HS CUDG探针法荧光定量PCR试剂盒（防污染系统） 新品

基本信息‌

‌中文名称‌：HS CUDG探针法荧光定量PCR试剂盒（防污染系统）

货号：P-PR1428

规格：100反应、200反应、500反应

‌英文名称‌：HS CUDG Probe-based Quantitative PCR Kit (Contamination Prevention System)
作用机制：利用探针法荧光定量PCR原理，特异性探针与目标DNA序列结合，在PCR扩增过程中，Taq酶的5' - 3'外切酶活性切割探针，释放荧光基团产生荧光信号，荧光强度与扩增的DNA量成正比。防污染系统可有效抑制扩增产物的交叉污染，保证检测准确性。 

适用样本：基因组DNA、质粒DNA、PCR产物等纯化后的DNA样本。
产品概述

本试剂盒采用探针法荧光定量PCR技术，搭配dUTP/UDG防污染系统，可高效检测样本中的靶基因，适用于土壤、粪便、肿瘤、血液等复杂样本的科研检测。

产品特点

高特异性：使用化学修饰的超级热启动聚合酶，有效避免非特异扩增。

防污染设计：引入dUTP/UDG防污染系统，高效消除气溶胶对PCR检测的干扰。

强抗干扰能力：针对复杂样本优化反应体系，可稳定检测土壤、粪便等难度较高的样本。

稳定性优异：反应体系经充分验证，适合试剂盒开发及批量检测。

试剂盒组成

组件 规格 说明

2×HS CUDG Probe Mix 1ml/2ml 含热启动聚合酶、dNTP等

UDG酶（1U/μl） 20μl/50μl 防污染核心酶

探针混合液（10μM） 100μl 含特异性探针

引物混合液（10μM） 100μl 含上下游特异性引物

阳性对照 50μl 已知浓度的靶基因片段

无核酸酶水 1ml 用于体系配制及样本稀释

实验步骤

一、样本处理

采用常规核酸提取方法纯化样本DNA，推荐使用柱式提取试剂盒以保证纯度。

核酸浓度建议调整至10-100ng/μl，OD260/280比值应在1.8-2.0之间。

二、反应体系配制（20μl体系）

在冰浴中按以下顺序加入试剂：

试剂 体积 终浓度

2×HS CUDG Probe Mix 10μl 1×

UDG酶（1U/μl） 0.2μl 0.01U/μl

引物混合液（10μM） 0.4μl 0.2μM

探针混合液（10μM） 0.2μl 0.1μM

模板DNA 2μl 20-200ng

无核酸酶水 补至20μl -

三、PCR扩增程序

UDG预处理：50℃ 2分钟（降解残留的dU-DNA）

预变性：95℃ 3分钟（激活热启动聚合酶）

循环扩增（40个循环）：

95℃ 15秒（变性）

60℃ 30秒（退火+延伸，收集荧光信号）

四、结果分析

以阳性对照的浓度为横坐标，Ct值为纵坐标绘制标准曲线。

根据样本Ct值，通过标准曲线计算靶基因初始拷贝数。

Ct值＞38判定为阴性，需结合溶解曲线及重复实验确认结果。

注意事项

防污染操作：

实验需在独立的试剂配制区、样本处理区及扩增区进行，避免交叉污染。

所有移液器吸头使用带滤芯产品，操作过程中勤换手套。

试剂配制完成后，需在样本处理区加入模板DNA，严禁返回试剂区。

试剂保存：

2×HS CUDG Probe Mix、UDG酶需-20℃避光保存，避免反复冻融。

引物/探针混合液可-20℃长期保存，或4℃短期存放（1个月内）。

优化建议：

若出现非特异扩增，可适当提高退火温度（1-2℃）。

若Ct值偏高，可增加模板量至5μl，或优化样本提取方法以提高核酸纯度。

公司正在出售的产品