蛋白酶抑制剂混合物A（100X） 新品

基本信息‌

‌英文名称‌：Protease Inhibitor Cocktail A (100X)
作用机制：包含多种蛋白酶抑制剂，可特异性抑制不同类型的蛋白酶活性，如丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶等，保护蛋白质在提取和纯化过程中不被降解。

适用样本：适用于各种生物样本的蛋白质提取，如细胞、组织、微生物等，用于需要抑制蛋白酶活性的实验，如蛋白质纯化、酶活性测定等。
产品概述
蛋白酶抑制剂混合物A（100X）是一类针对特定类型蛋白酶的抑制试剂，主要用于抑制丝氨酸蛋白酶与半胱氨酸蛋白酶的活性。它包含多种特异性蛋白酶抑制剂成分，如PMSF、亮抑酶肽、抑肽酶等，能有效阻断蛋白酶对蛋白的水解作用，在细胞裂解、蛋白提取及纯化过程中保护目的蛋白不被降解。该混合物使用方便，按1:100比例加入裂解液或蛋白样品中即可发挥作用，适用于大多数细胞与组织样本的蛋白处理。但需注意，其抑制范围相对专一，对于其他类型蛋白酶（如天冬氨酸蛋白酶）的抑制效果有限，若需全面抑制各类蛋白酶，可选择包含多种抑制剂类型的混合试剂。
产品特点
靶向抑制类型：主要抑制丝氨酸蛋白酶与半胱氨酸蛋白酶，如胰蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶等。

高性价比：针对常见蛋白酶设计，适合常规蛋白提取实验，成本较低。

稳定易用：100X浓缩液，-20℃可长期保存，使用时直接加入裂解液即可。

注意事项：对天冬氨酸蛋白酶与金属蛋白酶抑制效果有限，需根据实验需求选择。
操作步骤

一、实验前准备

向漂洗液1中加入60mL无水乙醇，向漂洗液2中加入45mL无水乙醇，充分混匀后标记

载体RNA溶液配制：向300μg载体RNA冻干粉中加入300μL无酶水，充分溶解后得到1μg/μL的工作液，分装后-20℃保存

将冷冻样本置于室温解冻，轻轻颠倒混匀后备用

二、手工提取流程

样本裂解：取200μL血液样本至1.5mL离心管中，加入20μL蛋白裂解酶、300μL裂解缓冲液，振荡混匀10秒，室温孵育10分钟（每3分钟颠倒混匀1次）

磁珠结合：加入15μL磁珠悬浮液（使用前充分振荡混匀），振荡混匀10秒，室温孵育10分钟（每3分钟颠倒混匀1次）

磁珠分离：将离心管置于磁力架上，静置1-2分钟至磁珠完全吸附，小心吸弃上清液（避免触碰磁珠）

洗涤纯化：

取下离心管，加入500μL漂洗液1，振荡混匀1分钟，再次置于磁力架上分离磁珠，吸弃上清

重复上述操作1次

加入500μL漂洗液2，振荡混匀1分钟，置于磁力架上分离磁珠，吸弃上清

重复上述操作1次

干燥磁珠：保持离心管在磁力架上，室温晾干5-10分钟（确保乙醇完全挥发，避免过度干燥）

核酸洗脱：加入100-200μL洗脱缓冲液，振荡混匀后56℃孵育5分钟，置于磁力架上分离磁珠，上清液即为提取的核酸

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注意事项

实验操作需在洁净环境中进行，佩戴手套、口罩，避免样本交叉污染

蛋白酶K需-20℃保存，使用时避免反复冻融，可分装后使用

还原剂需现用现加，避免长时间暴露于空气中失效

若毛囊样本角质化严重，可适当延长孵育时间或增加还原剂用量

提取的DNA可置于-20℃长期保存，短期可在4℃储存

若需提高DNA产量，可将洗脱液重复洗脱一次吸附柱