人淋巴结成纤维细胞
产品信息：
产品名称 人淋巴结成纤维细胞
组织来源 淋巴组织
种属 人
产品规格 5×10^5Cells/T25
英文名称 | Human Lymph Node Fibroblast Cells | 规格 | 5×105 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 | 货号 | P-X1463 |
培养信息：
方法简介：实验室分离的人淋巴结成纤维细胞采用混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测：实验室分离的人淋巴结成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称：人淋巴结成纤维细胞
组织来源：淋巴组织
产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养信息：包被条件
培养基基础培养基，含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：成纤维细胞样
传代特性：可传3-5代左右；3代以内状态最佳
消化液：0.25%胰蛋白酶人淋巴结成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞简介 ：
人淋巴结成纤维细胞分离自淋巴组织；淋巴结是呈椭圆形或蚕豆形的淋巴组织小体，大小不一，新鲜时呈灰红色。穿插于淋巴管的行程中，并与淋巴管相通连。淋巴结主要由淋巴组织和淋巴窦组成，外面包以致密结缔组织被膜，被膜向淋巴结内伸入，形成许多间隔或小梁，构成淋巴结的网状支架，并把淋巴结实质分隔成许多部分。这些结缔组织由成纤维细胞构成，对淋巴管起到保护和支持作用。刚分离的成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。
原代细胞分离：
组织样本处理：取材后立即置于预冷的含抗生素的PBS或组织保存液中，避免样本干燥和温度变化；修剪时去除坏死、结缔组织等杂质，尽量减小组织块体积以提高消化效率。
消化方法选择：
酶消化法：根据组织类型选对应酶（如胰蛋白酶用于上皮类组织、胶原酶用于结缔组织丰富的组织），严格控制消化温度（通常37℃）和时间，每隔5-10分钟镜下观察，避免过度消化损伤细胞。
机械分离法：适合柔软组织（如脑、肝脏），通过剪碎、吹打、过滤等方式分散细胞，操作时动作轻柔，减少细胞机械损伤。
细胞过滤与离心：用合适孔径的细胞筛（如100-200目）过滤细胞悬液，去除未消化的组织块；离心转速通常为1000-1500rpm，时间5-10分钟，避免高速离心导致细胞破裂。
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细胞消化与传代：
方法一：利多卡因消化法
吸出培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞1次
添加1ml 12mM利多卡因消化液，轻轻转动培养瓶使液体覆盖瓶底，37℃温浴3-5分钟
显微镜下观察到细胞回缩变圆后，加入5ml完全培养基稀释消化液
轻轻吹打混匀细胞，1200rpm离心5分钟，弃上清后用完全培养基重悬接种
方法二：胰酶消化法
若利多卡因消化效果不佳，可更换为0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液，重复上述操作，消化时间控制在1-2分钟
方法三：细胞刮取法
若细胞仍无法消化，加入3ml完全培养基终止消化，用无菌细胞刮轻轻刮取细胞（此方法易造成细胞机械损伤，不推荐）
