DNA Marker Ⅰ(for PAGE) 分子量标准 新品

基本信息‌

‌英文名称‌：DNA Marker Ⅰ (for PAGE) Molecular Weight Marker
作用机制：由一系列不同长度的DNA片段组成，在聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）中作为分子量标准，用于判断未知DNA片段的大小；可通过与未知DNA片段的迁移率比较，确定其分子量。 

适用样本：PCR产物、酶切产物等DNA片段的PAGE电泳分析，尤其适用于小分子DNA片段的检测。
产品概述
DNA Marker Ⅰ(for PAGE)是一种专为聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）设计的DNA分子量标准品，由一系列不同长度的双链DNA片段组成，适用于小分子量DNA片段的分子量判定。PAGE凝胶具有比琼脂糖凝胶更高的分辨率，能够有效分离长度差异较小的DNA片段（如几bp至几百bp）。DNA Marker Ⅰ(for PAGE)的片段大小范围通常覆盖几bp到几百bp，条带清晰、亮度均匀，在PAGE电泳过程中与样本DNA一起分离，通过比对样本条带与Marker条带的迁移位置，可精确确定样本中DNA片段的分子量。该分子量标准品常用于寡核苷酸合成质量检测、小片段PCR产物鉴定、DNA酶切片段分析、核酸适配体筛选等实验，为PAGE电泳中DNA片段的精确分析提供了重要的参考依据。
产品特点
PAGE专用：专为聚丙烯酰胺凝胶电泳优化，适合小分子量DNA片段的精确分析。

片段精细：包含10bp、20bp、30bp……200bp等多个DNA片段，分辨率可达10bp。

条带锐利：各条带清晰锐利，无拖尾，便于精确判断样本片段大小。

浓度均匀：各条带DNA浓度一致，亮度均匀，定量分析更准确。

适用性广：适用于寡核苷酸合成验证、小片段PCR产物鉴定、DNA酶切片段分析等实验。
实验前准备

试剂与耗材检查：确认PCR预混液、上下游引物、模板DNA、无酶水等试剂在有效期内，外观无浑浊、沉淀；PCR管、枪头需为无酶无菌规格。

仪器预热：提前10-15分钟启动PCR仪，设置好反应程序，确保仪器达到预设温度。

环境准备：在超净工作台内操作，佩戴无粉手套，避免交叉污染；操作前用75%酒精擦拭台面和移液器。

反应体系配制

冰上操作：将所有试剂放置于冰盒内，避免酶失活。

体系配比（以25μL体系为例）：

PCR预混液（含Taq酶、dNTP、Buffer）：12.5μL

上游引物（10μM）：1μL

下游引物（10μM）：1μL

模板DNA：1-5μL（根据模板浓度调整）

无酶水：补足至25μL

轻柔混匀：用移液器轻轻吹吸混合液3-5次，避免产生气泡；若有气泡可短暂离心去除。

分装体系：将配制好的反应液分装至PCR管中，每管25μL，盖紧管盖。

PCR仪上机反应

程序设置：根据引物Tm值和实验需求设置三步法或两步法程序：

预变性：95℃，3-5分钟

循环阶段：95℃变性30秒，55-65℃退火30秒，72℃延伸（根据片段长度调整，1kb约1分钟），循环25-35次

终延伸：72℃，5-10分钟

保温：4℃。

上机运行：将PCR管放入PCR仪样品槽，确保管盖紧密贴合；启动程序，等待反应完成。

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注意事项

无菌操作：所有试剂和耗材需高压灭菌或无菌处理，避免外源DNA污染

温度控制：酶、dNTP等试剂需-20℃储存，避免反复冻融

体系优化：根据引物Tm值、模板类型调整Mg²+浓度和退火温度

对照设置：每次实验需设置阴性对照（无模板）和阳性对照（已知阳性模板）