嗜酸乳杆菌NCFM探针法荧光定量PCR试剂盒

嗜酸乳杆菌NCFM探针法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

预期用途

用于嗜酸乳杆菌NCFM核酸的定性或定量检测，适用于科研用途，不适用于临床诊断。检测结果需结合其他方法综合分析。

检验原理

基于TaqMan探针法实时荧光PCR技术，针对嗜酸乳杆菌NCFM基因保守区域设计特异性引物及探针。通过荧光信号实时监测扩增过程，实现高灵敏（最低检测限1.0×10³ copies/mL）和高特异性检测。

试剂组分

| 组分名称 | 规格 |

| 嗜酸乳杆菌NCFM反应液 | 975μL ×1管 |

| 嗜酸乳杆菌NCFM扩增液 | 25μL ×1管 |

| 阳性质控品（DNA片段） | 50μL ×1管 |

| 阴性质控品 | 50μL ×1管 |

| 说明书 | 1份 |

注意：不同批号组分不可混用，避免反复冻融（≤7次）。

储存与运输

储存条件：-20℃±5℃避光保存，有效期12个月。

运输：低温冰袋（2~8℃），严禁冻融。

适用仪器

兼容ABI、Bio-Rad、LightCycler、Eppendorf等主流荧光定量PCR仪。

样本要求

样本类型：全血、粪便、拭子、培养物等。

处理要求：

短期保存于-20℃，长期保存需-70℃（≤6个月）。

避免交叉污染，推荐使用商品化核酸提取试剂盒（如Hypure病毒基因组DNA提取试剂盒）。

操作步骤

样本DNA提取：按标准方法提取，建议使用带滤芯吸头。

试剂配制：

解冻后混匀离心，按N（样本数+2）配制反应体系（19.5μL反应液+0.5μL扩增液/反应）。

加样：每管加入5μL模板DNA或质控品。

PCR扩增：

循环参数：95℃ 3min预变性；40循环（95℃ 15s→55℃ 30s）。

荧光通道：FAM检测，无淬灭通道。

结果分析

阳性：Ct≤35.0且扩增曲线典型。

可疑：35.0<Ct≤38.0需复测。

阴性：无Ct值或非典型曲线。

质控要求：阴性对照无Ct值，阳性对照Ct≤30。

性能指标

阴阳性符合率：100%（5份阳性/10份阴性）。

精密度：批内/批间CV≤3%。

局限性

结果受样本质量、提取效率、运输条件及病原体变异影响。

污染可能导致假阳性，试剂失效或操作不当可致假阴性。

注意事项

分区操作（试剂准备区、样本处理区、扩增区），避免气溶胶污染。

使用无DNA/RNA酶耗材（离心管、吸头等）。

反应液避光保存，分装时避免气泡。

公司正在出售的产品