胡萝卜源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒

胡萝卜源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品原理

本试剂盒基于探针法荧光定量PCR技术，通过Taq酶的5’核酸外切酶活性切割与靶序列结合的探针（5’端标记荧光报告基团，3’端标记淬灭基团），实时检测扩增过程中荧光信号变化，实现对胡萝卜源性成分的定量或定性分析。

产品特点

高灵敏度：优化的引物和探针设计，检测限低至10拷贝/μL。

高特异性：针对胡萝卜源性成分保守序列设计，避免交叉反应。

即开即用：预混缓冲液、酶及引物探针，用户仅需提供样品核酸模板。

双用途：支持定性和定量检测，定量线性范围达5个数量级（10²~10⁷拷贝/μL）。

质量控制：含阳性对照（无传染性DNA片段）和阴性对照，确保结果可靠性。

试剂盒组成

| 成分 | 规格 |

| 探针法qPCR缓冲液 | 500μL |

| qPCR酶混合液 | 100μL |

| 荧光PCR模板稀释液 | 1mL |

| 胡萝卜源性成分引物混合液 | 100μL |

| 胡萝卜源性成分探针 | 50μL |

| 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50μL |

| 说明书 | 1份 |

使用方法

1. 标准曲线制备

标记6管，依次稀释阳性对照（10⁷~10²拷贝/μL），独立操作避免污染。

示例：7号管加5μL阳性对照至45μL稀释液，震荡混匀得10⁷拷贝/μL，依次梯度稀释。

2. 样品RNA制备

建议设置N+2个样本（含阳性/阴性对照），使用柱式提取法或兼容的RNA提取试剂盒。

3. qPCR反应体系（20μL）

| 成分 | 样品管 | 阴性对照 | 标准曲线管 |

| qPCR缓冲液 | 10μL | 10μL | 10μL |

| 酶混合液 | 2μL | 2μL | 2μL |

| 探针 | 1μL | 1μL | 1μL |

| 引物混合液 | 2μL | 2μL | 2μL |

| 样品RNA/标准品 | 5μL | - | 5μL |

| 超纯水 | - | 5μL | - |

4. 反应程序

| 步骤 | 温度 | 时间 |

| 逆转录 | 50℃ | 30 min |

| 预变性 | 94℃ | 10 min |

| 40循环 | 94℃ 15 sec → 60℃ 1 min（采集FAM信号） |

数据分析

定量检测：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴，计算样品浓度。

定性检测：阴性对照Ct≥40；阳性对照Ct≤36。样品Ct≤36判为阳性，≥40为阴性，36~40需复测。

注意事项

分区操作：样本处理、试剂配制、加样需在不同区域进行，避免交叉污染。

试剂解冻：使用前充分混匀并短暂离心。

污染控制：实验后以10%次氯酸或75%酒精清洁台面及移液器。

适用范围：仅限科研，不可用于临床诊断。

公司正在出售的产品