"J774A1 Cells小鼠单核巨噬细胞低代次保种|STR图谱
【培养观察】
定期观察J774A1 Cells小鼠单核巨噬细胞低代次保种|STR图谱生长状态,注意培养基的pH值变化和细胞密度,及时换液和传代。
【细胞复苏】
复苏细胞时,应快速将冻存管从液氮中取出并置于37℃水浴中解冻,然后转移到含新鲜培养基的无菌管中并吹打混匀。整个复苏过程应尽可能在5-10分钟内完成,以确保细胞的高存活率。
【细胞传代】
传代时,应使用适量的胰蛋白酶溶液进行消化,并在显微镜下观察细胞消化情况。消化下来的细胞容易成团,需要吹打吹散。传代后,应确保细胞均匀分布在培养瓶或培养皿中。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。一般使用冻存液进行冻存,并置于液氮中储存。
【J774A1 Cells小鼠单核巨噬细胞低代次保种|STR图谱英文别名】
J-774A.1; J774.A1; J774 A1; J774A.1; J 774A.1; J774 A.1
【细胞培养经验分享】启蒙老师的重要性:一般进实验室都有师兄师姐带着做,他们就是你做细胞的启蒙老师。他们的操作手法、细节、理论讲解就成了你操作的准则,如营养液、细胞瓶的摆放位置、灭菌处理程序、开盖手法、细胞吹打手法等等。要学会他们的正确操作,在第一次的时候就要重视。像养孩子一样养细胞,细胞有时真的很脆弱,最好每天都去看看它,以防止出现培养箱缺水、缺二氧化碳、停电、温度不够等异常现象,也好及时解决这些意外,避免重复实验带来的更大痛苦。好细胞要及时保种:细胞要分批传代,这样即使有一批出了问题,还有一批备用的。像后者一般人可能不容易做到。
公司细胞系主要引进ATCC、DSMZ、JCRB、KCLB、RIKEN、ECACC等细胞库,细胞系体外培养,它们会成长为单层细胞,附着或紧贴在培养瓶上,或悬浮在体外的溶液中,细胞系复苏周期短,公司细胞系状态良好,饱满,有光泽等优点。EDTA的作用:许多人不用胰酶,只用EDTA,或者用胰酶/EDTA联合作用。这里要明白,胰酶切割细胞外基质的一些负责粘连和附着的蛋白,而EDTA通过螯合Ca离子,作用于整联蛋白的活性,所以EDTA的作用更加温和。有的人在胰酶里添加一些EDTA,或者对付特别难消化的细胞,添加多一些EDTA,就是这个道理。一般不要试图延长消化时间(如果5min还消化不下来的话),而应该想其它办法。
【背景信息】
J774A1 Cells小鼠单核巨噬细胞低代次保种|STR图谱详见相关文献介绍
【传代比例】
1:2-1:4(J774A1 Cells小鼠单核巨噬细胞低代次保种|STR图谱首次传代建议1:2)
【来源说明】
J774A1 Cells小鼠单核巨噬细胞低代次保种|STR图谱主要来源ATCC、ECACC、DSMZ、RCB等细胞库
【生长特性】
J774A1 Cells小鼠单核巨噬细胞低代次保种|STR图谱悬浮生长
【形态特性】
J774A1 Cells小鼠单核巨噬细胞低代次保种|STR图谱巨噬细胞样
【换液周期】
J774A1 Cells小鼠单核巨噬细胞低代次保种|STR图谱每周2-3次
【产品包装】
复苏发货:J774A1 Cells小鼠单核巨噬细胞低代次保种|STR图谱T25培养瓶(一瓶)或冻存发货:1ml冻存管(两支)
在培养细胞时,经常发现它们的状态不太理想,总是像一群顽皮的孩子般扎堆生长。用胰酶消化时,它们更是抱团取暖,形成一个个紧密的细胞团块,即使用移液管反复吹打也难以将它们分散成单个细胞。更令人困扰的是,它们的生长速度犹如雨后春笋,却极不均匀,传代第二天,某些区域就已拥挤得如同早高峰的地铁车厢。
细胞经过多次传代后,建立了稳定的体外培养模型且可稳定增殖。这些微小的生命单元在培养瓶中生生不息,恰似一支训练有素的军团,为科学家们科研实验提供着源源不断的创新灵感与技术支持。其价值不仅体现在当前广泛的应用中,更在于它为未来生命科学研究提供的可能性。随着技术的进步和对这一细胞系认识的深入,必将在更多领域展现其独特优势。研究人员在使用时应当充分了解其特性,合理设计实验,并注意细胞培养的质量控制,以确保研究结果的可靠性和可重复性。
【物种来源】
J774A1 Cells小鼠单核巨噬细胞低代次保种|STR图谱来源于人源、鼠源等其它物种来源
【培养条件】
37°C、5%CO₂、饱和湿度环境,使用含10%-20%FBS的基础培养基。
【消化传代】
使用0.25%胰酶-EDTA溶液,37°C孵育1-2分钟,轻拍培养瓶促进细胞脱落。(悬浮细胞可省略这步操作)
【污染防控】
严格无菌操作,定期检测支原体污染,必要时使用双抗预防细菌污染。
【细胞状态】
传代和消化过程中,应密切关注细胞状态,避免过度消化或机械损伤导致细胞活性下降。
【污染检测】
支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。
【细胞接收流程】
收到细胞后,应首先观察细胞状态,然后进行75%酒精消毒处理。将细胞置于37℃培养箱中放置2-4小时以稳定J774A1 Cells小鼠单核巨噬细胞低代次保种|STR图谱状态。当细胞密度达到80%-90%时,即可进行首次传代培养。
【操作规范】
