Alistipes senegalensis

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Alistipes senegalensis同样属于另枝菌属革兰氏阴性专性厌氧菌，最早分离自健康塞内加尔志愿者粪便。其菌落呈圆形、有色素，能水解色氨酸产生吲哚，可发酵甘露糖，对青霉素、阿莫西林加克拉维酸、亚胺培南和克林霉素敏感，但对甲硝唑耐药。该菌株在肠道健康中发挥积极作用，林下山参中性多糖可特异性富集它，提高宿主色氨酸代谢水平，激活吲哚-AhR信号轴，从而改善衰老小鼠生理功能，修复肠道屏障损伤、干细胞衰竭及全身炎症扩散，为开发基于植物多糖的抗衰治疗策略提供了依据。
培养基  特殊蛋白胨：23.0，可溶性淀粉：1.0，氯化钠：5.0，琼脂：10.0，脱纤维羊血：5%(50℃添加)，pH：7.3±0.2（25℃）

生长条件  37℃；3-7天；厌氧

存储条件  2-8℃

安全等级  2

形态  菌落直径为0.5-1mm，圆形，不透明，中间凸起，表面明亮，表面光滑，质地湿润，G－（红），杆菌，直或略微弯曲的棒状，末端为圆形，纯度：纯

分离基物  stool from a healthy 16-year-old male Senegalese volunteer patient

模式菌株  yes

操作步骤  ①将冻存管进行水浴（细菌37℃）溶解，快速振摇溶解；②使用酒精棉擦拭冻存管外壁消毒，随后转移至安全柜操作；③旋开管盖，将溶解液全部吸出，打入1-2个琼脂平板（每块平板约200μL，培养厌氧菌需将培养基提前置于厌氧环境中除氧24h）；④涂布均匀后转移至上述培养条件下培养。

共享方式  公益性共享

菌种保存:

低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素，所以，菌种保藏方法虽多，但都是根据这三个因素而设计的。

保藏方法大致可分为以下几种：

1．传代培养 保藏法

又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等（后者作保藏厌氧细菌 用），培养后于4—6℃冰箱内保存。

2．液体石蜡覆盖保藏法

是传代培养的变相方法，能够适当延长保藏时间，它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡，一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡，另一方面可阻止氧气进入，以减弱代谢作用。

3．载体保藏法

是将微生物吸附在适当的载体，如土壤、沙子、硅胶、滤纸上，而后进行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。

4．寄主保藏法

用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物，如病毒、立克次氏体、螺旋体等，它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代，此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。

5．冷冻保藏法

可分低温冰箱（-20—-30℃，-50—-80℃）、干冰酒精快速冻结（约-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法。

6．冷冻干燥保藏法

先使微生物在极低温度（-70℃左右）下快速冷冻，然后在减压下利用升华现象除去水分（真空干燥）。

有些方法如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液，以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害。保护性溶质可通过氢和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。保护剂有牛乳、血清、糖类、甘油、二甲亚砜等。

菌种活化与培养:

菌种活化

从冻存管或斜面培养基中取出菌种，接种至新鲜培养基中

在适宜条件下（如37°C，摇床培养）进行预培养，使菌种恢复活性。

扩大培养

将活化后的菌液按一定比例接种至新鲜培养基中。

控制培养条件（温度、转速、通气量等），确保菌体生长处于对数期。

菌液浓度测定

使用分光光度计测定OD600值，评估菌液浓度。

根据实验需求调整菌液浓度。

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