HUVEC+GFP人脐静脉内皮永生化+GFP细胞专用培养基 新品

HUVEC+GFP人脐静脉内皮永生化+GFP细胞专用培养基

商品属性：

产品介绍：

HUVEC-GFP细胞专用培养基由团队精心优化，经过长期测试，本产品可保持HUVEC-GFP细胞最佳的生长状态。

本产品中已包含HUVEC-GFP细胞生长所需的各种成分，无需添加任何成分，可直接用于HUVEC-GFP细胞的培养。

产品主要成分

内皮细胞培养体系     465 ml

胎牛血清（FBS）         25 ml

内皮细胞培养添加剂      5 ml

双抗（青霉素/链霉素，P/S）          5 ml

运输和保存

运输：放置于含有生物冰袋的保温箱中低温运输

保存方法：2℃～8℃，避光，保存1个月；-20℃，避光，保存3个月。
质量控制

实验原理：

以EGM-2培养基为基础，添加10%优质胎牛血清和1%抗生素，模拟人脐静脉内皮永生化细胞的生长环境，为HUVEC+GFP细胞提供充足的营养物质和能量，支持细胞的贴壁生长和增殖，同时添加的GFP标记基因可用于细胞的示踪和功能研究，用于血管疾病的研究和药物筛选。
培养基配制：

按产品说明书比例，将基础培养基、胎牛血清、生长添加剂、双抗等成分依次加入无菌容器，轻轻摇晃混合均匀

用0.22μm孔径无菌滤膜对混合培养基进行过滤除菌，转移至无菌培养基瓶，标注配置日期和有效期

配制好的培养基2-8℃避光保存，1个月内使用完毕，避免反复冻融

废弃处理：

未使用培养基：密封后高压灭菌（121℃，20min），按实验室废液处理。

用过的培养基：含细胞碎片或污染物，高压灭菌后丢弃，避免生物污染。
细胞培养步骤：

1. 细胞复苏

冻存管37℃水浴1-2min解冻，转移至超净台消毒，将细胞悬液加入含4ml培养基的离心管。

1000rpm离心3min弃上清，加1-2ml培养基重悬，接种至培养瓶，补液至6-8ml，37℃、5%CO₂培养箱培养过夜，次日换液观察。

2. 细胞传代

细胞密度达80%-90%时，弃旧培养基，用PBS润洗1-2次。

加1ml消化液浸润细胞，37℃消化1-3min，细胞变圆脱落时加2-3ml培养基终止消化，吹打形成单细胞悬液。

1000rpm离心5min弃上清，加1-2ml培养基重悬，按1:2比例接种至新培养瓶，补液至8ml，培养箱培养。

3. 细胞冻存

弃旧培养基，PBS润洗1次，加1ml消化液消化，细胞脱落后加培养基终止，吹打形成悬液转移至离心管。

1000rpm离心5min弃上清，PBS清洗1次，离心后弃液。

加无血清冻存液调整细胞密度至5×10⁶～1×10⁷/ml，分装至冻存管。

程序降温盒中-80℃冷冻24h后，转移至液氮罐长期储存。
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