Thermolabile Uracil-DNA Glycosylase热敏UDG酶 新品

基本信息‌

‌英文名称‌：Thermolabile Uracil-DNA Glycosylase (Thermolabile UDG)
作用机制：具有热敏感性，在较低温度下（如25-37℃）可识别并切除DNA链中的尿嘧啶碱基，形成无嘌呤/无嘧啶（AP）位点；当温度升高到PCR变性温度（如95℃）时，酶活性不可逆失活，避免在PCR扩增过程中降解新合成的DNA链。主要用于PCR反应的防污染，去除之前PCR反应中残留的含dUTP的产物。

适用样本：适用于所有需要进行PCR产物防污染的实验，如临床检测、科研中的PCR扩增实验，样本类型涵盖临床样本、环境样本、生物样本等。
产品概述
热敏型尿嘧啶-DNA糖基化酶，具有温度依赖性活性，在低温下能特异性识别并降解含尿嘧啶的DNA，防止PCR产物的交叉污染；而在高温（通常为PCR变性温度）下会迅速失活，不会影响后续的PCR扩增反应。该酶能有效降低假阳性结果，同时避免对目标DNA扩增的干扰，适用于需要严格控制污染的PCR、荧光定量PCR等实验。
产品特点
温度依赖性活性：低温下特异性降解含尿嘧啶的DNA，高温快速失活

防污染精准控制：PCR预变性阶段失活，不影响后续扩增反应

热稳定性可逆：温度变化可精确控制酶活性状态，实验设计灵活

兼容性强：适用于各种PCR和qPCR体系，有效降低假阳性
操作步骤

.配制反应体系：（以25μl体系为例）

组分 体积

10×反应缓冲液 2.5μl

MgCl₂（25mM） 1.5-2.5μl（根据模板调整）

dNTPs（10mM each） 0.5μl

上游引物（10μM） 1μl

下游引物（10μM） 1μl

模板DNA 1-5μl

3173 DNA Polymerase 0.2-0.5μl

ddH₂O 补至25μl

.PCR扩增：设置循环参数 95℃预变性3min；95℃变性30s，50-65℃退火30s，72℃延伸（1min/kb），25-35个循环；72℃终延伸10min

.产物处理：扩增产物需添加Loading Buffer后进行1%琼脂糖凝胶电泳

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注意事项

试剂预处理：使用前需按照瓶身标签提示，向漂洗液中加入指定体积的无水乙醇

沉淀处理：若裂解液、结合缓冲液出现沉淀，可在37℃水浴中加热溶解，摇匀后再使用

操作环境：实验需在洁净环境中进行，避免样本交叉污染；所有离心步骤均在室温下完成

试剂保存：试剂盒未开封时，可在15~25℃干燥环境下保存12个月；开封后蛋白酶K需置于-20℃保存，避免反复冻融

安全防护：若试剂接触皮肤或黏膜，需立即用大量自来水冲洗