DNA纯化柱 新品

基本信息‌

‌中文名称‌：DNA纯化柱

货号：P-PR1507

规格：100套/包

‌英文名称‌：DNA Purification Column
作用机制：采用特异性吸附材料，能选择性结合DNA，同时排斥蛋白质、多糖、脂类等杂质。通过离心或抽滤使含DNA的溶液流过柱子，DNA吸附在柱上，再用洗涤液去除杂质，最后用洗脱液将纯DNA洗脱下来。 

适用样本：各类经裂解处理后的生物样本，如细菌菌液、动植物组织裂解液、血液裂解液、拭子洗脱液等。
产品概述

DNA纯化柱基于硅胶膜吸附原理，在高盐低pH环境下选择性结合DNA，低盐高pH环境下释放DNA，可快速实现DNA的分离与纯化，广泛应用于分子生物学实验中的各类DNA处理场景。

产品参数

适用DNA片段范围：100bp - 10kb（部分型号可支持更长片段）

DNA回收效率：约90%（接近片段范围阈值的DNA回收效率略低）

最大吸附量：常规型号≥10μg，中量型号可达100μg

洗脱体积要求：常规型号≥6μl，中量型号建议250μl

储存条件：室温（0 - 30℃）保存，有效期12 - 36个月（具体依型号而定）

组件配置

核心组件

DNA纯化柱（内置硅胶膜）

配套收集管（1.5ml/2.0ml/15ml，依型号选择）

配套试剂（需单独或随试剂盒购买）

结合液：含高浓度胍盐，调节pH至酸性，促进DNA与硅胶膜结合

洗涤液：含乙醇，去除蛋白、盐离子等杂质（首次使用前需按比例添加无水乙醇）

洗脱液：TE缓冲液（pH8.0）或去离子水，用于洗脱纯化后的DNA

操作流程

（一）常规PCR/酶切反应产物纯化

结合步骤

将50 - 400μl反应液转移至离心管中，加入3倍体积的结合液，充分混匀

将混合液转移至DNA纯化柱，室温放置2 - 5分钟

10,000 - 12,000rpm离心30 - 60秒，倒掉收集管中的废液

洗涤步骤

向纯化柱中加入500 - 700μl洗涤液

10,000 - 12,000rpm离心30 - 60秒，倒掉收集管中的废液

重复洗涤步骤1次

空柱12,000rpm离心2分钟，彻底去除残留乙醇

洗脱步骤

将纯化柱转移至新的离心管中

向硅胶膜中央加入20 - 50μl洗脱液（预热至60℃可提高洗脱效率）

室温放置2 - 5分钟

12,000rpm离心2分钟，收集管中即为纯化后的DNA

（二）琼脂糖凝胶DNA回收

胶块处理

用手术刀切下含有目标DNA的琼脂糖凝胶块，尽量去除多余凝胶

向胶块中加入3倍体积的结合液，55 - 60℃水浴加热，期间间断混匀，直至胶块完全溶解

后续步骤

按照「常规PCR/酶切反应产物纯化」中的结合、洗涤、洗脱步骤操作

（三）基因组DNA提取（部分型号适用）

样本裂解

针对不同样本（细胞、血液、组织等），使用配套裂解缓冲液进行充分裂解

必要时可加入蛋白酶K，56℃水浴消化蛋白质

结合与纯化

向裂解液中加入结合缓冲液，调节pH至酸性

后续步骤同「常规PCR/酶切反应产物纯化」

注意事项

试剂准备

洗涤液首次使用前必须按说明书比例添加无水乙醇，否则无法有效去除杂质

所有试剂使用前需恢复至室温，避免温度差异影响DNA结合效率

操作细节

上柱前需确保溶液pH＜7，否则DNA无法有效结合至硅胶膜

洗脱液需加至硅胶膜中央，避免直接加至柱壁导致洗脱不完全

若需长期保存DNA，建议使用TE缓冲液洗脱，避免DNA降解

安全防护

操作过程中需佩戴一次性手套和实验服，避免样本污染和皮肤接触试剂

部分试剂含刺激性成分，如不慎接触皮肤或眼睛，需立即用大量清水冲洗

质量控制

纯度检测：纯化后DNA的A260/280比值应在1.7 - 1.9之间，A260/230比值≥2.0

完整性检测：通过琼脂糖凝胶电泳或毛细管电泳检测，DNA条带应清晰无弥散

下游验证：纯化后的DNA可直接用于PCR扩增、酶切、连接、测序等实验，验证其功能完整性

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