兔脉络膜微血管内皮细胞

细胞简介：

兔脉络膜微血管内皮细胞分离自眼球脉络膜组织；脉络膜在视网膜和巩膜之间，含有丰富血管和色素细胞，对外力冲击的耐受性较视网膜差，当眼球受到从前面来的外力的冲击作用通过玻璃体传到后极部时，坚硬的巩膜在其外面又有抵抗作用，使脉络膜在内外两种作用夹攻下而发生破裂和出血。脉络膜呈暗褐色，围绕视神经乳头部有照膜，为青绿色带金属光泽的三角形区。脉络膜是眼球中膜的后2/3处的薄膜，由纤维组织、小血管和毛细血管组成，软而薄，棕红色，在巩膜和视网膜之间，续连于睫状体后方。脉络膜的血循环营养视网膜外层，其含有的丰富色素起遮光暗房作用。主要功能是营养视网膜外层及玻璃体，并有遮光作用，使反射的物象清楚。同时对视觉系统起保护作用，对整个视觉神经有调节作用。续连于睫状体后方，含丰富的血管和色素细胞，有营养和遮光作用。

产品信息：

方法简介：实验室分离的兔脉络膜微血管内皮细胞采用胶原酶-中性蛋白酶混合消化法结合密度梯度离心法、最后通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的兔脉络膜微血管内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

产品名称：兔脉络膜微血管内皮细胞

英文简称：CMVECs,CMVECs

组织来源：脉络膜组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养信息：包被条件PLL（0.1mg/ml）或明胶（0.1%）

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：内皮细胞样

传代特性：可传2-3代

消化液：0.25%胰蛋白酶兔脉络膜微血管内皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
原代细胞接种：

细胞计数与密度调整

使用血球计数板或细胞计数仪准确计数，调整细胞密度至合适范围（不同细胞类型差异较大，一般为1×10⁵-1×10⁶cells/ml）

密度过低：细胞无法分泌足够的生长因子，难以存活；密度过高：细胞竞争营养物质，易出现接触抑制

培养基选择

优先使用原代细胞专用培养基，若使用通用培养基，需添加合适的生长因子、血清等补充成分（如成纤维细胞添加FGF，内皮细胞添加VEGF）

血清浓度：原代细胞培养血清浓度一般为10%-20%，部分特殊细胞（如神经细胞）需使用无血清培养基

培养环境控制

温度：哺乳动物细胞一般为37℃，鸟类细胞38.5℃，昆虫细胞27℃

CO₂浓度：大多数细胞需要5%CO₂，维持培养基pH在7.2-7.4之间

湿度：培养箱湿度保持在70%-80%，避免培养基蒸发过快
通用注意事项：

无菌操作：所有操作全程在超净台内进行，定期对超净台、培养箱进行消毒，使用无菌的培养基、血清、试剂

细胞状态监测：每天观察细胞形态、密度、颜色变化，记录生长情况，若发现细胞出现污染、形态异常、生长缓慢等问题，及时处理

培养基更换：原代细胞培养初期每2-3天更换一次培养基，传代后每1-2天更换一次，根据培养基颜色变化（变黄表示营养耗尽）灵活调整

避免过度操作：原代细胞较为脆弱，避免频繁吹打、离心，尽量减少对细胞的机械损伤

冻存备份：原代细胞分离成功后，及时冻存部分细胞作为备份，冻存液使用90%血清+10%DMSO，采用梯度降温法冻存

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