在细胞培养和处理过程中,需严格遵守无菌操作规范,以避免细胞污染和交叉污染。
【消化条件】
室温下用胰酶消化1-3分钟。
【生物安全等级】
1级。
【空泡现象】
在密集培养时,细胞中可见巨大的空泡,这是细胞的正常特性,无需担心。
【血清比例】
使用10%-20%的血清浓度有助于优化J774A1 Cells小鼠单核巨噬细胞低代次保种|STR图谱实验条件,提高实验的重复性和稳定性。这一浓度范围经过多年实验和实践的验证,被认为是较为适宜的选择。
细胞传代步骤(二):终止消化:当观察到大部分细胞已经脱落时,向培养皿中加入适量的完全培养基以终止胰蛋白酶的消化作用。细胞悬液转移与离心:用吸管轻轻吹打培养皿底部的细胞,使其形成均匀的细胞悬液。然后,将细胞悬液转移至无菌离心管中,以适当的转速(通常为800-1000rpm)离心3-5分钟。重悬与接种:离心后,轻轻倒掉上清液,用适量的完全培养基重悬细胞沉淀。根据实验需要,将细胞悬液按照适当的比例接种到新的培养皿或培养瓶中,置于37℃、5% CO2的培养箱中继续培养。
胰蛋白酶的发现使屈内成为首次发现“一种能够降解蛋白质的酶(即胰蛋白酶)”的科学家,并首次提出了酶(Enzyme)的概念。在那个时期,科学家们开始研究酶在生物体中的作用,并尝试将其应用于实验室研究中。随着研究的深入,科学家们逐渐认识到胰酶在细胞传代中的潜在应用。经过大量的实验和研究,探索胰酶的最佳使用条件、浓度和作用时间等参数,以确保其在细胞传代中的有效性和安全性。经过不断的努力和改进,胰酶在细胞传代中的应用逐渐得到了完善和优化。如今,胰酶已成为细胞培养技术中不可或缺的工具之一,广泛应用于生物医学研究、药物开发和工业生产等领域。需要注意的是,虽然胰酶在细胞传代中发挥着重要作用,但其使用也需要遵循一定的规范和注意事项。
Lu-65 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:10传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:成纤维细胞;相关产品有:LO2细胞、NCIH661细胞、MDAMB175细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI Cells;背景说明:该细胞1973年由R. Cailleau建系,源自74岁乳腺导管癌女性患者的胸腔积液,细胞生长缓慢,松散贴壁,生长过程中会脱落到培养基,不会汇合,过表达FGF受体;传代方法:1:2—1:4传代,每周换液2—3次;生长特性:松散贴壁生长;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:HIBEpiC细胞、HRA19细胞、P3 NS1 Ag4/1细胞
C17.2 Cells;背景说明:神经干细胞;C57BL/6 x CD-1;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:U 138 MG细胞、Eca109细胞、U266S细胞
Rat-1 Cells;背景说明:成纤维细胞;自发永生;Fischer 344;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:GM00215A细胞、MDA231细胞、KU-812-F细胞
COR L279 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:LAN-1细胞、BLO 11细胞、MDA-157细胞
HAP1 ARMC10 (-) 1 Cells(提供STR鉴定图谱)
HAP1 SLC35F1 (-) 2 Cells(提供STR鉴定图谱)
TE-3A Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:COLO 741细胞、GM06141B细胞、SuperTube细胞
3T3-L1 Cells;背景说明:3T3-L1是从3T3细胞(Swissalbino)中经克隆分离得到的连续传代的亚系。该细胞从快速分裂到汇合和接触性抑制状态经历了前脂肪细胞到脂肪样细胞的转变。该细胞鼠痘病毒阴性;可产生甘油三酯,高浓度血清可增强细胞内脂肪堆积。;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:成纤维细胞样;相关产品有:NS1-Ag 4/1细胞、LTEP-a2细胞、CCD1112Sk细胞
UM-UC-14 Cells;背景说明:肾癌;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:CF-1 MEF细胞、GL261细胞、ZYM-DIEC02细胞
ECGI10 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:CG4细胞、BDCM细胞、C3H/10T1/2 clone 8细胞
HCCLM3 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:HAEC细胞、Panc_03_27细胞、EB-3细胞
