鼠疫耶尔森菌 plagene探针法荧光定量PCR试剂盒

鼠疫耶尔森菌 plagene探针法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本产品是基于探针法荧光定量PCR技术开发的专门用于检测鼠疫耶尔森菌(Yersinia pestis)的试剂盒。鼠疫耶尔森菌又称鼠疫杆菌，是引起鼠疫的病原体，属于我国法定的甲类传染病病原体，具有高度传染性和致病性。

产品特点

即开即用型：用户只需提供待测DNA模板即可进行检测

高灵敏度：引物和探针经过优化设计，检测灵敏度显著提高

特异性强：针对鼠疫耶尔森菌高度保守基因区域设计，避免与其他病原体交叉反应

质量控制：提供阳性对照，便于区分假阴性结果

双重应用：既可用于定性检测，也可用于定量分析，定量线性范围达5个数量级

稳定保存：-20℃条件下可保存一年

产品规格

产品规格：50次反应（20μL体系/次）

保存条件：-20℃避光保存

有效期：12个月

试剂盒组分

2×Probe qPCR预混液

荧光PCR专用模板稀释液

鼠疫耶尔森菌特异性qPCR引物混合液

鼠疫耶尔森菌特异性qPCR探针

阳性对照(1×10⁸拷贝/μL)

实验操作流程

样本DNA制备

使用常规DNA提取方法纯化样品DNA

建议设置样品制备阳性对照和阴性对照

标准曲线制备（定量检测时需进行）

标记6个离心管(7-2号)

每管加入45μL稀释液

从高浓度到低浓度进行10倍系列稀释，获得6个梯度浓度的标准品

所有操作需在独立区域进行，避免交叉污染

反应体系配制（20μL体系）

| 成分 | 体积 |

|------|------|

| 2×Probe qPCR预混液 | 10μL |

| 引物混合液 | 2μL |

| 探针 | 0.5μL |

| 模板DNA | 2μL |

| 无核酸酶水 | 补至20μL |

PCR扩增程序

预变性：95℃ 5分钟

扩增循环(40个循环)：

95℃ 15秒

60℃ 1分钟（采集荧光信号）

数据分析

结果判读

定量分析

以标准品浓度的对数值为横坐标，Ct值为纵坐标绘制标准曲线

根据样品Ct值计算待测DNA浓度

定性分析

阳性对照：Ct值<30，有明显指数增长曲线

阴性对照：Ct值>40或无Ct值

样品判定：

Ct值<38：阳性

Ct值>40：阴性

38≤Ct值≤40：建议复检

注意事项

本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断

操作时需严格分区，避免污染

阳性对照需单独存放，防止污染其他组分

建议在专业实验室由受过培训的人员操作

不同仪器可能需要优化反应条件

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