CCK-8细胞增殖和凋亡检测试剂 新品

基本信息‌

‌英文名称‌：CCK-8 Cell Proliferation and Apoptosis Assay Reagent
作用机制：WST-8（水溶性四唑盐）在细胞内脱氢酶的作用下，被还原为橙色的甲瓒产物；甲瓒产物的量与细胞增殖数量正相关，与细胞凋亡数量负相关；通过检测甲瓒产物的吸光度，可定量分析细胞增殖与凋亡情况。 

适用样本：贴壁细胞、悬浮细胞、肿瘤细胞等各类培养细胞的增殖与凋亡检测。
产品概述
CCK-8细胞增殖和凋亡检测试剂是一种基于WST-8（水溶性四唑盐）的细胞活性检测试剂，用于快速、准确地检测细胞增殖与凋亡情况。WST-8在细胞内脱氢酶的作用下，被还原为橙黄色的甲瓒产物（formazan），甲瓒产物的生成量与细胞的活性数量成正比。在细胞增殖实验中，随着细胞数量的增加，甲瓒产物生成量增多，吸光度值升高；在细胞凋亡实验中，细胞活性下降，甲瓒产物生成量减少，吸光度值降低。该试剂操作简便，仅需将CCK-8溶液加入到细胞培养孔中，孵育一定时间后，通过酶标仪检测吸光度值即可。它具有无放射性、细胞毒性低、检测灵敏度高、重复性好等优点，适用于多种细胞系的增殖与凋亡检测，广泛应用于药物筛选、细胞毒性测试、肿瘤研究、信号通路研究等领域。
产品特点
无放射性：采用比色法检测，避免了放射性同位素的危害，实验更安全。

细胞毒性低：对细胞损伤小，不影响后续实验，适合长期细胞毒性检测。

灵敏度高：可检测低至100个细胞的增殖变化，检测范围广。

操作简便：一步法操作，只需加入试剂孵育后读取吸光度，无需洗涤或提取步骤。

重复性好：实验结果变异系数小，数据可靠，适合高通量药物筛选。
操作步骤

一、实验前准备

向漂洗液1中加入60mL无水乙醇，向漂洗液2中加入45mL无水乙醇，充分混匀后标记

载体RNA溶液配制：向300μg载体RNA冻干粉中加入300μL无酶水，充分溶解后得到1μg/μL的工作液，分装后-20℃保存

将冷冻样本置于室温解冻，轻轻颠倒混匀后备用

二、手工提取流程

样本裂解：取200μL血液样本至1.5mL离心管中，加入20μL蛋白裂解酶、300μL裂解缓冲液，振荡混匀10秒，室温孵育10分钟（每3分钟颠倒混匀1次）

磁珠结合：加入15μL磁珠悬浮液（使用前充分振荡混匀），振荡混匀10秒，室温孵育10分钟（每3分钟颠倒混匀1次）

磁珠分离：将离心管置于磁力架上，静置1-2分钟至磁珠完全吸附，小心吸弃上清液（避免触碰磁珠）

洗涤纯化：

取下离心管，加入500μL漂洗液1，振荡混匀1分钟，再次置于磁力架上分离磁珠，吸弃上清

重复上述操作1次

加入500μL漂洗液2，振荡混匀1分钟，置于磁力架上分离磁珠，吸弃上清

重复上述操作1次

干燥磁珠：保持离心管在磁力架上，室温晾干5-10分钟（确保乙醇完全挥发，避免过度干燥）

核酸洗脱：加入100-200μL洗脱缓冲液，振荡混匀后56℃孵育5分钟，置于磁力架上分离磁珠，上清液即为提取的核酸

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注意事项

实验操作需在洁净环境中进行，佩戴手套、口罩，避免样本交叉污染

蛋白酶K需-20℃保存，使用时避免反复冻融，可分装后使用

还原剂需现用现加，避免长时间暴露于空气中失效

若毛囊样本角质化严重，可适当延长孵育时间或增加还原剂用量

提取的DNA可置于-20℃长期保存，短期可在4℃储存

若需提高DNA产量，可将洗脱液重复洗脱一次吸附柱