可可毛色二孢菌

商品属性：

产品描述：

可可毛色二孢菌（Lasiodiplodia theobromae），又称可可球二孢，是毛色二孢属的丝状真菌，属于半知菌亚门。是重要的植物病原菌，可引起多种植物的茎腐病、果腐病等，如可可茎腐病、芒果果腐病等，导致植物组织坏死和腐烂，影响作物产量和品质。病菌以菌丝体和分生孢子在病残体中越冬，通过雨水和昆虫传播，在高温高湿环境下易流行，防治需采取选用抗病品种、及时清除病残体、喷洒杀菌剂等综合措施。
培养基  马铃薯浸粉：10.0，葡萄糖：20.0，KH2PO4：3.0，MgSO4·7H2O：1.5，硫胺素：0.008，琼脂：15.0，pH：6.0±0.2（25℃）

生长条件  28℃；3-5天；好氧

存储条件  2-8℃

安全等级  1

形态  迁徙生长，丝状，正面灰白色，浅色，纯度：纯

分离基物  玉蕊根

模式菌株  no

操作步骤  ①准备1支含有5~10mL液体培养基的试管和2个平板；②安全柜中打开，用酒精灯灼烧顶部，后迅速滴上无菌水使之破裂，随后用镊子将其敲碎；③吸取0.5mL液体培养基打入冻干管，充分溶解后重新打回液体试管中，混匀；④吸取0.2mL菌悬液打入平板中，涂布均匀，重复两次获得两个平板；⑤将液体试管和平板全部置于上述培养条件下培养，菌种长出即可使用。

应用领域  药用植物内生菌

共享方式  公益性共享

接种与培养：

1. 接种方法

液体培养基：将菌悬液或菌苔接种至液体试管中，倾斜试管轻轻晃动使菌液混匀。

固体平板：

涂布法：吸取 100-200 μL 菌液滴在平板表面，用无菌涂布棒涂布均匀。

划线法：用接种环蘸取菌液，在平板表面进行分区划线，以获得单菌落。

2. 培养条件

好氧菌：直接放入普通恒温培养箱。

兼性厌氧菌：可放入普通培养箱，或根据需要放入厌氧环境。

严格厌氧菌：必须立即放入厌氧罐/厌氧工作站，并放入厌氧产气包和指示剂。

温度与时间：通常为 37℃，培养 18-72小时（视菌种生长速度而定）。

菌种开启与复苏流程:

1. 提前准备（10分钟搞定）

把冻存管从液氮/超低温冰箱拿出，直接放进37℃水浴锅，手捏住管身轻轻晃动，1分钟内让冰块完全融化

同时准备好装有5ml液体培养基的无菌试管，不用提前预热

2. 快速接种（全程无菌操作）

用移液枪吸取融化后的菌液0.2ml，直接打进准备好的液体培养基试管里

拧紧试管盖，轻轻颠倒混匀3次

3. 复苏培养

把试管放进37℃摇床，设置转速180rpm，培养8-12小时即可观察菌液浑浊度，判断是否复苏成功

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