Recombinant Human USP33

重组表达原理：

基因克隆?：从牛基因组中获取CST3基因的编码序列（对应氨基酸31–148），插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。

宿主表达?：将重组质粒转化至E. coli（如BL21菌株），在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高，适合大规模生产。

蛋白纯化?：利用His标签与镍柱亲和层析结合，实现高纯度（>95%）蛋白回收，再经透析或凝胶过滤去除杂质。

冻干保存?：加入海藻糖作为保护剂，冻干后可长期稳定储存，复溶后保持天然构象和生物活性。

产品概述：

作为去泛素化酶家族（DUBs）的重要成员，USP33在细胞内主要发挥去泛素化酶活性，通过移除底物蛋白上的泛素链来阻止其被蛋白酶体降解，从而稳定靶蛋白并调控多种生理过程。其核心功能涉及调控Slit-Robo信号通路——通过去泛素化并稳定Robo1受体，抑制结直肠癌细胞的迁移和上皮-间质转化（EMT），发挥抑癌作用；此外，USP33还能在DNA损伤应答中稳定p53蛋白，参与细胞周期调控和基因组稳定性维持。该重组蛋白广泛应用于肿瘤发生机制、DNA损伤修复及神经发育等领域的分子生物学研究和药物筛选。

产品名称; Recombinant Human USP33

别名; Deubiquitinating enzyme 33, EC 3 1 2 15, hVDU1, KIAA1097, MGC16868, OTTHUMP00000011234, OTTHUMP00000011330, OTTHUMP00000011331, pVHL interacting deubiquitinating enzyme 1, Ubiquitin carboxyl terminal hydrolase 33, Ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase 33, Ubiquitin specific peptidase 33, Ubiquitin specific processing protease 33, ubiquitin specific protease 33, Ubiquitin thioesterase 33

宿主; E.Coli

表达区间; 286-472

分子量; 41.9 kDa

标签; N-terminal His-IF2DI Tag

纯度; Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses

应用; Western Blot, ELISA

性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4

溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex

存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.

使用前准备：

离心处理?

冻干粉在运输过程中可能附着于管壁或管盖，开盖前应先进行离心，确保粉末沉降至管底。

建议条件：3000–3500 rpm 离心 5 分钟

若无高速离心机，可适当延长低速离心时间

平衡温度?

将冻干粉缓慢恢复至室温（避免加热加速溶解），防止因温差导致管内冷凝水影响蛋白稳定性

溶解（Reconstitution）

溶解液选择?

推荐使用无菌蒸馏水或 PBS（pH 7.4）进行复溶

若用于细胞实验，可选用含 0.1% BSA 的缓冲液以增强稳定性

配制浓度?

将冻干粉溶解至终浓度 ?0.1–1.0 mg/mL?，此范围适用于大多数实验场景

浓度过高可能导致蛋白聚集，过低则易失活

混匀方式?

使用移液枪头轻轻吹打数次，或上下轻柔颠倒混匀

严禁使用涡旋振荡器?，以免破坏蛋白空间结构，导致活性丧失

公司正在出售的产品：

安全提示：仅限研究使用，避免接触临床样本；操作时需佩戴防护装备。

质量控制：产品纯度通过SDS-PAGE验证，确保生物活性稳定；避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。

兼容性：适用于多种实验体系，但需优化浓度以避免非特异性结合。