禽传染性支气管炎病毒Conn型染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

产品概述

本试剂盒采用染料法荧光定量RT-PCR技术，特异性检测禽传染性支气管炎病毒Conn型（Avian Infectious Bronchitis Virus Conn Strain）的核酸。适用于科研用途，不用于临床诊断。

技术特点

高灵敏度与特异性：针对Conn型病毒保守序列设计引物，避免与其他亚型交叉反应。

一管式检测：减少开盖操作，降低污染风险。

快速扩增：反应时间优化至1.5小时内完成。

兼容性：适配主流荧光定量PCR仪（需根据机型选择是否添加ROX校正染料）。

组分与保存

规格：50次/盒（20μL反应体系）。

主要成分：

RT-PCR预混液（含逆转录酶、DNA聚合酶、dNTPs、荧光染料）

阳性对照（非活病毒，为RNA片段，10^2–10^7拷贝/μL梯度）

阴性对照（无核酸酶水）

模板稀释液（用于标准品梯度制备）

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月；运输需低温。

操作步骤

样本处理：按规范提取待测样本RNA，避免降解。

阳性对照稀释：

标记离心管（如7~2号），依次用带芯枪头加入45μL稀释液，梯度稀释阳性对照至10^7–10^2拷贝/μL。

注意：稀释操作需在独立区域进行，防止污染。

反应体系配制：

每反应需加入5μL模板RNA、10μL预混液、5μL无核酸酶水。

PCR程序设置：

逆转录：50℃ 15分钟；预变性：95℃ 3分钟；

扩增循环（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）。

结果判读

阈值设定：以基线荧光信号标准偏差的10倍为阈值。

阳性判定：Ct值≤35且扩增曲线呈S型；阴性样本无典型扩增曲线。

注意事项

实验分区操作（试剂准备区、样本处理区、扩增区），避免气溶胶污染。

阳性对照需最后加入，使用后密封处理。

若检测环境湿度＞60%，建议在超净台内操作。

免责声明

本产品仅限科研使用，不适用于临床诊断或动物疫病防控。用户需遵守实验室生物安全规范。

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