J774A.1 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:32D:cl3细胞、UCLA-SO-14细胞、U-138-MG细胞
Tregs Cells;背景说明:调节性T Cells;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Epstein-Barr-3细胞、SCC9细胞、SKNBE2细胞
H-2107 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:3-4天换液1次。;生长特性:悬浮生长 ;形态特性:上皮细胞;相关产品有:rUCMSCs细胞、HDQP1细胞、H-1688细胞
IBBISTi006-A Cells(提供STR鉴定图谱)
LIGHT-CHO Cells(提供STR鉴定图谱)
NCC-EC-3 Cells(提供STR鉴定图谱)
PathHunter CHO-K1 ADRA1B beta-arrestin Cells(提供STR鉴定图谱)
S008397 Cells(提供STR鉴定图谱)
Ubigene HEK293 CTNNA1 KO Cells(提供STR鉴定图谱)
WG0103 Cells(提供STR鉴定图谱)
HCT116-SLC2A11-KO-c9 Cells(提供STR鉴定图谱)
H650 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:3-1:6传代;;生长特性:悬浮生长;形态特性:球形的;相关产品有:K1细胞、SK HEP 01细胞、RLE-6TN细胞
RWPE1 Cells;背景说明:肿瘤抑制基因: p53 + [PubMed: 9214605] pRB + [PubMed: 9214605] 一位正常男性前列腺组织切片的周围区域的上皮细胞用单拷贝的人乳头瘤病毒的18(HPV-18)进行转化,建立了RWPE-1 (ATCC CRL-11609) 细胞株 [PubMed: 9214605]. 在三维Matrigel培养时,在雄激素作用下,RWPE-1细胞形成腺胞并向培养基中分泌PSA。[PubMed: 11170142]. 当与Matrigel或基质细胞混合注射雄性裸鼠时,RWPE-1细胞也能形成腺胞[PubMed: 11304724] 并产生PSA。 来源于RWPE-1的细胞再用Kirstin鼠类肿瘤病毒转染Ki-ras基因,建立了能成瘤的RWPE-2细胞株(ATCC CRL-11610) [PubMed: 9214605] 和 RWPE2-W99 (ATCC CRL-2853) 细胞株。 另外,用N--N-(MNU)处理RWPE-1,建立了一系列模拟前列腺癌进程中不同时期的成瘤细胞株。 它们是 WPE1-NA22 (ATCC CRL-2849), WPE1-NB14 (ATCC CRL-2850, WPE1-NB11 (ATCC CRL-2851) 和 WPE1-NB26 (ATCC CRL-2852) 细胞株。 据提供者报道,RWPE-1 细胞株(ATCC CRL-11609)经过检测,乙肝、丙肝、人免疫缺陷病毒都呈阴性。;传代方法:1:3传代,2-3天传一代。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞;相关产品有:Walker-256细胞、mIMCD3细胞、P3-X63-Ag8.653细胞
RBL.2H3 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。;生长特性:贴壁生长;形态特性:成纤维细胞;相关产品有:BT20细胞、HCC 70细胞、GM346细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-231 Cells;背景说明:MDA-MB-231来自患有转移乳腺腺癌的51岁女病人的胸水。在裸鼠和ALS处理的BALB/c小鼠中,它能形成低分化腺癌(III级)。;传代方法:消化3-5分钟,1:2,3天内可长满;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:95D细胞、Hs 940.T细胞、UACC812细胞
Jurkat (clone E6-1) Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:SW756细胞、CEM-CCRF (CAMR)细胞、MOLT-16细胞
BCECs Cells;背景说明:脑;毛细血管;内皮 Cells;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:PANC403细胞、MCF-7/ADR-RES细胞、MDA-MB 468细胞
INS1-E Cells;背景说明:胰岛素瘤;NEDH;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:PLA801-95D细胞、WEHI 3B细胞、COLO 699细胞
