人原代髓核细胞永生化细胞专用培养基 新品

人原代髓核细胞永生化细胞专用培养基

商品属性：

产品介绍：

人原代髓核细胞永生化细胞专用培养基由团队精心优化，经过长期测试，本产品可保持人原代髓核细胞永生化细胞 最佳的生长状态。

本产品中已包含人原代髓核细胞永生化 细胞生长所需的各种成分，无需添加任何成分，可直接用于人原代髓核细胞永生化细胞的培养。

软骨细胞培养体系    500 ml

产品主要成分

软骨细胞基础培养基          440 ml

软骨细胞培养添加剂       5 ml

特级胎牛血清    50 ml

P/S青霉素-链霉素         5 ml

运输和保存

运输：放置于含有生物冰袋的保温箱中低温运输

保存方法：    2℃～8℃，避光，保存2个月；-20℃，避光，保存6个月。
质量控制

实验原理：

以DMEM高糖培养基为基础，添加10%优质胎牛血清、1%双抗、50μg/mL抗坏血酸及10ng/mL转化生长因子-β（TGF-β），模拟人原代髓核永生化细胞的椎间盘微环境。培养基中的成分可促进细胞增殖并维持其髓核细胞特性（如Ⅱ型胶原、蛋白多糖合成），用于椎间盘退变（如腰椎间盘突出症）的研究及药物筛选。
培养基配制：

按产品说明书比例，将基础培养基、胎牛血清、生长添加剂、双抗等成分依次加入无菌容器，轻轻摇晃混合均匀

用0.22μm孔径无菌滤膜对混合培养基进行过滤除菌，转移至无菌培养基瓶，标注配置日期和有效期

配制好的培养基2-8℃避光保存，1个月内使用完毕，避免反复冻融

废弃处理：

未使用培养基：密封后高压灭菌（121℃，20min），按实验室废液处理。

用过的培养基：含细胞碎片或污染物，高压灭菌后丢弃，避免生物污染。
细胞培养步骤：

1. 细胞复苏

冻存管37℃水浴1-2min解冻，转移至超净台消毒，将细胞悬液加入含4ml培养基的离心管。

1000rpm离心3min弃上清，加1-2ml培养基重悬，接种至培养瓶，补液至6-8ml，37℃、5%CO₂培养箱培养过夜，次日换液观察。

2. 细胞传代

细胞密度达80%-90%时，弃旧培养基，用PBS润洗1-2次。

加1ml消化液浸润细胞，37℃消化1-3min，细胞变圆脱落时加2-3ml培养基终止消化，吹打形成单细胞悬液。

1000rpm离心5min弃上清，加1-2ml培养基重悬，按1:2比例接种至新培养瓶，补液至8ml，培养箱培养。

3. 细胞冻存

弃旧培养基，PBS润洗1次，加1ml消化液消化，细胞脱落后加培养基终止，吹打形成悬液转移至离心管。

1000rpm离心5min弃上清，PBS清洗1次，离心后弃液。

加无血清冻存液调整细胞密度至5×10⁶～1×10⁷/ml，分装至冻存管。

程序降温盒中-80℃冷冻24h后，转移至液氮罐长期储存。
公司正在出售的产品：