MET-5A人膜间皮细胞专用培养基 新品

产品介绍：

MET-5A细胞专用培养基由团队精心优化，经过长期测试，本产品可保持MET-5A细胞最佳的生长状态。

本产品中已包含 MET-5A细胞生长所需的各种成分，无需添加任何成分，可直接用于MET-5A 细胞的培养。

产品主要成分

M199 基础培养基      430 ml

特级胎牛血清       50 ml

P/S青霉素-链霉素    5 ml

ITS（胰岛素+转铁蛋白+硒）     5ml

HEPES 1M Buffer solution          (20 mM) 10 ml

NaHCO3       1.5g/L

氢化可的松     400 nM

重组人表皮生长因子EGF               3.3 nM

运输和保存

运输：放置于含有生物冰袋的保温箱中低温运输

保存方法：2℃～8℃，避光，保存ᥓ惼ᥓ
质量控制

实验原理：

以RPMI-1640培养基为基础，添加10%优质胎牛血清和1%抗生素，模拟人膜间皮细胞的生长环境，为MET-5A细胞提供充足的营养物质和能量，支持细胞的贴壁生长和增殖，维持细胞的间皮细胞特性，用于间皮瘤的研究和药物筛选。

培养基配置步骤：

1. 配置前准备

试剂与耗材：MEM培养基粉末（或液体）、优质胎牛血清、青霉素-链霉素混合液、5-溴-2'-脱氧尿苷（可选）、无菌超纯水、0.22μm无菌滤膜、无菌血清瓶、移液枪、无菌移液管等

无菌环境：超净工作台提前开启紫外灯照射30分钟消毒，实验人员佩戴无菌手套、口罩，操作前用75%酒精擦拭双手和工作台

2. 基础培养基配置（以粉末MEM为例）

按照MEM培养基说明书的比例，将适量培养基粉末加入到装有900ml无菌超纯水的无菌烧杯中

用磁力搅拌器充分搅拌，直至培养基粉末完全溶解

加入适量碳酸氢钠粉末（根据说明书调整），调节培养基pH值至7.2-7.4

将溶液通过0.22μm无菌滤膜过滤除菌，转移至无菌血清瓶中，标注“MEM基础培养基”及配置日期

3. 完全培养基配置

在无菌条件下，向MEM基础培养基中加入100ml优质胎牛血清（使血清终浓度为10%）

加入10ml青霉素-链霉素混合液（使双抗终浓度为1%）

若需要筛选TK-细胞，加入5-溴-2'-脱氧尿苷，使其终浓度为0.015mg/ml

轻轻摇晃血清瓶，使各成分充分混合，标注培养基名称及配置日期

4℃避光保存，使用前提前放置至室温

4. 培养基质量检测

配置完成后，取少量培养基接种于无菌培养瓶中，37℃、5%CO₂培养箱中培养24-48小时

观察培养基是否浑浊、有无菌落生长，确认无菌后方可用于细胞培养

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注意事项：

所有操作严格遵循无菌规范，避免细胞交叉污染，每次操作仅处理一株细胞

培养基开封后尽快使用，避免长时间暴露于室温，未用完部分2-8℃避光保存

细胞培养过程中，定期显微镜观察细胞状态，及时更换培养基或传代，一般2-3天更换一次培养基

实验产生的废弃培养基、细胞悬液等生物废弃物，按规定进行消毒处理后再排放

若使用预配置完全培养基，无需额外添加血清、双抗等成分，直接使用即可