兔胰腺星状细胞

兔胰腺星状细胞

产品信息：

产品名称 兔胰腺星状细胞

组织来源 胰腺组织
种属 兔

产品规格 5×10^5Cells/T25

培养信息：

方法简介：实验室分离的兔胰腺星状细胞采用胶原酶消化法制备而来制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的兔胰腺星状细胞经α-SMA或Desmin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

产品名称：兔胰腺星状细胞

英文简称：PSCs

组织来源：胰腺组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养信息：包被条件

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传3-5代

消化液：0.25%胰蛋白酶兔胰腺星状细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞简介 ：

兔胰腺星状细胞分离自胰腺组织；胰腺分为外分泌腺和内分泌腺两部分。外分泌腺由腺泡和腺管组成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳酸氢钠、胰蛋白酶原、脂肪酶、淀粉酶等。胰液通过胰腺管排入十二指肠，有消化蛋白质、脂肪和糖的作用。内分泌腺由大小不同的细胞团──胰岛所组成，胰岛主要由4种细胞组成：α细胞、β细胞、γ细胞及PP细胞。α细胞分泌胰高血糖素，升高血糖；β细胞分泌胰岛素，降低血糖；γ细胞分泌生长抑素，以旁分泌的方式抑制α、β细胞的分泌；PP细胞分泌胰多肽，抑制胃肠运动、胰液分泌和胆囊收缩。纤维化是慢性胰腺炎的典型病理特征，活化的胰腺星状细胞(PSC)是胰腺纤维化的主要效应细胞，PSC分离和成功培养是体外研究胰腺纤维化的重要前提。未活性化的PSC胞浆中富含维A脂滴，并表达Desmin蛋白，活化后的PSC则表达α-平滑肌肌动蛋白(alpha-SMA)。PSC具有静息态与激活态两种，并分别具有特异的标志物。静息状态PSC胞质内富含的维生素A脂滴可以被油红O染成红色，阳性表达Desmin。激活状态PSC阳性表达alpha-SMA。油红O染色发现，原代分离的细胞培养6d，胞浆中仍可见明显的脂滴，传代后，橙红色的脂滴颗粒显著减少甚至消失。免疫细胞化学染色显示，细胞接种24h仍然表达Desmin，48h后Desmin基本不再表达。培养48h后绝大多数细胞开始表达alpha-SMA，随着培养时间的增长和传代次数的增加，细胞表达alpha-SMA，而不再表达Desmin，说明细胞活化。提示PSC接种24h后即启动了激活过程，至培养第6d大多数细胞激活，传代后细胞处于高度激活状态。原代胰腺星状细胞可作为慢性胰腺炎新药的细胞筛选模型，目前研究发现：胰腺受损时，在各种刺激因子作用下使胰腺星状细胞活化，导致细胞形态：、功能发生变化，促使基质增生、胶原蛋白的大量生成及不规则沉积。
操作过程：

组织消化的细节：

分阶段消化：对于致密组织（如肾脏、乳腺），可先剪碎至1mm³左右的小块，用PBS清洗2-3次去除血液和杂质，再进行酶消化，避免杂质影响酶的活性。

间歇振荡消化：消化过程中可将培养瓶置于摇床上，以60-80rpm的速度轻微振荡，促进酶与组织充分接触，提高消化效率。

细胞计数与接种：

计数前混匀：细胞悬液需充分混匀后再取样计数，避免细胞沉降导致计数误差；计数时至少计数2个方格，取平均值提高准确性。

接种后静置：细胞接种后将培养瓶置于培养箱内静置2-4小时，期间不要晃动，让细胞自然贴壁，之后再轻轻更换培养位置。

换液与传代的技巧：

换液留底液：换液时不要完全倒掉旧培养基，可保留10%左右的底液，减少细胞环境的突变，帮助细胞适应新培养基。

传代避免过度消化：原代细胞对胰蛋白酶更敏感，传代时消化时间比传代细胞短2-3分钟，镜下观察到细胞边缘收缩、开始脱落时即可终止消化。
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原代细胞实验常见问题：

污染防控：实验全程严格无菌操作，超净工作台使用前紫外消毒30分钟，实验用品需高压灭菌；定期对培养箱、水浴锅等设备进行清洁和消毒，避免细菌、真菌、支原体污染。

细胞老化与分化：原代细胞传代次数有限，通常传至3-5代后会出现老化，需及时冻存早期代次细胞；培养过程中避免过度传代、营养缺乏、环境刺激等因素，防止细胞自发分化。

实验重复性保障：每次实验使用同一来源、同一代次的细胞，严格控制实验条件（如培养基批次、消化时间、培养时间等），设置足够的重复样本，减少实验误差。