Lentibacillus populi

商品属性：

产品描述：

Lentibacillus populi是一种革兰氏阳性芽孢杆菌，属于芽孢杆菌科，最初从杨树的根际土壤中分离得到。该菌为嗜盐菌，可在高盐环境中生长，具有独特的渗透压调节机制，能合成或积累相容性溶质如甜菜碱、四氢嘧啶等维持细胞内渗透压平衡。它具有一定的降解有机物的能力，可参与土壤中有机物质的分解和循环，对土壤生态系统的物质循环和肥力维持有一定作用。同时，其特殊的生理特性使其可作为研究微生物适应高盐环境机制的材料。
培养基  蛋白胨：5.0，酵母膏：1.0，柠檬酸铁：0.1，溴化钾：0.08，NaCl：19.45，MgCl2：5.98，Na2SO4：3.24，CaCl2：1.8，KCl：0.55，Na2CO3：0.16，Na2NO3：0.0016，Na2HPO4：0.008，氯化锶：0.034，硼酸：0.022，硅酸钠：0.004，氟化钠：0.0024，琼脂：15.0，pH：7.4-7.8（25℃）

生长条件  30°C；24-48h；好氧

存储条件  2-8℃

安全等级  1

形态  菌落直径为0.5-1mm，圆形，边缘整齐，不透明，正面灰白色，中间凸起，表面灰暗，质地湿润，易挑起，G＋（蓝紫色），杆菌

分离基物  surface-sterilized stem tissue of a poplar tree

模式菌株  yes

操作步骤  ①准备1支含有5~10mL液体培养基的试管和2个平板；②安全柜中打开，用酒精灯灼烧顶部，后迅速滴上无菌水使之破裂，随后用镊子将其敲碎；③吸取0.5mL液体培养基打入冻干管，充分溶解后重新打回液体试管中，混匀；④吸取0.2mL菌悬液打入平板中，涂布均匀，重复两次获得两个平板；⑤将液体试管和平板全部置于上述培养条件下培养，菌种长出即可使用。

共享方式  公益性共享

准备工作：

环境与器材消毒：

在生物安全柜或超净工作台中操作。提前打开紫外灯照射30分钟。

准备75%酒精喷洒双手和工作台面。

准备所需器材：无菌接种环、酒精灯、无菌吸管、涂布棒、试管架、打火机等。

培养基准备：

根据菌种类型选择合适的培养基（如营养琼脂、血平板、LB培养基等）。

将培养基从冰箱取出，恢复至室温或进行预热。

个人防护：

穿戴实验服、手套、口罩。需在生物安全柜中操作并佩戴护目镜。

菌株复活步骤：

1. 冻干粉（安瓿管）复活

这是最稳定的保存形式，但菌体处于休眠状态，复活需谨慎。

表面消毒：用75%酒精棉擦拭冻干管外壁。

开启冻干管：

用砂轮在管身中部划一道痕。

将划痕处用酒精棉擦拭消毒。

手持两端轻轻掰断（或用镊子轻敲），注意防护玻璃碎渣。

溶解菌粉：

用无菌吸管吸取 0.3-0.5 mL 液体培养基（或无菌水）。

注入冻干管内，反复吸打使菌粉完全溶解成悬液。

接种：

关键原则：首次复活请勿分接多个平板，以免因接种量不足导致复苏失败。

涂布法：将全部菌悬液滴加到平板上，用无菌涂布棒涂布均匀。

划线法：用接种环蘸取菌悬液，在平板上进行分区划线。

培养：立即放入对应条件的培养箱中。

2. 冷冻甘油管（-80℃/-20℃）复活

解冻原则：避免反复冻融。

正确做法：从冰箱取出后，无需完全融化，直接用无菌接种环或枪头在表面刮取少量冰屑即可。

错误做法：将整管完全融化后再冷冻，会导致菌体死亡。

接种：将刮取的冰屑直接在平板上划线。

原管放回：操作完后迅速将冻存管放回低温冰箱。

3. 斜面/平板（4℃保存）复活

状态：菌种处于活性状态，可直接使用。

接种：用灼烧冷却后的接种环直接挑取单个菌落或菌苔。

注意：4℃保存的菌种需定期传代（一般每月一次），传代次数不宜过多（通常不超过6次），以防老化或变异。

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