"Sp2/0-Ag14 Cells小鼠骨髓瘤细胞低代次保种|STR图谱
【培养观察】
定期观察Sp2/0-Ag14 Cells小鼠骨髓瘤细胞低代次保种|STR图谱生长状态,注意培养基的pH值变化和细胞密度,及时换液和传代。
【细胞复苏】
复苏细胞时,应快速将冻存管从液氮中取出并置于37℃水浴中解冻,然后转移到含新鲜培养基的无菌管中并吹打混匀。整个复苏过程应尽可能在5-10分钟内完成,以确保细胞的高存活率。
【细胞传代】
传代时,应使用适量的胰蛋白酶溶液进行消化,并在显微镜下观察细胞消化情况。消化下来的细胞容易成团,需要吹打吹散。传代后,应确保细胞均匀分布在培养瓶或培养皿中。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。一般使用冻存液进行冻存,并置于液氮中储存。
【Sp2/0-Ag14 Cells小鼠骨髓瘤细胞低代次保种|STR图谱英文别名】
SP2/0-Ag14; SP2/0-AG14; SP2/0-ag14; Sp2/O-Ag14; SP2/O-Ag14; Sp2/0-Ag-14; SP2-0-Ag14; SP2/0 Ag-14; SP-2/0-AG14; Sp 2/0-Ag 14; Sp2/0; SP2/0; Sp2/O; SP2/O; SP-2; SP2; GM03569; GM3569; GM03569B; GM3569B; GM03569D
在生命科学研究的浩瀚海洋中,细胞培养犹如一艘承载着无数科研梦想的帆船。作为国内领先的生物技术服务平台,我们建立的细胞资源库已冻存保种超两千余种细胞系,涵盖肿瘤细胞、干细胞、原代细胞等全品类。这个数字背后,是十年如一日对细胞培养技术的极致追求,我们为每种细胞系建立了专属的""成长档案"",从培养基配方、传代比例到培养箱参数,累计优化超过15000组培养条件,确保每株细胞都能展现其最真实的生物学特性。
细胞培养瓶破裂或渗漏是实验室最紧急的情况之一。当发现容器破损时,应立即执行三级处理流程:首先将破损培养瓶放入生物安全柜,用消毒剂浸泡的纱布覆盖裂口;随后将培养物转移至备用培养瓶,转移过程需严格保证无菌操作;最后对工作台面进行彻底消毒。值得注意的是,聚乙烯材质的培养瓶在反复冻融后更易产生微裂纹,建议使用前进行透光检查。对于珍贵细胞系,可预先分装冻存备份,并建立定期镜检制度,每周至少两次检查培养容器完整性。
【背景信息】
Sp2/0-Ag14 Cells小鼠骨髓瘤细胞低代次保种|STR图谱该细胞是由绵羊红细胞免疫的BALB/c小鼠脾细胞和P3X63Ag8骨髓瘤细胞融合得到的。该细胞不分泌免疫球蛋白,对20μg/ml的8-鸟嘌呤有抗性,对HAT比较敏感;该细胞可以作为细胞融合时的B细胞组分用于制备杂交瘤;鼠痘病毒阴性。
【传代比例】
1:2-1:4(Sp2/0-Ag14 Cells小鼠骨髓瘤细胞低代次保种|STR图谱首次传代建议1:2)
【来源说明】
Sp2/0-Ag14 Cells小鼠骨髓瘤细胞低代次保种|STR图谱主要来源ATCC、ECACC、DSMZ、RCB等细胞库
【生长特性】
Sp2/0-Ag14 Cells小鼠骨髓瘤细胞低代次保种|STR图谱贴壁生长
【形态特性】
Sp2/0-Ag14 Cells小鼠骨髓瘤细胞低代次保种|STR图谱上皮细胞样
【换液周期】
Sp2/0-Ag14 Cells小鼠骨髓瘤细胞低代次保种|STR图谱每周2-3次
【产品包装】
复苏发货:Sp2/0-Ag14 Cells小鼠骨髓瘤细胞低代次保种|STR图谱T25培养瓶(一瓶)或冻存发货:1ml冻存管(两支)
无菌操作是预防污染的核心。以下是一些关键的无菌操作要点:实验前用75%酒精擦拭超净工作台台面,并开启紫外灯照射20-30分钟。操作时关闭紫外灯,开启风机,避免气流干扰。实验人员需穿戴无菌实验服、口罩和手套,并避免在操作过程中说话或咳嗽,以减少飞沫污染。所有打开的试剂瓶和培养瓶应倾斜放置,避免垂直开口暴露于空气中。使用后的移液枪头等废弃物应及时清理,避免交叉污染。
细胞系在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液。细胞只要能从基质上脱离下来,即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右)是正常的,不要再去延长消化时间,等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞:润洗方法5min还不能消化,以结肠癌细胞为例,比如:HCT15、LS411和KM12细胞,胰酶消化,一般10 cm培养皿,一次加入300ul-500ul就足够了。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。
【物种来源】
Sp2/0-Ag14 Cells小鼠骨髓瘤细胞低代次保种|STR图谱来源于人源、鼠源等其它物种来源
【培养条件】
37°C、5%CO₂、饱和湿度环境,使用含10%-20%FBS的基础培养基。
【消化传代】
使用0.25%胰酶-EDTA溶液,37°C孵育1-2分钟,轻拍培养瓶促进细胞脱落。(悬浮细胞可省略这步操作)
【污染防控】
