Recombinant Human VPS4B

重组蛋白生产流程：

通常包括以下几个核心步骤：

基因克隆：首先，科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列（目的基因）。

构建载体：将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中，这个载体就像是一个运输工具，

能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。

转入宿主：将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中，这个过程称为“转化”或“转染”。

表达与培养：宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养，其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息，开始大量生产目标蛋白。

纯化：通过一系列复杂的生物化学方法（如层析技术），将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来，以获得高纯度的产品。

产品概述：

该蛋白属于AAA+ ATP酶家族（ATPases Associated with diverse cellular Activities），是内体分选转运复合体（ESCRT）通路的关键执行元件。其核心功能是利用ATP水解产生的能量，介导ESCRT-III复合体的解聚与循环，从而参与多囊泡体形成、细胞质分裂、病毒出芽及膜修复等多种膜重塑过程。研究表明，VPS4B在抑制乙型肝炎病毒（HBV）复制中发挥重要作用，其显性负性突变体（如K180Q）能更有效地阻断病毒复制周期。此外，重组人VPS4B也是研究神经发育、

别名

8030489C12Rik, Cell migration inducing 1, Cell migration-inducing gene 1 protein, MGC116271, MIG1, Protein SKD1, Skd1, SKD1B, Suppressor of K(+) transport growth defect 1, Suppressor of K+ transport defect 1, Vacuolar protein sorting 4 homolog B, Vacuolar protein sorting 4 homolog B (S. cerevisiae), Vacuolar protein sorting 4b, Vacuolar protein sorting-associated protein 4B

宿主; E.Coli

表达区间; 1-444

分子量; 51.2 kDa

标签; N-terminal His Tag

纯度; Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses

应用; Western Blot, ELISA

性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4

溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex

存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.

操作要点：

电泳条件?：使用15% SDS-PAGE凝胶，以提高对小分子量蛋白（~13.4 kDa）的分辨率。

?转膜参数?：采用湿转法，100 V、60–90分钟（4°C），使用PVDF膜（需甲醇预活化）。

?抗体选择?：

一抗：抗CST3多克隆抗体（如兔源抗体），推荐稀释比为1:1000。

二抗：HRP标记的山羊抗兔IgG，稀释比1:10,000。

?显色方式?：ECL化学发光法，预期条带位于?~13.4 kDa?处。

?内参建议?：由于CST3分子量较小，可选用GAPDH（~37 kDa）或β-actin（~42 kDa）作为内参，避免条带重叠。

注意事项：

?安全提示?: 操作时需佩戴手套和护目镜，遵循实验室生物安全规范。

 安全提示：仅限研究使用，避免接触临床样本；操作时需佩戴防护装备。

质量控制：产品纯度通过SDS-PAGE验证，确保生物活性稳定；避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。

兼容性：适用于多种实验体系，但需优化浓度以避免非特异性结合。

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