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Golden MLV Reverse Transcriptase(200U/ul) 新品

936 20KU 起订
上海 更新日期:2026-04-23

上海博湖生物科技有限公司

VIP1年
联系人:博湖生物
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手机:18930344717 拨打
邮箱:3004987436@qq.com

产品详情:

中文名称:
Golden MLV Reverse Transcriptase(200U/ul)
品牌:
派瑞曼
产地:
国产
保存条件:
2-8℃冷藏
产品类别:
PCR相关试剂 PCR相关
检测方法:
PCR
种属反应性:
说明书
货号:
P-PR1284
规格:
20KU

基本信息

产品名称

Golden MLV Reverse Transcriptase(200U/ul)

货号

P-PR1284

规格

20KU

用途

仅供科研

‌英文名称‌:Golden MLV Reverse Transcriptase (200U/ul)
作用机制:一种改良型的莫洛尼鼠白血病病毒逆转录酶,可以RNA为模板,催化合成互补DNA(cDNA),具备较高的逆转录效率和热稳定性,能有效逆转录富含二级结构的RNA模板。 

适用样本:总RNA、mRNA、病毒RNA等各类RNA样本,适用于cDNA文库构建、RT-PCR、qRT-PCR等实验。
产品概述
这是在鼠源病毒反转录酶基础上改良得到的第四代反转录酶,通过定点突变去除了RNase H活性,避免反转录过程中RNA被降解。经突变文库筛选后热稳定性显著提升,可耐受55℃高温反应(最佳活性温度为50℃),相比传统42℃反转录,能更有效地打开RNA二级结构,提升复杂RNA模板的扩增性能,增加反转录cDNA的长度与产量,进而提高后续检测灵敏度。以poly(rA)为模板、oligo(dT)为引物,在37℃条件下,10分钟内催化1nmol的dTTP掺入形成酸不溶性沉淀物所需的酶量定义为一个活性单位,-20℃可保存2-3年。
产品特点
RNase H活性:通过定点突变去除了RNase H活性,避免反转录过程中RNA被降解

热稳定性提升:经突变文库筛选后热稳定性显著提升,可耐受55℃高温反应(最佳活性温度为50℃),能更有效地打开RNA二级结构

高灵敏度:提升复杂RNA模板的扩增性能,增加反转录cDNA的长度与产量,进而提高后续检测灵敏度

活性定义明确:以poly(rA)为模板、oligo(dT)为引物,在37℃条件下,10分钟内催化1nmol的dTTP掺入形成酸不溶性沉淀物所需的酶量定义为一个活性单位
操作步骤

一、实验前准备

向漂洗液1中加入60mL无水乙醇,向漂洗液2中加入45mL无水乙醇,充分混匀后标记

载体RNA溶液配制:向300μg载体RNA冻干粉中加入300μL无酶水,充分溶解后得到1μg/μL的工作液,分装后-20℃保存

将冷冻样本置于室温解冻,轻轻颠倒混匀后备用

二、手工提取流程

样本裂解:取200μL血液样本至1.5mL离心管中,加入20μL蛋白裂解酶、300μL裂解缓冲液,振荡混匀10秒,室温孵育10分钟(每3分钟颠倒混匀1次)

磁珠结合:加入15μL磁珠悬浮液(使用前充分振荡混匀),振荡混匀10秒,室温孵育10分钟(每3分钟颠倒混匀1次)

磁珠分离:将离心管置于磁力架上,静置1-2分钟至磁珠完全吸附,小心吸弃上清液(避免触碰磁珠)

洗涤纯化:

取下离心管,加入500μL漂洗液1,振荡混匀1分钟,再次置于磁力架上分离磁珠,吸弃上清

重复上述操作1次

加入500μL漂洗液2,振荡混匀1分钟,置于磁力架上分离磁珠,吸弃上清

重复上述操作1次

干燥磁珠:保持离心管在磁力架上,室温晾干5-10分钟(确保乙醇完全挥发,避免过度干燥)

核酸洗脱:加入100-200μL洗脱缓冲液,振荡混匀后56℃孵育5分钟,置于磁力架上分离磁珠,上清液即为提取的核酸

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注意事项

实验操作需在洁净环境中进行,佩戴手套、口罩,避免样本交叉污染

蛋白酶K需-20℃保存,使用时避免反复冻融,可分装后使用

还原剂需现用现加,避免长时间暴露于空气中失效

若毛囊样本角质化严重,可适当延长孵育时间或增加还原剂用量

提取的DNA可置于-20℃长期保存,短期可在4℃储存

若需提高DNA产量,可将洗脱液重复洗脱一次吸附柱

 



Golden MLV Reverse T;

公司简介

派瑞曼pyram?是上海博湖生物科技有限公司(Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.,China)的产品品牌。 派瑞曼pyram?是一家化学、生化和材料科学等领域的科研用研发产品的制造商和供应商,我们的产品在相当宽的基础科学领域得到广泛的应用。 客户包括学术界、工业界和政府的研究和开发实验室以及制药、生物技术、化工/石化行业等具商业规模的企业。 派瑞曼pyram?除包括化学、分析化学、生命科学、材料科学和病理科学产品。质量是所有产品和服务最关键的组成部分,我们通过质量和实力赢得客户的信赖。产品的质量是企业的生命。 公司秉承"专注品质、诚信为本、服务至上、合作共赢"的企业文化积极参与生物领域的技术创新和技术服务,力求为我国科研事业更好的,更专业的服务!

成立日期 (13年)
注册资本 50.000000万人民币
员工人数 10-50人
年营业额 ¥ 300万-500万
经营模式 贸易
主营行业 生物化工,细胞培养,分子生物学,细胞生物学

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