兔a-2-Macroglobulinelisa试剂盒

商品属性

检测目的

本试剂盒用于定量检测兔血清、血浆或其他生物液体中α-2-巨球蛋白（α-2-Macroglobulin, α2M）的浓度。α2M是一种广谱蛋白酶抑制剂，参与炎症反应、免疫调节及组织修复等生理病理过程。

实验原理

采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）：

包被抗体：微孔板预包被抗兔α2M单克隆抗体。

样本反应：样本中的α2M与固相抗体结合，洗涤后加入HRP标记的检测抗体形成复合物。

显色系统：TMB底物在HRP催化下显蓝色，终止液转化为黄色，450nm波长测定OD值，浓度与吸光度正相关。

试剂盒组成

预包被96孔板（或48孔板）

重组兔α2M标准品（梯度浓度）

HRP标记检测抗体

TMB显色液、终止液

洗涤缓冲液（20×浓缩液）

样本稀释液

封板膜、说明书

样本要求

血清/血浆：采集后离心去除颗粒物，-20℃保存避免反复冻融。

细胞培养上清：离心去除沉淀，稀释后检测。

其他体液：需验证基质效应。

操作步骤

标准品稀释：按说明书制备系列浓度标准曲线。

加样：每孔加入样本或标准品，37℃孵育1小时。

洗涤：弃液后PBST洗涤3次。

加检测抗体：HRP标记抗体孵育30分钟。

显色：加入TMB避光反应15分钟，终止后读数。

计算与分析

以标准品OD值绘制曲线，四参数拟合（4PL）计算样本浓度。

检测范围：通常为0.156-10 ng/mL。

注意事项

避免试剂交叉污染，不同批次组分勿混用。

显色时间需严格控制，强阳性样本需进一步稀释。

操作时佩戴防护用具，终止液含硫酸，需谨慎处理。

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