此外主要染色体组是亲本细胞的两倍。;传代方法:1:3传代,2-3天换液一次;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:PTK 2细胞、MIMVEC细胞、OE-21细胞
SK-RC-20 Cells;背景说明:肾癌;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:CT 26细胞、L 1210细胞、TE 32.T细胞
GM13115 Cells(提供STR鉴定图谱)
HAP1 FBXL14 (-) 1 Cells(提供STR鉴定图谱)
NCIN87 Cells;背景说明:NCI-N87细胞表达表面糖蛋白癌胚抗原(CEA)和TAG72,并且没有左旋多巴胺脱羧酶(DDC)活性。它们的血管活性的肠肽(VIP)受体活性极低并缺乏胃泌激素受体。它们表达蕈毒碱胆碱受体。没有证据表明存在N-myc,L-myc,myb和EGF受体基因的重组。这个细胞株表达的c-myc和c-erb-B2RNA水平与其它细胞株相当。以下基因不表达:N-myc,L-myc,c-cis,IGF-2,或胃泌激素释放肽。报道NCI-N87细胞的植板率为4.3%。;传代方法:消化15-20分钟。1:2。4-5天长满。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:H1876细胞、NCIH841细胞、NCI-H2405细胞
RPMI no 8226 Cells;背景说明:来源于一位61岁的男性浆细胞瘤患者;可产生免疫球蛋白轻链,未检测到重链。;传代方法:按1:2传代,5-6小时可以看到细胞分裂;生长特性:悬浮生长;形态特性:淋巴母细胞样;相关产品有:NCIH82细胞、KYSE-450细胞、ARH77细胞
SJRH30 Cells;背景说明:肺泡横纹肌肉瘤;骨髓转移;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:HMEL细胞、SKOV3细胞、WEHI 164 TC细胞
Panc 04.03 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:Mono-Mac-1细胞、T2(174 x CEM.T2)细胞、L428细胞
NCI-H2171 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:3-4天换液1次。;生长特性:悬浮生长;形态特性:聚团悬浮;相关产品有:AN3细胞、Walker/LLC-WRC 256细胞、RCK8细胞
Hs-695-T Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:4传代,2-3天换液1次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞;相关产品有:H226细胞、JB6 Cl 30细胞、OVCA-420细胞
BT483 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代,2—3天换液一次;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:SN-12C细胞、RPMI8226/S细胞、NCI-H1648细胞
NK-92 Cells;背景说明:NK细胞;淋巴瘤;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:WPMY1细胞、CAL-62细胞、MDA-MB-361细胞
HL-60/ADR Cells(提供STR鉴定图谱)
iPSC(OCT4) 1 Cells(提供STR鉴定图谱)
MCCL-4 Cells(提供STR鉴定图谱)
ND12056 Cells(提供STR鉴定图谱)
PNUSCRi002-A Cells(提供STR鉴定图谱)
Ubigene U-87 MG NFKB1 KO Cells(提供STR鉴定图谱)
ZEC-134 Cells(提供STR鉴定图谱)
HCT116-Artemis(+/-) Cells(提供STR鉴定图谱)
MDA-MB-134-VI Cells;背景说明:该细胞1973年由R. Cailleau建系,源自74岁乳腺导管癌女性患者的胸腔积液,细胞生长缓慢,松散贴壁,生长过程中会脱落到培养基,不会汇合,过表达FGF受体;传代方法:1:2—1:4传代,每周换液2—3次;生长特性:松散贴壁生长;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:MDA-MB436细胞、TGW-nu细胞、RAOEC细胞
OCI-LY-3 Cells;背景说明:弥漫大B淋巴瘤;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:MEC-1细胞、SKml2细胞、HIT细胞
QBC(939) Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长 ;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:HSC(Human Schwann)细胞、ARPE-19细胞、MuM-2C细胞
MDA-kb2 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:COLO-699细胞、ketr 3细胞、P3/NS1/1-Ag4-1细胞
SW756 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:UCLA-SO-M14细胞、7860细胞、CAL120细胞
SW756 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:UCLA-SO-M14细胞、7860细胞、CAL120细胞