严格无菌操作,定期检测支原体污染,必要时使用双抗预防细菌污染。
【细胞状态】
传代和消化过程中,应密切关注细胞状态,避免过度消化或机械损伤导致细胞活性下降。
【污染检测】
支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。
【细胞接收流程】
收到细胞后,应首先观察细胞状态,然后进行75%酒精消毒处理。将细胞置于37℃培养箱中放置2-4小时以稳定Sp2/0-Ag14 Cells小鼠骨髓瘤细胞低代次保种|STR图谱状态。当细胞密度达到80%-90%时,即可进行首次传代培养。
【操作规范】
在细胞培养和处理过程中,需严格遵守无菌操作规范,以避免细胞污染和交叉污染。
【消化条件】
室温下用胰酶消化1-3分钟。
【生物安全等级】
1级。
【空泡现象】
在密集培养时,细胞中可见巨大的空泡,这是细胞的正常特性,无需担心。
【血清比例】
使用10%-20%的血清浓度有助于优化Sp2/0-Ag14 Cells小鼠骨髓瘤细胞低代次保种|STR图谱实验条件,提高实验的重复性和稳定性。这一浓度范围经过多年实验和实践的验证,被认为是较为适宜的选择。
细胞传代准备工作:预热培养基和PBS:在开始传代前,将完全培养基和磷酸盐缓冲液(PBS),预热至37℃,以确保细胞在操作过程中不会受到温度冲击。准备无菌器材:包括无菌吸管、移液枪、离心管、培养皿、胰蛋白酶(或EDTA)溶液、完全培养基等。检查细胞状态:在显微镜下观察细胞的生长密度和形态,确保细胞处于对数生长期且状态良好。
瓶装500ml血清的解冻需要采用逐步升温的""阶梯式解冻法"",这是保证血清质量的关键步骤。具体操作流程如下:首先将血清从–20℃或–70℃转移至4℃冰箱,缓慢溶解24小时。这一低温过渡阶段可以让血清中的各种成分逐渐适应温度变化,避免突然的温度波动导致蛋白质变性。待血清完全溶解后,再将其移至室温环境使其完全解冻。在解冻过程中,需要每隔2-3小时轻轻摇晃瓶身,使血清各部分的温度和成分均匀分布,这一操作能显著减少沉淀物的形成。但需特别注意摇晃力度,避免产生气泡,因为气泡可能导致血清中的蛋白质变性。
PL 5 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:U 266细胞、HT144-mel细胞、D10.G4.1细胞
KU812-F Cells;背景说明:慢性粒细胞白血病;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:639V细胞、B35细胞、Pro-5 Lec1.3c细胞
Hs832T Cells;背景说明:卵巢,恶性囊肿;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:PA I细胞、SCL I细胞、mIMCD-3细胞
RPMI.8226 Cells;背景说明:来源于一位61岁的男性浆细胞瘤患者;可产生免疫球蛋白轻链,未检测到重链。;传代方法:按1:2传代,5-6小时可以看到细胞分裂;生长特性:悬浮生长;形态特性:淋巴母细胞样;相关产品有:NCIH250细胞、KYSE 50细胞、KMB 17细胞
COR-L105 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:HSC1细胞、NCIH1435细胞、Tca-8113细胞
GM11773 Cells(提供STR鉴定图谱)
HAP1 DDX5 (-) 2 Cells(提供STR鉴定图谱)
U-251 Cells;背景说明:U-251 MG分离至一位患者的胶质母细胞瘤组织。;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:成纤维细胞样;相关产品有:Hs 606细胞、293E细胞、CT26-clone 25细胞
VM Cub 1 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:INS1E细胞、HLEpiC细胞、22Rv1细胞
RTE Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:3传代,3-4天换液一次;生长特性:贴壁生长;形态特性:多角;相关产品有:ECC-1细胞、UACC 893细胞、H-250细胞
AM38 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞;相关产品有:RPMI8226/S细胞、VMRCLCD细胞、Co 205细胞
U-87MG ATCC Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:BJ [Human fibroblast]细胞、SW 1222细胞、HT-1376细胞
SMA560 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Kit 225 K6细胞、CEM/0细胞、PECAPJ34细胞
SW756 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:UCLA-SO-M14细胞、7860细胞、CAL120细胞