H1436 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:随细胞的密度而增加;生长特性:悬浮生长;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Hep 2细胞、NRK clone 49F细胞、D6P2T细胞
BE(2)-C Cells;背景说明:神经母细胞瘤;骨髓转移;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:NCI-H209细胞、MESSA/Dx5细胞、COLO679细胞
HCC1937 Cells;背景说明:这株细胞1995年10月13日最初来源于原发性导管癌, 用了11.5个月建株。肿瘤分类为TNM IIB期, 3级。BRCA1分析表明这株细胞是BRCA1 5382C突变纯合的, 而来源于同一病人的类淋巴母细胞细胞株在这个突变位点上是杂合的。 另两个家庭成员也有这个突变; 一个同卵双生姐妹也患有乳腺癌。这株细胞有一个后天的TP53突变, 而其野生型等位基因丢失; 一个PTEN基因的后天的纯合缺失, 以及多个与乳腺癌发病机理相关的位点上发生的杂合突变。这株细胞Her2-neu和p53表达都呈阴性。;传代方法:1:2传代;4-5天传代一次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;多角形;相关产品有:JROECL 21细胞、SHSY-5Y细胞、DMS53细胞
BC3H1 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:T9细胞、OC 316细胞、NS-20Y细胞
BCP1 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:维持细胞浓度在2×105/ml-1×106/ml;根据细胞浓度每2-3天补液1次。;生长特性:悬浮生长 ;形态特性:淋巴母细胞样;相关产品有:M4e细胞、SK-CO-1细胞、IOSE29细胞
Hs 688(A).T Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:成纤维细胞;相关产品有:SCC25细胞、E.G7-OVA细胞、SK LU 1细胞
IHH-4 Cells;背景说明:甲状腺乳头状癌;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:PE CA PJ34细胞、CEM-C1细胞、L 132细胞
NCI-H1299 Cells人非小细胞肺癌细胞|有STR图谱
NCI-H1581 Cells人非小细胞肺癌细胞|有STR图谱
UM-SCC-1 Cells人口底鳞癌细胞|有STR图谱
NCI-H661 Cells人大细胞肺癌细胞|有STR图谱
L-cell Cells小鼠皮下结缔组织细胞|有STR图谱
HGC-27 Cells人胃癌细胞|有STR图谱
93T449 Cells人高分化脂肪肉瘤细胞|有STR图谱
SU-DHL-8-Luc Cells人B细胞淋巴瘤细胞|有STR图谱
T84 Cells人结肠腺癌肺转移细胞|有STR图谱
293T-RFP Cells人胚肾细胞|有STR图谱
TE-2 Cells人食管癌细胞|有STR图谱
L1210 Cells小鼠淋巴细胞白血病细胞|有STR图谱
HuH-6 Cells人肝母细胞瘤细胞|有STR图谱
SW948 Cells人结肠腺癌细胞|有STR图谱
NCI-H2009 Cells人肺腺癌细胞|有STR图谱
Y3-Ag 1.2.3 Cells大鼠骨髓瘤细胞|有STR图谱
JVM-2 Cells人套细胞淋巴瘤细胞|有STR图谱
EBTr Cells牛胚气管细胞|有STR图谱
PC-3M Cells人前列腺癌细胞|有STR图谱
EOMA Cells小鼠血管内皮瘤细胞|有STR图谱
Raji Cells人Burkitts淋巴瘤细胞|有STR图谱
SK-MEL-28 Cells人恶性黑色素瘤细胞|有STR图谱
SNU-5 Cells人胃癌细胞|有STR图谱
SW480-RFP Cells人结肠癌细胞|有STR图谱
NCM460 Cells人正常结肠上皮细胞|有STR图谱
HEI-OC1 Cells小鼠耳蜗毛细胞|有STR图谱
KTC-1-Luc Cells人甲状腺癌细胞|有STR图谱
NCI-H1781 Cells人细支气管肺泡癌细胞|有STR图谱
OPM2 Cells人多发性骨髓瘤细胞|有STR图谱
B16/OVA Cells小鼠黑色素瘤细胞|有STR图谱
HepG2/C3A Cells人肝癌细胞|有STR图谱
VSC4.1 Cells大鼠脊髓前角运动神经元瘤细胞|有STR图谱
ND7/23 Cells大鼠/小鼠神经元融合细胞|有STR图谱
OCI-Ly19 Cells人B细胞淋巴瘤细胞|有STR图谱
MDS-L Cells人骨髓增生异常综合征细胞|有STR图谱
KTC-1 Cells人甲状腺癌细胞|有STR图谱
LMH Cells鸡肝癌细胞|有STR图谱
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