Bst 4.0 SYBR Green Mix 新品

基本信息‌

‌英文名称‌：Bst 4.0 SYBR Green Mix
作用机制：预混了Bst 4.0 DNA聚合酶、dNTPs、Mg²⁺、SYBR Green荧光染料等成分。在等温扩增过程中，SYBR Green染料结合到新合成的双链DNA上，产生荧光信号，可实时监测扩增过程，实现对目标核酸的定量或定性检测。

适用样本：适用于需要实时监测的等温扩增实验，如病原体的快速定量检测、基因表达分析等，样本包括临床样本、环境样本、动植物组织等。
产品概述
基于Bst 4.0 DNA聚合酶和SYBR Green荧光染料的等温扩增-荧光检测预混试剂，整合了Bst 4.0聚合酶、反应缓冲液、dNTP、SYBR Green I荧光染料等组分。Bst 4.0聚合酶的强链置换活性保证了高效的等温扩增，SYBR Green I可实时监测扩增过程中的荧光信号变化，实现对核酸的定量分析。该产品适用于现场快速检测、病原体定量检测、基因表达分析等等温荧光定量实验。
产品特点
等温荧光定量：集成SYBR Green I染料，实时监测等温扩增过程

预混体系：包含Bst 4.0聚合酶、dNTP、SYBR Green染料等，使用便捷

高灵敏度：可实现对低拷贝核酸的准确定量

操作简便：恒温反应，无需PCR仪，适合现场快速定量检测
操作步骤

一、试剂预处理

取出洗涤液Ⅰ和洗涤液Ⅱ浓缩液，按试剂瓶标注比例加入无水乙醇，充分混匀后备用

将洗脱液置于65℃水浴锅中预热

二、水样处理与核酸富集

取10mL预处理后的水样（杂质较多的水样需先经0.45μm滤膜过滤）加入50mL洁净烧杯

依次加入0.5mL核酸富集因子、5mL病毒裂解液及50μL消化液，充分搅拌混匀

将烧杯置于65℃水浴中孵育15分钟，期间每隔5分钟搅拌一次

三、核酸纯化与洗脱

向烧杯中加入15mL异丙醇，充分搅拌混匀后，将混合液转移至连接富集吸附柱的50mL注射器针筒内

静置2分钟后，开启真空抽滤装置，将液体缓慢抽滤至富集吸附柱内（注意不要抽干）

向针筒内加入5mL洗涤液Ⅰ，静置2分钟后抽滤；再加入5mL洗涤液Ⅱ，静置2分钟后抽滤，重复洗涤液Ⅱ步骤1次

取下富集吸附柱，放入收集管中，12000rpm常温离心3分钟，去除残留洗涤液

将吸附柱转移至新的收集管，加入50-100μL预热的洗脱液，静置2分钟后12000rpm离心2分钟

收集管中的液体即为纯化后的病毒核酸，可直接用于下游实验或-70℃保存

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注意事项

试剂保存：试剂盒应避光保存于2-8℃，有效期12个月；核酸富集因子避免反复冻融，使用后立即放回冰箱

水样预处理：高浊度或杂质过多的水样，需先经0.45μm滤膜过滤，避免堵塞吸附柱

操作规范：实验全程佩戴手套、口罩、护目镜等防护用品，避免直接接触水样与试剂；若不慎接触皮肤或眼睛，立即用大量清水冲洗

试剂配制：洗涤液需现用现配，按比例加入无水乙醇后充分混匀，未使用的稀释液可在2-8℃保存1个月

核酸保存：提取的核酸若长期保存，需置于-70℃环境，避免反复冻融；短期可在4℃保存24小时

器材要求：所有实验器材需为无RNA酶耗材，实验前可经180℃干烤6小时或用RNA酶清除剂处理