大鼠ENA-78/CXCL5elisa试剂盒

大鼠ENA-78/CXCL5elisa试剂盒

产品简介:

一、核心信息速览

检测目标

特异性定量大鼠血清、血浆、组织匀浆（如肺、肠黏膜）或细胞培养上清中的 CXCL5（ENA-78），一种关键趋化因子，通过CXCR2受体招募中性粒细胞，参与急性炎症、感染和肿瘤微环境调控。

检测原理

双抗体夹心ELISA：

预包被抗大鼠CXCL5抗体捕获目标蛋白 → 生物素标记二抗结合 → HRP-链霉亲和素-TMB显色系统（450nm读数）。

二、试剂盒核心组分

组分  规格与功能说明

预包被微孔板（96孔）  抗大鼠CXCL5单抗，批间CV＜10%

重组CXCL5标准品  0-1000 pg/mL（7梯度点）

生物素化检测抗体  靶向CXCL5 C端表位，避免与CXCL1/2交叉

高灵敏度显色系统  TMB底物，检测限低至5 pg/mL

专用样本保护液  含EDTA和蛋白酶抑制剂

三、技术优势与关键参数

灵敏度与线性范围

检测限：5 pg/mL（最低可测浓度）

线性范围：15.6-1000 pg/mL（覆盖炎症和肿瘤模型浓度）

特异性验证

不与大鼠IL-8、GROα/CXCL1等趋化因子交叉反应（需查看品牌验证数据）。

样本兼容性

适用样本类型：

体液：血清/血浆（肝素抗凝，避免反复冻融＞3次）

组织：肺、肠等需加裂解液匀浆后离心（12,000×g, 15min）

四、典型应用场景

呼吸系统疾病

急性肺损伤（ALI）或肺炎模型中CXCL5对中性粒细胞浸润的调控。

肿瘤研究

结直肠癌或肺癌中CXCL5促进血管生成的机制分析。

感染与免疫

细菌性腹膜炎时CXCL5的动态变化监测。

五、操作关键注意事项

样本处理

组织样本：建议使用含1% PMSF的RIPA裂解液，冰上操作防止降解。

细胞上清：离心去除碎片（300×g, 5min），-80℃分装保存。

实验优化

高浓度样本需按1:10-1:100稀释，确保OD值落在标准曲线中段。

每板设置复孔（n≥2），CV值应＜12%。

应用与服务

该试剂盒广泛应用于生物医学研究领域，如机制研究、疾病标志物检测等。部分厂家提供免费代测服务和专业技术支持，方便用户获得准确可靠的实验结果。

操作要点：

需严格遵守试剂盒说明书操作，建议做复孔及标准曲线。

洗涤过程至关重要，洗涤不充分会影响结果准确性。

所有试剂使用前需恢复至室温，避免批号混用。

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如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：

稀释线性实验 (Linearity)：

操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。

预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。

干扰实验 (Interference Test)：

操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。

预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。

回收实验 (Recovery Test)：

操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。

预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。

注意事项

试剂盒组分应按说明储存，使用前平衡至室温。

实验中需避免交叉污染，建议使用一次性吸头。

充分混匀对实验结果至关重要。

试剂盒仅供研究使用，不可用于临床诊断。

显色液需避光保存，终止液为2M硫酸，操作时需安全防护。