埃氏巨球形菌

商品属性：

产品描述：

埃氏巨球形菌（Megasphaera elsdenii）是革兰氏阴性严格厌氧菌，是反刍动物瘤胃中的常见菌，也可在人类肠道中检出。该菌能代谢多种糖类，主要发酵产物为丁酸、丙酸、乙酸等短链脂肪酸，在瘤胃发酵和肠道微生态平衡中发挥作用。部分菌株具有益生潜力，可通过调节肠道代谢、抑制有害菌生长改善宿主健康，其高质量基因组草图已完成组装，为深入研究其功能提供了基础。
培养基  特殊蛋白胨：23.0，可溶性淀粉：1.0，氯化钠：5.0，琼脂：10.0，脱纤维羊血：5%(50℃添加)，pH：7.3±0.2（25℃）

生长条件  37℃；48-72h；厌氧

存储条件  2-8℃

安全等级  1

形态  圆形，边缘整齐，不透明，正面白色，中间凸起，表面光滑，表面明亮，质地湿润，易挑起，G－（红），球菌，纯度：纯

分离基物  rumen of sheep

模式菌株  yes

操作步骤  ①将冻存管进行水浴（霉菌30℃，细菌37℃）溶解，快速振摇溶解；②使用酒精棉擦拭冻存管外壁消毒，随后转移至安全柜操作；③旋开管盖，将溶解液全部吸出，打入1-2个琼脂平板（每块平板约200μL，培养厌氧菌需将培养基提前置于厌氧环境中除氧24h）；④涂布均匀后转移至上述培养条件下培养。

共享方式  公益性共享

准备工作：

环境与器材消毒：

在生物安全柜或超净工作台中操作。提前打开紫外灯照射30分钟。

准备75%酒精喷洒双手和工作台面。

准备所需器材：无菌接种环、酒精灯、无菌吸管、涂布棒、试管架、打火机等。

培养基准备：

根据菌种类型选择合适的培养基（如营养琼脂、血平板、LB培养基等）。

将培养基从冰箱取出，恢复至室温或进行预热。

个人防护：

穿戴实验服、手套、口罩。需在生物安全柜中操作并佩戴护目镜。

菌株复活步骤：

1. 冻干粉（安瓿管）复活

这是最稳定的保存形式，但菌体处于休眠状态，复活需谨慎。

表面消毒：用75%酒精棉擦拭冻干管外壁。

开启冻干管：

用砂轮在管身中部划一道痕。

将划痕处用酒精棉擦拭消毒。

手持两端轻轻掰断（或用镊子轻敲），注意防护玻璃碎渣。

溶解菌粉：

用无菌吸管吸取 0.3-0.5 mL 液体培养基（或无菌水）。

注入冻干管内，反复吸打使菌粉完全溶解成悬液。

接种：

关键原则：首次复活请勿分接多个平板，以免因接种量不足导致复苏失败。

涂布法：将全部菌悬液滴加到平板上，用无菌涂布棒涂布均匀。

划线法：用接种环蘸取菌悬液，在平板上进行分区划线。

培养：立即放入对应条件的培养箱中。

2. 冷冻甘油管（-80℃/-20℃）复活

解冻原则：避免反复冻融。

正确做法：从冰箱取出后，无需完全融化，直接用无菌接种环或枪头在表面刮取少量冰屑即可。

错误做法：将整管完全融化后再冷冻，会导致菌体死亡。

接种：将刮取的冰屑直接在平板上划线。

原管放回：操作完后迅速将冻存管放回低温冰箱。

3. 斜面/平板（4℃保存）复活

状态：菌种处于活性状态，可直接使用。

接种：用灼烧冷却后的接种环直接挑取单个菌落或菌苔。

注意：4℃保存的菌种需定期传代（一般每月一次），传代次数不宜过多（通常不超过6次），以防老化或变异。

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