BAR基因核酸检测试剂盒（恒温荧光法）

产品介绍：

检测原理与目的

检测原理：试剂盒基于恒温荧光扩增技术（如LAMP、RPA等），在恒定的温度下（通常为60-65℃）对目标核酸进行扩增。反应体系中包含特异性引物和荧光染料，扩增过程中产生的副产物会与染料结合并发出荧光。仪器实时监测荧光信号的变化，并根据预设的阈值自动判读结果。

核心目的：用于快速、高灵敏度地定性检测样本中是否存在BAR基因。广泛应用于转基因作物鉴定、食品安全监测（如检测食品或饲料中的转基因成分）以及相关科研领域。

�� 产品核心参数与组成

根据相关产品信息，该试剂盒通常包含以下配置：

项目  详细信息

检测方法  恒温荧光法 (如LAMP)

检测靶标  BAR基因 (Phosphinothricin Acetyltransferase)

产品规格  48T (即48次测试)

检测限  最低检测限可达 1×10³ copies/mL (或100-500拷贝/mL)

主要组分  PCR反应液 (含引物、dNTPs、缓冲液等)、酶液 (含Bst DNA聚合酶等)、

阳性质控品 (含BAR基因的标准品)、阴性质控品 (无菌水或不含靶基因的缓冲液)

��️ 操作流程

该试剂盒的操作流程简化，无需热循环，主要步骤如下：

样本处理：提取待测样本（如植物叶片、食品、饲料等）的基因组DNA。

试剂准备：将试剂盒中的PCR反应液和酶液按说明书比例混合，配制成预混液。

加样：取一定量的DNA模板（如5μL）加入到反应管中，同时设置阳性和阴性对照。

恒温扩增：将反应体系放入恒温荧光检测仪中，在 63℃ (具体温度依说明书而定) 条件下反应 60分钟。

结果判读：仪器自动根据荧光扩增曲线和Ct值（循环阈值）判断结果。

�� 结果判读标准

结果判读主要依据荧光扩增曲线和Ct值：

结果类型  判读标准  解释

阳性 (+)  出现明显的“S”型荧光扩增曲线，且 Ct值 < 38 (阈值依说明书而定)。  样品中检测到BAR基因，判定为转基因阳性。

阴性 (-)  无Ct值，或Ct值 ≥ 38，且无典型扩增曲线。  样品中未检测到BAR基因，判定为阴性。

无效  阳性对照未出现扩增曲线，或阴性对照出现扩增曲线。  实验结果无效，可能存在试剂失效或污染问题，需重新检测。

⚠️ 注意事项

防止污染：由于该方法灵敏度极高，极易受气溶胶污染影响，建议在独立的洁净区域进行操作，并使用带滤芯的枪头。

核酸质量：样本的DNA提取质量直接影响检测结果，应避免抑制剂残留。

仪器兼容性：适用于各类恒温荧光检测仪（如Genie系列、ESE Tube Scanner等），部分荧光定量PCR仪也可通过调整程序使用。

对照设置：每次检测必须严格设置阳性和阴性对照，以确保实验结果的准确性和可靠性。

核心优势与技术要点：

高特异性

引物设计基于目标基因保守区域，可区分高度同源序列（如病毒变异株）。

高灵敏度

检测限低至10拷贝/反应，适用于微量样本。

高效扩增

热启动酶（如HotStarTaq）减少非特异性扩增，30分钟内完成40个循环。

防污染设计

UNG酶系统降解残留产物，避免交叉污染。

稳定性提升

冻干预混技术实现常温运输，操作便捷。

公司正在出售的产品：

防污染操作

需在试剂准备区、样本处理区、扩增区独立操作，使用带滤芯吸头及专用实验服。

阳性对照管理

浓度高达1×10⁸拷贝/μL，需单独存放并避免污染其他试剂。

局限性

仅限科研使用，不可用于临床诊断；

环境样本中可能存在PCR抑制剂，需设置内参对照。