牛痘病毒-拓扑异构酶 新品

基本信息‌

‌中文名称‌：牛痘病毒-拓扑异构酶

货号：P-PR1398

规格：500U、5KU

‌英文名称‌：Vaccinia Virus Topoisomerase
作用机制：催化DNA拓扑结构的改变，通过暂时切断DNA单链或双链，使DNA链发生旋转、解旋或连环化反应，随后重新连接DNA链；可缓解DNA复制、转录过程中的超螺旋压力，促进染色质重构，来自牛痘病毒，具有广谱底物适应性。 

适用样本：体外DNA拓扑结构研究、重组DNA构建、染色质重构实验
产品概述

该酶来源于牛痘病毒，通过基因重组方案制备纯化。它能解旋DNA的超螺旋结构，还可识别并切割双链DNA末端[5’C(T)CCTT↓]，并与DNA形成共价连接形成稳定复合物，当该共价复合物遇到DNA的5’ - OH基团后，可重新连接形成完整DNA链，可作为DNA连接的有效工具，用于DNA的载体连接（TOPO克隆载体制备）、缺刻修复、接头连接（NGS建库）等实验。

产品组成

·牛痘病毒 - 拓扑异构酶（20U/μl），规格有25μl或250μl两种。

·10×vaccinia TOPOI Buffer，规格为1ml。

产品特点

·功能独特：兼具DNA解旋和连接功能，能高效完成DNA的载体连接、缺刻修复等操作。

·反应条件温和：适宜在37℃条件下进行反应。

·活性定义明确：1单位指在37℃条件下，1小时内使1μg超螺旋pUC19DNA解旋所需要的酶量。

操作步骤（以质粒解旋为例）在适宜的反应体系中加入适量的牛痘病毒 - 拓扑异构酶和待处理的质粒，37℃孵育5 - 15分钟即可完成质粒解旋。不同实验的具体操作步骤会有所差异，需根据实际需求调整。

注意事项

·1×vaccinia TOPOI Buffer组分为50mM Tris - acetate（pH7.5），100mM NaCl，2.5mM MgCl2，使用时需正确配制。

·该酶的最佳反应温度为37℃，80℃处理20分钟可使该酶失活。

·在切割偶联试验时，识别位点[5’C(T)CCTT↓]的3’端碱基数量会影响偶联效率。

·共价复合物进行DNA分子连接时，底物5’ - 端需要保留 - OH基团。

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