广泛固氮氢自养单胞菌

产品名称：广泛固氮氢自养单胞菌

英文名：Azohydromonas lata

规格：冻干粉；斜面；平板

货号：PJZ1011

形态：菌落直径为0.5-1mm，圆形，边缘整齐，不透明，正面黄色，颜色较浅，中间凸起，表面光滑，易挑起，G－（红）

基本信息：

培养基  蛋白胨：0.5，酪蛋白水解物：0.5，酵母浸粉：0.5，可溶性淀粉：0.5，磷酸氢二钾：0.3，无水硫酸镁：0.024，丙酮酸钠：0.3，琼脂：15.0，葡萄糖：0.5，pH：7.2±0.2（25℃）

生长条件  30℃；24-48h；好氧

存储条件  2-8℃

安全等级  1

形态  菌落直径为0.5-1mm，圆形，边缘整齐，不透明，正面黄色，颜色较浅，中间凸起，表面光滑，易挑起，G－（红）

分离基物  Soil

模式菌株  no

操作步骤  ①准备上述平板2块；②安瓿管表面消毒后在安全柜中打开，用酒精灯灼烧顶部，后迅速滴上无菌水使之破裂，随后用镊子将其敲碎；③吸取0.5mL无菌水打入冻干管，充分溶解菌粉后，打入2块平板，200μL/个，涂布均匀；④将平板置于上述培养条件下培养，菌种长出即可使用。

共享方式  公益性共享

产品描述：

广泛固氮氢自养单胞菌（Azohydromonas lata）是氢自养单胞菌属的革兰氏阴性杆菌，具周生鞭毛，运动活泼，严格好氧，能利用氢气作为能源、二氧化碳作为碳源进行自养生长，同时具有固氮能力，将空气中的氮气转化为氨。广泛分布于土壤、水体及根际环境中，能分泌植物生长调节剂，促进植物生长，提高土壤肥力；可作为生物肥料接种剂，应用于农业生产，减少化肥使用，实现农业可持续发展，是研究氢代谢和生物固氮机制的重要菌株。

菌种活化流程：

1. 冻干菌种活化

超净台紫外消毒 30 min，75% 酒精擦拭菌种管外壁

无菌打开冻干管，加入0.5–1 mL 无菌液体培养基，轻轻吹打溶解，室温静置 15–20 min 复苏

取全部菌液，划线接种斜面或涂布 平板

30℃恒温培养 5–7 天，至长出灰色孢子菌落

2. 甘油管 / 斜面活化

甘油管冰上缓慢解冻；斜面直接无菌操作

无菌接种环挑取菌体 / 孢子，划线分离单菌落于平板

30℃培养 5–7 天，挑取典型单菌落转接斜面，作为工作种子

3. 孢子悬液制备（发酵用）

成熟斜面加入5–10 mL 无菌 0.85% 生理盐水，轻轻刮下孢子

用无菌脱脂棉 / 玻璃珠过滤，去除菌丝，制成孢子悬液（浓度 10⁶–10⁸ CFU/mL）

4℃短期保存，或用于接种发酵培养基

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菌种保存：

1. 短期保存

固体斜面/半固体：将生长良好的菌种置于 4℃ 冰箱。一般可保存数周至数月，需定期传代。

2. 长期保存

冷冻保存法（最常用）：

配制保护剂：常用 20-30% 无菌甘油。

收集菌体：刮取新鲜培养的菌苔或菌液，与保护剂混合，使菌悬液浓度达到较高密度。

分装：分装至无菌冻存管中（每管0.5-1 mL），拧紧盖子。

冷冻：置于 -80℃ 超低温冰箱或液氮中。

冻干保存法：需使用冷冻干燥机，适合长期保藏。