LS-411N Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;每周2次;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:N-87细胞、H1648细胞、MESSA细胞
HH0320 Cells(提供STR鉴定图谱)
iNV22 Cells(提供STR鉴定图谱)
Ma-1 Cells(提供STR鉴定图谱)
ND07274 Cells(提供STR鉴定图谱)
Peri-iPS-C1 Cells(提供STR鉴定图谱)
Ubigene A-549 PRKAA1 KO Cells(提供STR鉴定图谱)
UTUi001-A Cells(提供STR鉴定图谱)
HG02013 Cells(提供STR鉴定图谱)
HCC94 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:HCC-2218细胞、AN-3细胞、H2227细胞
MDA134 Cells;背景说明:该细胞1973年由R. Cailleau建系,源自74岁乳腺导管癌女性患者的胸腔积液,细胞生长缓慢,松散贴壁,生长过程中会脱落到培养基,不会汇合,过表达FGF受体;传代方法:1:2—1:4传代,每周换液2—3次;生长特性:松散贴壁生长;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:RBL 1细胞、H-1993细胞、MDCK细胞
BV-173 Cells;背景说明:慢性粒细胞白血病;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Hs 940.T细胞、Mv1.Lu细胞、H676细胞
BTI-Tn-5B1-4 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:RMC细胞、H1581细胞、OKT 3细胞
Roswell Park Memorial Institute 7951 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:4传代,2天换液1次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞;相关产品有:NCI-ADR-RES细胞、SKN-AS细胞、A-375.S2细胞
Roswell Park Memorial Institute 7951 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:4传代,2天换液1次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞;相关产品有:NCI-ADR-RES细胞、SKN-AS细胞、A-375.S2细胞
Hs737T Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2—1:3传代;每周换液2-3次;生长特性:贴壁生长;形态特性:成纤维细胞;相关产品有:KLN 205细胞、MDAMB468细胞、HA细胞
TMD-8 Cells;背景说明:弥漫大B淋巴瘤;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:293-FT细胞、SKNBE-2细胞、CEM-0细胞
H4-II-E Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Hmy.2 CIR细胞、PANC 203细胞、624细胞
LAPC4 Cells;背景说明:前列腺癌;淋巴结转移;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:EVSAT细胞、SNU886细胞、Bovine ENDometrial cells细胞
ROS17/2.8 Cells;背景说明:骨肉瘤;ACI 9935;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:WERI细胞、HOS TE 85细胞、SKNAS细胞
ROS1728 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:T_T_细胞、SW962细胞、SW 954细胞
SUM-52-PE Cells;背景说明:乳腺癌;胸腔积液转移;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:MDA MB 175 VII细胞、HN13细胞、HuH1细胞
CTV1 Cells;背景说明:急性T淋巴细胞白血病;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Intestinal Epithelioid Cell line No. 6细胞、NEC细胞、PANC.1细胞
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