大鼠肾小球内皮细胞

细胞简介：

大鼠肾小球内皮细胞分离自肾组织；肾脏是机体的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除体内代谢产物及某些废物、毒物，同时经重吸收功能保留水份及其他有用物质，如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、碳酸氢钠等，以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有内分泌功能，生成肾素、促红细胞生成素、活性维生素D3、前列腺素、激肽等，又为机体部分内分泌激素的降解场所和肾外激素的靶器官。肾脏的这些功能，保证了机体内环境的稳定，使新陈代谢得以正常进行。肾小球是肾元中的用于将血液过滤生成原尿的一团毛细血丛，被鲍氏囊所包裹，是尿液形成的重要构造。血液经由入球小动脉进入肾小球。肾小球内的微血管不像其他微血管，汇流入静脉，而是流入出球小动脉。在肾小球内，微血管受到高压，而加速了超滤作用(hyperfiltration)的进行。微血管中的血液经由超滤作用之后，形成滤液，渗入鲍氏囊内。肾小球与鲍氏囊合称为肾小体，肾小球的过滤速率便称为肾小球过滤率。肾小球内皮细胞是一类特殊微血管类型的细胞。细胞为圆形、多角形，单层贴壁生长；细胞质丰富，细胞核为圆形或卵圆形。肾小球内皮细胞被覆于肾小球毛细血管壁腔侧，与血流直接接触，是肾小球滤过膜的第一道屏障，可粘附细菌和白细胞，修复基底膜，并有抗凝、抗血栓的作用；所以，体外培养的肾小球内皮细胞在免疫学和病理生理学领域中具有重要的研究价值。

产品信息：

方法简介：实验室分离的大鼠肾小球内皮细胞采用先机械研磨过不锈钢网筛分离得到肾小球、后用胶原酶消化，结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的大鼠肾小球内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

产品名称：大鼠肾小球内皮细胞

组织来源：肾组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养信息：包被条件PLL（0.1mg/ml）或明胶（0.1%）

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：内皮细胞样

传代特性：可传2-3代

消化液：0.25%胰蛋白酶大鼠肾小球内皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
原代细胞实验要点：

一、取材与分离

新鲜、无菌：组织离体越快越好，全程冰上操作。

去除杂质：剔除脂肪、结缔组织、血污，减少污染和消化干扰。

温和消化：

控制酶浓度、温度、时间

及时终止消化，避免细胞过度损伤

过筛过滤：去除组织块，获得单细胞悬液。

二、接种与培养

密度关键：原代细胞普遍怕稀，密度太低不贴壁、不长。

完全贴壁后再换液：刚接种别乱动。

专用培养基：

内皮、上皮、平滑肌、神经元等尽量用专用原代培养基

血清质量影响极大，建议批次验证

CO₂、湿度、温度严格稳定，避免频繁开关门。

三、传代与冻存

不要等太满：汇合度 70%–80% 就传，不要等到堆积。

消化监控：镜下观察细胞变圆、间隙变大立即终止。

冻存保护：

标准：90% 血清 + 10% DMSO

程序降温，尽快转入液氮

原代细胞冻存复苏能力弱，尽量早冻、多冻。

四、污染与状态判断

一旦浑浊、pH 骤变、有颗粒：直接丢弃，不要救。

细胞状态好：

形态均一、轮廓清晰

生长均匀、无局部堆积

出现分化、拉长、多核、空泡多：说明老化 / 状态差，不建议继续实验。
冻存复苏：

冻存的梯度降温：

逐步降温：细胞冻存时，先在4℃放置30分钟，再在-20℃放置1小时，随后转移至-80℃冰箱过夜，最后放入液氮长期保存，避免温度骤变导致细胞内冰晶形成。

标记清晰：冻存管上需标记细胞名称、代次、冻存日期和操作者姓名，避免后续复苏时混淆。

复苏的快速操作：

解冻后立即离心：细胞解冻后迅速转移至含预热培养基的离心管中，离心去除含DMSO的冻存液，减少DMSO对细胞的毒性。

复苏后静置培养：复苏后的细胞接种后，24小时内不要换液，让细胞有足够的时间恢复状态，24小时后再更换新鲜培养基。

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