细胞简介：
人膀胱成纤维分离自膀胱组织；膀胱是一个储尿器官，在哺乳类动物，它是由平滑肌组成的一个囊形结构，位于骨盆内，其后端开口与尿道相通。膀胱与尿道的交界处有括约肌，可以控制尿液的排出。膀胱壁由三层组织组成，由内向外为黏膜层、肌层和外膜。肌层由平滑肌纤维构成，称为逼尿肌，逼尿肌收缩，可使膀胱内压升高，压迫尿液由尿道排出。在膀胱与尿道交界处有较厚的环形肌，形成尿道内括约肌。在括约肌收缩能关闭尿道内口，防止尿液自膀胱漏出。膀胱壁分为三层：即浆膜层（蜂窝脂肪组织）、肌肉层（逼尿肌、膀胱三角区肌）和黏膜层（极薄的一层移行上皮组织）。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的膀胱成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。膀胱成纤维细胞分泌的生长因子是一种具有多功能的促有丝分裂原，研究已表明其参与恶性肿瘤的形成过程。近年来，碱性成纤维细胞生长因子在膀胱癌发病过程中的作用、与生物学行为之间的关系以及治疗上的应用已受到重视。
产品名称 | 人膀胱成纤维细胞 | 组织来源 | 膀胱组织 |
英文名称 | Human Bladder Fibroblast cells | 产品规格 | 5×10^5Cells/T25 |
货号 | XG-X4543 | 生长特性 | 贴壁 |
产品信息:
产品名称 人膀胱成纤维细胞
组织来源 膀胱组织
默认种属 人
产品规格 5×10^5Cells/T25
方法简介 公司实验室分离的人膀胱成纤维采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的人膀胱成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
人膀胱成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞培养步骤：
1. 细胞复苏
运输与接收：细胞以液氮冻存形式运输，收到后立即用75%酒精喷洒消毒细胞瓶，置于超净台内无菌操作。
复苏操作：将细胞瓶放入37℃、5% CO培养箱中静置3-4小时稳定状态，显微镜下观察细胞形态和密度，记录初始状态（建议40x、100x、200x各拍一张照片）。
2. 细胞传代
传代时机：当细胞密度达80%汇合度时进行传代。
操作步骤：
弃去旧培养基，用无钙镁PBS润洗细胞1-2次。
加入0.25%胰蛋白酶消化液（1-2 mL），37℃孵育1-2分钟，显微镜下观察细胞变圆脱落。
加入5 mL完全培养基终止消化，轻轻吹打使细胞完全脱落。
离心（1000 RPM，5分钟），弃上清，用1-2 mL培养基重悬。
按1:2比例分瓶传代（如T25瓶分至两个T25瓶），补充新鲜培养基至5 mL。
换液频率：每2-3天换液一次。
3. 细胞冻存
冻存液：使用无血清冻存液。
冻存步骤：细胞传代后，用胰蛋白酶消化并离心，重悬于冻存液，缓慢降温至-80℃，最终转入液氮长期保存。
公司正在出售的产品：
小鼠颌下腺上皮细胞 Mouse Submandibular Gland Epithelial Cells | AF750标记的鞘氨醇激酶1抗体 |
sh-sy5y转染野生型人神经母细胞瘤细胞 | 细菌尿脱羧酶检测试剂盒 |
麦子纤维素酶解法定量检测试剂盒 | 植物氢/钾ATP酶（H＋/K＋－ATPase）活性比色法定量检测试剂盒 |
细胞GSK-3ALPHA蛋白表达荧光定量检测试剂盒 | 载玻片细胞BAD蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 |
糖果糖精（saccharin）含量高效液相色谱法定量检测试剂盒 | β链接素相互作用蛋白1抗体 |
中量真菌/酵母细胞基因组DNA纯化试剂盒 | KIAA0701蛋白抗体 |
甲状腺激素受体相互作用13/乳头瘤病毒16型E1结合蛋白抗体 | FAM149B1蛋白抗体 |
睾丸发育相关蛋白抗体 | 桔梗皂苷E237068-41-6 |
转录增强因子TEF4抗体 | 高辣椒碱II71240-51-2 |
同源盒蛋白C4抗体 | Isogarcinol71117-97-0 |
亮氨酸拉链抑癌蛋白2抗体 | 人膀胱成纤维细胞戈米辛G62956-48-3 |
组织肌酸激酶同工酶肌肉型（CK-MM）活性比色法定量检测试剂盒 | 兔外周血巨噬细胞 Rabbit Peripheral Blood Macrophage Cells |
动物糖蛋白刀豆蛋白A（ConA）树脂法纯化试剂盒 | MX-1细胞 |
产品注意事项：
无菌操作是生命线：所有操作必须在生物安全柜内严格无菌进行，使用专用试剂和耗材，防止交叉污染。
消化是关键步骤：
控制时间：使用胰蛋白酶或TrypLE Express消化时，严格控制在1-2分钟内。显微镜下观察到细胞变圆、边缘松动即可终止，避免过度消化导致细胞损伤。
消化液选择：部分供应商推荐使用0.25%胰蛋白酶，也有使用TrypLE Express或0.25% EDTA胰酶的，可根据实验室条件和细胞反应选择。
培养基与生长因子：
基础培养基：推荐使用专用培养基（如EGM-2 MV BulletKit）。若使用DMEM/F12等基础培养基，需补充10-20%胎牛血清（FBS）及抗生素（如青霉素/链霉素）。
生长因子：为促进生长，可添加VEGF、FGF等内皮细胞生长因子。传代后可尝试对比培养（一瓶用原装完全培养基，一瓶用自配培养基）。
细胞密度与传代：
最佳传代密度：建议在细胞汇合度达70%-80%时进行传代，避免过度生长导致细胞状态下降。
生长不均处理：若细胞生长不均，成岛状分布，可将细胞消化后重新打散，加入新鲜培养基培养]^。
污染监测与处理：
定期检查：定期观察细胞有无支原体、细菌等污染迹象。
污染处理：若发现污染，需根据污染程度决定。轻度污染可尝试用含高浓度抗生素的培养液反复清洗，但严重污染时建议弃置细胞。
