小鼠晶状体上皮细胞
产品信息:
产品名称 小鼠晶状体上皮细胞
组织来源 晶状体组织
种属 小鼠
产品规格 5×10^5Cells/T25
英文名称 | Mouse Lens Epithelial Cells | 规格 | 5×105 |
细胞形态 | 上皮细胞样 | 货号 | P-X1973 |
培养信息:
方法简介:实验室分离的小鼠晶状体上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:实验室分离的小鼠晶状体上皮细胞经BFSP2(晶状体蛋白)免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称:小鼠晶状体上皮细胞
英文简称:LECs
组织来源:晶状体组织
产品规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养信息:包被条件鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:上皮细胞样
传代特性:可传1-2代
消化液:0.25%胰蛋白酶小鼠晶状体上皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞简介 :
小鼠晶状体上皮细胞分离自晶状体组织;晶状体源自胚胎发育外胚层,仅含有上皮细胞及其产物,晶状体囊膜作为屏障将晶状体与其它类型细胞完全分开;因而,晶状体上皮细胞培养既无神经和血管组织的干扰,又不受其它类型细胞如成纤维细胞的污染,保证了培养中细胞成分的单一性。晶状体上皮细胞主要负责调节晶状体的生理平衡,包括电解质和液体的输送。在正常的发育过程中,晶状体上皮细胞分化和成熟,然后迁移到晶状体内部,产生晶体蛋白,自身也拉长而变成晶状体纤维细胞,并最终失去细胞核和其它的细胞器。研究表明,晶状体上皮细胞的分化和极化受到了眼部液体中的生长因子的调控,包括表皮生长因子和胰岛素等。细胞贴壁后为扁平不规则多角形,呈单层生长、连成膜状。晶状体上皮细胞是紧密贴附于晶状体前囊内表面的单层上皮细胞,其异常增殖和分化与白内障和后囊混浊的发生密切相关,体外培养是研究其生长规律的主要手段。
细胞消化与传代:
方法一:利多卡因消化法
吸出培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞1次
添加1ml 12mM利多卡因消化液,轻轻转动培养瓶使液体覆盖瓶底,37℃温浴3-5分钟
显微镜下观察到细胞回缩变圆后,加入5ml完全培养基稀释消化液
轻轻吹打混匀细胞,1200rpm离心5分钟,弃上清后用完全培养基重悬接种
方法二:胰酶消化法
若利多卡因消化效果不佳,可更换为0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液,重复上述操作,消化时间控制在1-2分钟
方法三:细胞刮取法
若细胞仍无法消化,加入3ml完全培养基终止消化,用无菌细胞刮轻轻刮取细胞(此方法易造成细胞机械损伤,不推荐)
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收货与处理流程:
1. 收货检查
收到细胞后首先观察T25培养瓶瓶身是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有异常及时联系。
2. 细胞复苏(仅针对冻存细胞)
将冻存管迅速放入37℃温水中摇晃融化,时间约1分钟
加入4-5ml完全培养基混匀,1000RPM常温离心4-5分钟
弃去上清液,补加1-2ml培养液吹匀,移入含5ml培养基的培养瓶中培养过夜,第二天换液并检查细胞密度
3. 新鲜细胞处理
用75%酒精消毒培养瓶瓶身,拆下封口膜
放入37℃、5%CO₂、饱和湿度的培养箱中静置3-4小时,稳定细胞状态后再进行后续操作