兔脂肪细胞
产品信息:
产品名称 兔脂肪细胞
组织来源 脂肪组织
种属 兔
产品规格 5×10^5Cells/T25
英文名称 | Rabbit Adipocyte Cells | 规格 | 5×105 |
细胞形态 | 梭形、多角形、圆形 | 货号 | P-X2162 |
培养信息:
方法简介:实验室分离的兔脂肪细胞采用胶原酶-胰酶联合消化法获得前脂肪细胞,经成脂诱导培养基诱导培养制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:实验室分离的兔脂肪细胞经油红O染色检测,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称:兔脂肪细胞
组织来源:脂肪组织
产品规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养信息:包被条件PLL(0.1mg/ml)
培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:梭形、多角形、圆形
传代特性:属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群
消化液:0.25%胰蛋白酶兔脂肪细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞简介 :
兔脂肪细胞分离自脂肪组织;脂肪组织主要由大量群集的脂肪细胞构成,聚集成团的脂肪细胞由薄层疏松结缔组织分隔成小叶;贮存的脂肪,在需要时可迅速分解成甘油和脂肪酸,经血液输送到各组织以供利用。它们影响胰岛素敏感性、血压水平、内皮功能、纤溶活动及炎症反应,参与多种重要病理生理过程;脂肪组织已由过去单纯作为能量储存的器官而成为一个极其重要的内分泌系统。脂肪细胞分为白色脂肪细胞和褐色(棕色)脂肪细胞,常呈白色,在婴幼儿期大量增殖,到青春期数量达到巅峰,此后数量一般不再增加。细胞内含有大量富含脂肪的小泡,称为脂质泡,富含光面内质网。此外,还有一种褐色脂肪细胞,在动物体内主要存在于肩胛骨间、颈背部、腋窝、纵隔及肾脏周围,含有高度团缩的褐色脂肪,作用是将脂质分解产热,调节体内脂质比例。
原代细胞传代:
传代时机判断
细胞汇合度达到80%-90%时进行传代,避免细胞过度汇合导致接触抑制,影响增殖能力
观察细胞状态:细胞形态正常,无明显漂浮、污染迹象
消化环节控制
消化前准备:吸出旧培养基,用PBS轻轻冲洗细胞1-2次,去除血清(血清会抑制胰蛋白酶活性)
消化液选择:同原代分离,根据细胞类型选择合适的消化酶,胰蛋白酶消化时间一般为1-5分钟,胶原酶消化时间为10-30分钟
消化终止:显微镜下观察到细胞回缩变圆、间隙增大时,立即加入含血清的培养基终止消化,血清浓度不低于10%
细胞吹打:用移液器轻轻吹打细胞,避免过度用力导致细胞破裂,吹打次数一般为10-15次
传代比例控制
传代比例根据细胞生长速度调整:生长速度快的细胞(如成纤维细胞)可按1:3-1:6传代,生长速度慢的细胞(如内皮细胞、神经细胞)按1:2传代
首次传代比例可适当提高(如1:2),待细胞适应体外培养环境后再调整为常规比例
传代后培养
接种后轻轻晃动培养瓶,使细胞均匀分布,放入培养箱中培养
24小时内不要晃动培养瓶,避免细胞贴壁不牢
培养24-48小时后观察细胞贴壁情况,更换新鲜培养基,去除未贴壁的死细胞和细胞碎片
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收货与处理流程:
1. 收货检查
收到细胞后首先观察T25培养瓶瓶身是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有异常及时联系。
2. 细胞复苏(仅针对冻存细胞)
将冻存管迅速放入37℃温水中摇晃融化,时间约1分钟
加入4-5ml完全培养基混匀,1000RPM常温离心4-5分钟
弃去上清液,补加1-2ml培养液吹匀,移入含5ml培养基的培养瓶中培养过夜,第二天换液并检查细胞密度
3. 新鲜细胞处理
用75%酒精消毒培养瓶瓶身,拆下封口膜
放入37℃、5%CO₂、饱和湿度的培养箱中静置3-4小时,稳定细胞状态后再进行后续操作