PolyA聚合酶 新品

基本信息‌

‌中文名称‌：PolyA聚合酶

货号：P-PR1430

规格：200U 5u/ul、400U 5u/ul

‌英文名称‌：Poly(A) Polymerase
作用机制：能够在RNA分子的3'末端催化添加多聚腺苷酸（PolyA）尾巴，模拟天然mRNA的结构，可增强RNA的稳定性、提升mRNA在体外翻译系统中的效率，或用于构建cDNA文库。 

适用样本：体外转录的RNA、天然RNA分子等。
产品概述

PolyA聚合酶是从重组菌株E.coli中分离得到的酶类，能够以单链RNA为模板、ATP为底物，在RNA的3′末端依次添加AMP，形成20~200个碱基长度的多聚A尾。该酶对RNA的3′末端加尾具有较高选择性，加尾长度可通过酶量、ATP浓度和反应时间灵活调控。

产品用途

增强mRNA稳定性：为mRNA添加PolyA尾，保护其免受核酸外切酶降解，延长半衰期

辅助cDNA合成：为microRNA等短链RNA添加PolyA尾，提供oligo-dT引物结合位点

提高RNA表达效率：增强转染或显微注射后RNA在细胞内的翻译效率

分子标记与纯化：用于RNA末端标记、克隆或亲和纯化等实验

组分规格（以100U规格为例）

组分名称 规格

Poly(A)聚合酶(5U/μL) 20μL

10×Poly(A)聚合酶缓冲液 1mL

10mM ATP溶液 100μL

25mM MnCl₂溶液 500μL

活性定义

在37℃、pH7.9条件下，10分钟内将1nmol AMP掺入到RNA分子所需的酶量定义为1个活性单位(U)。

标准反应体系（20μL）

试剂名称 体积

10×Poly(A)聚合酶缓冲液 2μL

Poly(A)聚合酶(5U/μL) 0.2~1μL

10mM ATP溶液 2μL

25mM MnCl₂溶液 2μL

RNA模板 0.5~10μg

RNase-Free水 补至20μL

⏱️ 反应条件与加尾长度调控

反应时间 预计加尾长度

30分钟 ~30个A碱基

1小时 ~100个A碱基

2小时 ~200个A碱基

注：相同RNA量和反应时间下，酶量增加会使加尾长度相应增大

终止与纯化方法

终止反应：添加EDTA至终浓度10mM，或65℃加热20分钟

RNA纯化：

酚/氯仿抽提法：产物稀释后加入等体积酚/氯仿混合液，离心取水相，加2倍体积无水乙醇沉淀RNA

柱纯化法：产物稀释后按照RNA纯化柱说明书进行操作

注意事项

本产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途

EDTA会抑制酶活性，反应体系中应避免引入EDTA

所有操作需使用RNase-Free耗材及试剂，防止RNA降解

酶活性受温度影响较大，建议在冰上进行试剂配制

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