ABC-1 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:每周换液2次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:NCIH1869细胞、L 363细胞、NCIH1930细胞
639-V Cells;背景说明:膀胱癌;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:PA-TU-8988S细胞、CAL27细胞、NCI-H1435细胞
SK-N-BE2C Cells;背景说明:神经母细胞瘤;骨髓转移;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:MDA-MB468细胞、TE 32.T细胞、OVCAR-432细胞
SK-HEP-1 Cells;背景说明:SK-HEP-1细胞系已被鉴定为内皮来源。该细胞系为异倍体女性人(XX),染色体在亚三倍体范围内。在裸鼠中,它能形成与肝癌相一致的大细胞癌;传代方法:1:3传代,2-3天换液一次;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:SKM-1细胞、MC3T3-E1细胞、rRMECs细胞
SW-527 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:293E细胞、Capan-1细胞、PASMCS细胞
SW-480 Cells;背景说明:SW480源自一位51岁白人男性患者的原位直肠腺癌,而SW620源自同一病人一年后的淋巴结转移灶。该细胞CSAp和直肠抗原3阴性;角蛋白阳性;p53基因第273位密码子的G→A突变引起Arg→His替代,309位密码子的C→T突变导致Pro→Ser替代;细胞p53蛋白表达水平升高;癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos的表达呈阳性;未检测到癌基因N-myc的表达;不表达Matrilysin(一种与肿瘤侵袭相关的金属蛋白酶)。;传代方法:1:2传代,1-2天换液一次;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:NCI-H78细胞、MSB-1细胞、BALL-1细胞
CHL-1 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:6—1:10传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞;相关产品有:NCI-128细胞、HEK/EBNA细胞、MGH-U1细胞
SaOS-2 Cells;背景说明:该细胞是FoghJ和TrempeG分离和鉴定的众多人类肿瘤细胞系中的一种;该细胞来自一位11岁的白人女性的骨肉瘤组织。患者经过放疗以及甲喋呤、阿霉素、长春新碱、环磷酰胺和aramycin-C等多种药物治疗。该细胞在免疫抑制小鼠中不致瘤,细胞表达表皮生长因子EGF受体、转化生长因子β(1型和2型)受体。;传代方法:1:2-1:4传代;每周1-2次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;多角形;相关产品有:A2058细胞、HO8910PM细胞、LNCaP-FGC细胞
CAL-12T Cells人肺癌细胞|有STR图谱
A-172 Cells人胶质母细胞瘤细胞|有STR图谱
HCMEC Cells人心脏微血管内皮细胞|有STR图谱
NCI-H1993 Cells人非小细胞肺癌腺癌细胞|有STR图谱
MV-4-11-LUC Cells人急性单核细胞白细胞|有STR图谱
SVEC4-10 Cells小鼠淋巴结内皮细胞|有STR图谱
A375-RFP Cells人黑色素瘤细胞|有STR图谱
SNU-16 Cells人胃癌细胞|有STR图谱
ChaGo-K-1 Cells人肺癌细胞|有STR图谱
OKT 3 Cells小鼠杂交瘤细胞|有STR图谱
SNU-638 Cells人胃癌细胞|有STR图谱
WSU-DLCL2-Luc Cells人弥漫大B淋巴瘤细胞|有STR图谱
MDA-MB-231+luc Cells人乳腺癌细胞|有STR图谱
RIN-14B Cells大鼠胰岛素瘤细胞|有STR图谱
NCI-H2122 Cells人非小细胞肺癌细胞|有STR图谱
D407 Cells人视网膜色素上皮细胞|有STR图谱
TR-LCC-1 Cells人喉癌细胞|有STR图谱
SW480-RFP Cells人结肠癌细胞|有STR图谱
SVEC4-10 Cells小鼠淋巴结内皮细胞|有STR图谱
HL-60 Cells人早幼粒急性白血病细胞|有STR图谱
Hi-five(BTI-TN-5B1-4) Cells昆虫细胞|有STR图谱
AMO-1 Cells人骨髓浆细胞瘤细胞|有STR图谱
NPC/HK1 Cells人鼻咽癌细胞|有STR图谱
OVCAR-5 Cells人转移性胃肠癌细胞|有STR图谱
HTh83 Cells人甲状腺癌细胞|有STR图谱
SNU-423 Cells人肝癌细胞|有STR图谱
NCI-H2347 Cells人肺癌细胞|有STR图谱
DC2.4 Cells小鼠骨髓来源树突状细胞|有STR图谱
HuLEC-5a Cells人肺微血管内皮细胞|有STR图谱
FRhK-4 Cells猴胚肾细胞|有STR图谱
HEPA1-6+luc Cells小鼠肝癌细胞|有STR图谱
LS1034 Cells人结肠腺癌细胞|有STR图谱
NCI-H1993 Cells人非小细胞肺癌腺癌细胞|有STR图谱
MLTC-1 Cells小鼠睾丸间质细胞瘤细胞|有STR图谱
MHCC97-H Cells人肝癌细胞|有STR图谱
DI TNC1 Cells大鼠脑间质细胞|有STR图谱
PLC/PRF/5 Cells人肝癌细胞|有STR图谱
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