Recombinant Human VPS25

重组蛋白（Recombinant Protein）：

是指利用重组DNA或RNA技术，在体外人工制造的蛋白质。

这项技术通过将编码特定目标蛋白的基因片段，插入到重组表达载体中，然后导入宿主细胞（如细菌、酵母、哺乳动物细胞等），

利用宿主细胞的“蛋白质工厂”来生产出大量的、具有特定生物学活性的蛋白质。

产品概述：

该蛋白是一种关键的膜 trafficking 调节因子，其核心生物学功能是识别并结合内体膜上的磷脂酰肌醇 3-磷酸（PI3P）以及泛素化的跨膜蛋白 cargo。作为 ESCRT 机器的重要组成部分，VPS25 通过其独特的“soluble”结构域招募下游的 ESCRT-III 复合体（如 CHMP 蛋白），从而驱动多泡体（MVB）的形成、病毒出芽、细胞质分裂以及细胞膜修复等过程。此外，研究表明 VPS25 在维持基因组稳定性及调控 TGF-β 和 Notch 等信号通路受体的降解中也扮演重要角色。重组人源

别名

Dermal papilla derived protein 9, Dermal papilla-derived protein 9, DERP9, EAP20, ELL associated protein of 20 kDa, ELL-associated protein of 20 kDa, ESCRT-II complex subunit VPS25, FAP20, HGNC:28122, hVps25, MGC10540, Vacuolar protein sorting 25 homolog (S. cerevisiae), Vacuolar protein sorting associated protein 25, Vacuolar protein-sorting-associated protein 25, VPS25, VPS25_HUMAN

宿主; E.Coli

表达区间; 1-176

分子量; 41.3 kDa

标签; N-terminal His-IF2DI Tag

纯度; Greater than 85% as determined by SDS-PAGE

应用; Western Blot, ELISA

性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4

溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex

存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.

 使用说明：

复溶方法?: 使用无菌蒸馏水或PBS缓冲液（pH 7.4）溶解冻干粉，轻轻混匀至完全溶解。

?应用建议?:

?实验用途?: 适用于Western Blot、ELISA等检测，作为抗原或标准品。

?浓度调整?: 根据实验需求稀释，避免高浓度导致非特异性结合。

?安全提示?: 操作时需佩戴手套和护目镜，遵循实验室生物安全规范。

重组表达原理：

基因克隆?：从牛基因组中获取CST3基因的编码序列（对应氨基酸31–148），插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。

?宿主表达?：将重组质粒转化至E. coli（如BL21菌株），在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高，适合大规模生产。

?蛋白纯化?：利用His标签与镍柱亲和层析结合，实现高纯度（>95%）蛋白回收，再经透析或凝胶过滤去除杂质。

?冻干保存?：加入海藻糖作为保护剂，冻干后可长期稳定储存，复溶后保持天然构象和生物活性。

公司正在出售的产品：

操作要点：

电泳条件?：使用15% SDS-PAGE凝胶，以提高对小分子量蛋白（~13.4 kDa）的分辨率。

?转膜参数?：采用湿转法，100 V、60–90分钟（4°C），使用PVDF膜（需甲醇预活化）。

?抗体选择?：

一抗：抗CST3多克隆抗体（如兔源抗体），推荐稀释比为1:1000。

二抗：HRP标记的山羊抗兔IgG，稀释比1:10,000。

?显色方式?：ECL化学发光法，预期条带位于?~13.4 kDa?处。

?内参建议?：由于CST3分子量较小，可选用GAPDH（~37 kDa）或β-actin（~42 kDa）作为内参，避免条带重叠。

存储条件：

冻干状态?: 存储于-20°C以下，可稳定保存长达12个月。

?复溶后?: 在2-8°C下可保存1个月，需保持无菌环境。

?注意事项?: 避免反复冻融，以防止蛋白降解或活性损失。