路邓葡萄球菌染料法荧光定量PCR试剂盒

检验原理

本试剂盒基于SYBR Green染料法实时荧光PCR技术，针对路邓葡萄球菌基因保守区域设计特异性引物，通过荧光信号实时监测核酸扩增过程，实现定性或定量检测。阳性样本在PCR过程中释放荧光信号，仪器通过Ct值判定结果。

试剂组成

2×qPCR MagicMix（预混液，含SYBR Green染料、dNTPs、Taq酶等）

荧光PCR专用模板稀释液

路邓葡萄球菌特异性引物混合物

阳性对照（1×10^8 拷贝/μL）

使用手册

样本要求

采集：按常规方法采集临床或环境样本（如拭子、体液等）。

保存与运输：-20℃保存，有效期1年；运输需使用泡沫箱加冰密封，避免反复冻融。阳性对照需单独存放，防止污染。

自备试剂：样本DNA提取试剂。

检测步骤

反应体系配制：按20μL体系混合模板DNA、引物、预混液及稀释液。

PCR程序：

预变性：92℃ 5分钟

扩增循环（30次）：94℃ 60秒 → 50℃ 60秒 → 72℃ 60秒

（参数可根据仪器型号优化）

上机检测：盖紧反应管，置于荧光定量PCR仪中运行程序。

结果判读

阴性对照：Ct值≥40。

阳性对照：典型扩增曲线，Ct值≤30。

待测样本：

Ct≤35：阳性；

Ct≥40：阴性；

35<Ct<40：需复测，复测Ct<40判为阳性。

注意事项

本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断。

操作需在无菌环境下进行，避免交叉污染。

试剂开封后需分装保存，避免反复冻融。

不同仪器需优化反应条件。

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